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2010版中国药典培训问答（第1部分：培养基配置）

广东省药检所对《中国药典》2010版微生物专题培训班的有关问题解答答案。

1. 含琼脂培养基冷却至25℃后已凝固，如何测定其pH？ 答：有专门的固体培养基pH计，如RadiometerA/S, DK22400 Copen2 hagen NV, Denmark 或者Microelectrodes Inc1, NH 03053,U1S1A1 。\

2. PH计测培养基的PH好像有比较大的差别，应如何选择PH计？（效价7.8的培养基我用普通理化室的PH计测定只有7.0左右，不知道是否因为在高温下测定（含琼脂）。

答：培养基应冷却到20℃～25℃才可测量，另外PH计应按时校准。 3. 生物指示剂对灭菌设备的性能，灭菌程序的验证是只验证一次呢，而后进行定期验证，如果生物指示剂换批号，是否要重新验证？ 答：应定期或不定期验证一次，确保灭菌设备正常。生物指示剂更换批号，不需重新验证。

4. 紫外线灭菌后，需要多久进去操作？ 答：打开通风净化设备，半小时后可入内操作。

5. 孟加拉培养基是否可以取代玫瑰红钠琼脂进行培养霉菌和酵母菌？

答：根据中国药典，采用玫瑰红钠琼脂。

6. 配制PH值7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液时有时因为高压灭菌器灭

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菌过程温度过高而导致培养基混浊了，这种情况缓冲液还能用吗？ 答：建议按正常温度灭菌，混浊培养基建议不要使用。 7. 培养基在冷藏中形成结晶怎么处理？①销毁 ②加热再用 ③待冷却完用。 答：建议不要使用

8. 融化的培养基为什么不能再冷水中冷却？ 答：防止受热不均引起结块

9. 取菌后测PH：（25℃）培养基配制好测PH，取其中一瓶测PH，那这一瓶测完就不能用了，污染了。 答：也可在无菌条件下取出适量测pH. 10. 配制分装过程中能否使用不锈钢锅？ 答：我实验室使用不锈钢锅，目前未发现异常。 11. 对新购进无菌0.9%氯化钠（500ml）能否再次灭菌？ 答：能。但包装完好，购入时间较短的无需灭菌。

12.“要定期对压力表进行检定（消毒锅），检定周期一般为半年”，这句话怎样理解，是厂家应半年自己检一次，还是有计量部门执行？ 答：由计量部门计量，计量后应发有检定证书。

13. 灭菌后，灭菌锅需自然冷却降压才可以打开，这段时间是否会造成过度灭菌。

答：自然冷却过程已经计算在正常灭菌时间内了，不会造成过度灭菌。

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14. 培养基常规质控有无强制检定项目？目前我们所做项目有：ph、无菌检查、生长检查、是否符合药典规定？ 答：培养基应按2010版药典检查。

15. 培养基所用器具若使用湿热灭菌，是否必须待干燥后才可以使用？若烘干或其它方法，中间过程怎样防止微生物污染？ 答：如果是马上使用且不是用于非水溶性供试液的制备及实验，不一定要烘干；否则，应干燥后使用，灭菌及干燥尽量在同一锅里进行，或用纱布和牛皮纸包扎紧密。

16. 培养基的避光储存，是否配置好的培养基其全部放避光储存？

答：最好都避光保存。无条件时，光敏感的培养基一定要。 17. 商品培养基干粉说是加蒸馏水溶解，实际操作是否可以用纯化水或注射用水？

答：只要不含有任何可能抑制或影响微生物生长的物质的水均可。 18. 灭菌后的培养基是否都要测ph值？如何测定ph值？ 答：每个制备批次的培养基都应测定ph，可采用ph试纸或ph计测量3002

19. 培养基及器具灭菌可否同一设备同灭菌时间进行灭菌？ 答：最好分开灭菌，条件不允许时可同炉灭菌，前提是都是洁净无污染的。

20. 培养基的保温能否用60℃的培养箱，它与45℃—55℃水浴锅

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