目前认为，解磷、溶磷微生物肥料是指含有能促使土壤中无效磷转化为有效磷的生物制品。将分解卵磷脂类的细菌称为有机磷细菌，将转化难溶性磷酸盐的细菌称为无机磷细菌。 （3）硅酸盐细菌肥料

硅酸盐细菌肥料是指含有硅酸盐细菌的制品，通常称作生物钾肥、钾细菌肥料、硅酸盐菌剂。 （4）光合细菌肥料

光合细菌的种类较多，包括蓝细菌、紫细菌、绿细菌和盐细菌等。与生产应用关系密切的主要是红螺菌科中的一些属、种。

（5）芽孢杆菌制剂

我国的微生物肥料近几年出现了一些芽孢杆菌类产品，其作用机理有的认为是固定氮素和解磷，有的则把它们归为激素产生菌，还有的认为与生物防治有关。 （6）抗生菌肥料

抗生菌肥料是指利用能分泌抗菌物质和刺激素的微生物制成的肥料产品，含有抗生菌的制品即为抗生菌肥料。 （7）复合微生物肥料

复合（复混）微生物肥料是指含一种以上有益微生物及其它营养物质的混合制剂。 3．如何防止菌种退化

⑴ 控制传代次数 尽量避免不必要的转接菌种，并将必要的传代次数降低到最低限度，以减少自发突变的几率。 ⑵ 创造良好的培养条件 创造良好的适宜原种培养条件，就可以在一定程度上防止菌种退化。 ⑶ 利用不同的细胞进行转接 利用菌丝、孢子或芽胞进行转接就可以防止菌种退化。 ⑷ 采用有效的菌种保藏方法 四、论述题(30分)

1.举例说明微生物多样性和环境适应性及其用于农业生产中的实例

⑴ 微生物肥料的直接作用和间接作用；直接为作物提供营养元素，活化土壤养分，增加土壤肥力，促进作物对营养元素的吸收，分泌多种生理活性物质刺激和调节植物生长，产生抗病和抗逆作用，间接促进植物生长，减少化肥用量，提高农产品品质。

⑵ 微生物农药作用；微生物与土壤环境及植物间关系；为提高作物产量大量施用化肥、农药加剧了土壤生态系统的破坏，使用微生物肥料是修复土壤生态系统的关键措施。微生物肥料进入土壤生态系统后，在适当的水分、温度、pH值等条件下，与土壤有益微生物共同形成优势菌群，促进土壤生态系统中碳、氮和氧的循环。

⑶ 微生物农药作用；如以菌治虫，以菌治病，以菌治草（微生物除草剂）。 2．微生物的六大营养要素

⑴ 碳源 凡能提供微生物营养的碳元素（碳架）的营养源，称碳源。微生物可利用的碳源范围即碳源谱是极广的。主要有单糖、多糖和双糖、纤维素。

⑵ 氮源 凡能提供微生物生长繁殖所需要氮元素的营养源，称为氮源。

有有机氮、无机氮、 气态氮。微生物的氮源谱有很多特点，与碳源相似，微生物氮源谱也大于动物植物。

⑶ 能源 所谓能源，就是能为微生物的生命活动提供最初能量来源的营养物或辐射能。由于各种异样微生物的能源就是其碳源，所以，其能源谱十分简单。

能作化能自养微生物能源的物质都是一些还原态的无机物质，能氧化利用这些物质的微生物都是细菌，由于这类独特的化能自养营养类型在微生物中的存在，说明生物界的能源并非像过去普遍认为的只是直接或间接利用太阳能这一种方式而已。

⑷ 生长因子 是一类对微生物正常代谢必不可少且不能用简单的碳源或氮源自行合成的有机物。它的需要量很小，广义的生长因子除了维生素外，还包括碱基、及其衍生物、甾醇、胺类、C4-C6的分枝或直链脂肪酸，以及需要量较大的氨基酸；而狭义的生长因子一般仅指维生素。

-3-4

⑸ 无机盐 无机盐主要可为微生物提供除碳、氮源以外的各种重要元素。凡是生长所需浓度在10--10范围内

-6-8

的元素，可称为大量元素。凡所需浓度在10-10vmol/L范围内的元素，则称为微量元素。 （6）水 除了少数微生物能利用水中的氢作为还原二氧化碳时的还原剂外，其他微生物都不是利用水作为营养物质。即使如此，由于水在微生物生命活动过程包括营养过程中的重要性，它仍应属于营养要素之一。

作业题五参考答案

一、名词解释（20分）

消毒：是一种采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌，而对被消毒的物体基本无害的措施。

衣原体：是一类在真核细胞内营专性能量寄生的小型革兰氏阴性原核生物。

真核微生物：凡是细胞核具有核膜、能进行有丝分裂、细胞质中存在线粒体或同时存在叶绿体等细胞的微小生物，就称真核微生物。

附着胞：许多植物寄生真菌在其芽管或老菌丝顶端发生膨大，并分泌粘状物，借以牢固地粘附在宿主的表面，这一结构就是附着胞。

类病毒：是当今所知道的最小只含RNA 的一种成分、专性细胞内寄生的分子生物。

拮抗作用：所谓拮抗，系指由某种生物所产生的某种代谢产物可抑制他种生物的生长发育甚至杀死它们的一种相互关系。

菌核：是一种休眠的菌丝组织。其外层较坚硬、色深，内层疏松，大多呈白色。菌核的形状有大有小。 捕食作用：一般指一种较大型的生物直接捕捉、吞食另一种小型生物以满足其营养需要的相互关系。 指数期：又称对数期，是指在生长曲线中，紧接着延滞期的一个细胞以几何级数速度分裂的一段时期。

