第一节 探索遗传物质的过程

第2课时

【高效导航】 1.学习目标：

（1）初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法。 （2）观察提取出来的DNA物质。

（3）理解DNA的理化特性及根据其理化特性而提取和鉴定的原理。 （4）利用DNA的性质进行实验分析和实验设计。 2.学习重点：

（1）DNA的提取的原理。 （2）DNA的提取的实验过程。 （3）DNA的鉴定技术。 3.学习难点：

DNA的粗提取的原理和过程。

“看”——知识经纬

探索遗传物质的过程（2）

DNA是主要的遗传物质 探索遗传物质的过程 提取DNA 边做边学：DNA的粗提取 继续探究：DNA的鉴定 步骤 原理 材料 试剂 步骤 原理 材料 试剂 “导”—自主预习

二、提取DNA （一）实验原理

1.DNA在NaCl溶液中的溶解度是随NaCl的浓度变化而改变的。DNA在___mol/L的NaCl溶液中的溶解度 ，据此可使溶解于NaCl溶液中的 。

2.DNA不溶于酒精溶液，但细胞中某些物质可以溶于 溶液，据此可提取杂质较少的DNA。

3.DNA＋二苯胺?沸水浴??? 色（用于DNA的鉴定） （二）实验步骤 1.材料制备

0.1g/mL柠檬酸钠100mL??500mL烧杯?玻璃棒搅拌?1000r/min离心2min 活鸡血180mL? ?________?即得鸡血细胞液2.方法步骤

?取血细胞液5?10mL＋20mL蒸馏水，玻璃棒沿一个??方向快速搅拌?纱布过滤，滤液中含DNA和其他________，如蛋白质（1）提取血细胞核物质 ??原理：血细胞的细胞膜、核膜吸水涨破，玻璃棒快速 ?? ?搅拌机械加速血细胞_______ （2）溶解核内DNA：滤液＋2mol/LNaCl溶液40mL，玻璃棒沿 个方向搅

拌

（3）析出含DNA的粘稠物：向上述溶液中 加入蒸馏水，并轻轻地沿_____个方向搅拌，出现丝状物，当丝状物不再增加时，停止加水（此时NaCl溶液相当于稀释到0.14mol/L）

（4）滤取含DNA的粘稠物：用 层纱布过滤，含DNA的粘稠物留在纱布

上

（5）DNA粘稠物再溶解： 20mL2mol/LNaCl溶液 50mL烧杯， 上述粘稠物 缓慢搅拌 min （6）过滤含DNA的2mol/LNaCl溶液：用 层纱布过滤，滤液中含DNA （7）提取含杂质较少的DNA：上述溶液＋95%酒精， 搅拌，出现乳白色

物，用玻璃棒将丝装物卷起。

（8）DNA鉴定：

“学”—互动探究

探究一 DNA的粗提取

阅读课本P56-P57边做边学相关内容，并结合图4－4和图4－5，思考并小组讨论下列问题：

1.鸡血能用猪血代替吗？为什么？

提示：不能，因为哺乳动物的红细胞中没有细胞核，不能提取DNA。 2.鸡血中为何要加柠檬酸钠？为何要弃去鸡血细胞的上清液？ 提示：防止血液凝固；因为上清液是血浆，不含细胞和DNA。

3.结合教材图4－4和图4－5回答，DNA在NaCL溶液中的溶解度是如何变化的？如何利用这一特点控制DNA在盐溶液中的溶解或者析出？

提示：DNA在0.14mol/L的NaCL溶液中的溶解度最小；高于或者低于0.14mol/L时，DNA的溶解度 又逐渐加大。

4.DNA对其它物质的溶解性和耐受性有什么特点？这些特点对DNA的提取和鉴定有何作用？

提示：DNA不溶于酒精溶液，某些蛋白能溶于其中，可以将DNA与蛋白质进一步分离。蛋白酶能水解蛋白质，但对DNA没影响，大多数蛋白质不能忍受60--80℃的高温，而DNA在80 ℃以上才变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。

5.前后三次过滤时，所用纱布的层数分别是多少？为什么？

提示：第一次用一层纱布，有利于核物质透过纱布进入滤液；第二次用多层纱布，能防止DNA丝状物透过纱布进入滤液；第三次用两层纱布，既有利于DNA透过纱布，又能防止其它杂质透过纱布。 6.若实验中所得黏稠物太少，其原因是什么？

提示：第一次加蒸馏水过少，细胞未充分胀破；第二次加蒸馏水过多或过少；第一次过滤用了多层纱布；第二次过滤用了一层纱布；使用了玻璃烧杯。 7.为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？

提示：用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。 8.用玻璃棒搅拌有什么意义？

提示：用玻璃棒搅拌可以加速血细胞和细胞核的破裂。注意应沿一个方向快速