选择性培养基： 选择性培养基就是根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，其功能是使混合菌样中的劣势转变成优势，从而提高该菌的筛选效率。 二、填空 （20分）

1. 微生物的营养类型有光能自养型、光能异养型、化能自养型、化能异养型； 2. 培养基按成分划分有天然培养基、组合培养基、半组合培养基； 3. 微生物间相互关系有互生、共生、寄生、拮抗、捕食；

4. 微生物肥料的种类为固氮菌肥料、磷细菌、钾细菌、复合微生物肥料、抗生菌肥料； 5．微生物农药的种类为细菌、真菌、病毒。 三、简答题 （30分）

1．试述培养基配制是应该注意的四个问题

⑴ 目的明确 在设计新培养基前，首先要先明确配制该培养基的目的，例如，要培养何菌？获得何产物？用于实验室作科学研究还是用于大规模的发酵生产？作生产中的“种子”，还是用于发酵？等等。

⑵ 营养协调 通过菌体成分的分析，可知道在各种微生物细胞中，其不同成分或元素间是有较稳定比例的；另外，在异样微生物中，碳源还兼作能源，而能源的需要量是很大的。这两点是确定培养基中各种营养要素的数量和比例的重要依据。

⑶ 物理化学条件适宜

① pH 各大类微生物一般都有它们合适的生长的pH范围。 ② 适宜氧化还原势和渗透压

⑷ 经济节约 经济节约主要指在设计生产实践中所使用的大量培养基遵循的原则。 2．微生物的连续培养

连续培养又称开放培养，是相对于上述绘制典型生长曲线时所采用的那种单批培养或密闭培养而言的。

连续培养是在研究典型生长曲线的基础上，通过认识稳定期到来的原因，并采取相应的有效措施而实现的。具体地说，当微生物以单批培养的方式培养到指数期的后期时，一方面以一定速度连续流进新鲜培养基一并立即搅拌均匀，另一方面，利用溢流的方式，以同样的流速不断流出培养物。这样，培养物就达到动态平衡，其中的微生物可长期保持在指数期的平衡生长状态和稳定的生长速率上。 3．试述影响微生物生长因素

⑴ 温度 由于微生物的生命活动是由一系列生物化学反应组成的，而这些反应受温度的影响极为明显，因此，温度是影响微生物生长的最重要的因素之一。

⑵ 氧气 地球上的整个生物圈都被大气层包围着。因此，氧对微生物的生命活动有着极其重要的影响。 ①专性好氧菌；② 兼性厌氧菌；③微好氧菌；④耐氧菌；⑤厌氧菌

⑵ pH 微生物作为一个总体来说，其生长的pH范围极广pH在2～8，有少数种类还可超出这一范围，事实上，绝大多数种类部生长在pH5～9之间。 与温度相类似，不同生物的生长pH，存在最高、最适与最低三个数值。凡其最适生长pH值偏于碱性范围内的微生物，有的是嗜碱性的，称嗜碱微生物；有的是不一定要在碱性条件下生活，但能耐较碱的条件，称耐碱微生物生长pH值偏于酸性范围内的微生物也有两类，一类是嗜酸微生物；另一类是耐酸微生物。一般地说，多数真菌是嗜酸的，而多数放线菌则是嗜碱的。 四、论述题（30分）

1．高温杀菌的种类及其影响因素

高温杀菌温度范围较广。高温的致死作用，主要是由于它使微生物的蛋白质和核酸等重要生物高分子发生变性、破坏。高温灭菌或消毒的方法主要有以下几种。

⑴ 干热灭菌法 将金属制品或清洁玻璃器皿放入电热烘箱内，在150～170℃下维持1～2小时后，即可达到彻底灭菌的目的。

⑵ 湿热灭菌法

① 常压法：巴氏消毒法；煮沸消毒法； 间歇灭菌法 ② 加压法： 常规加压灭菌法；连续加压灭菌法。 ⑶ 影响加压蒸汽灭菌效果的因素有：①灭菌物体含菌量的影响不同的微生物个体(包括营养体和孢子)的耐热性是有差别的，所以，灭菌物体中的含菌量越高，杀死最后一个个体所需的时间就越长；②灭菌锅内空气排除程度的影响；③灭菌对象PH值的影响；④灭菌对象的体积。 2．微生物在自然界物质循环中的作用

化学元素的有机化过程主要是由绿色织物和无机营养型微生物完成的，利用光能和化学能将二氧化碳和水和成碳水化合物，在同其他元素结合而转化微生物体的各种成分。生物在进行合成的同时也进行分解作用，最终产物是二氧化碳和水和无机化合物，并释放能量。植物与无机营养型微生物合成作用超过分解作用，因此，他们生命活动结果是有机物质在自然界中的累积。有机营养型微生物以生物来源的有机物质为养料，获得能量和组成细胞。在有机物质分解过程中，微生物的作用超过其他任何生物。