苏教版高中生物必修二《探索遗传物质的过程》第2课时探究学案-新版 下载本文

第一节 探索遗传物质的过程

第2课时

【高效导航】 1.学习目标:

(1)初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法。 (2)观察提取出来的DNA物质。

(3)理解DNA的理化特性及根据其理化特性而提取和鉴定的原理。 (4)利用DNA的性质进行实验分析和实验设计。 2.学习重点:

(1)DNA的提取的原理。 (2)DNA的提取的实验过程。 (3)DNA的鉴定技术。 3.学习难点:

DNA的粗提取的原理和过程。

“看”——知识经纬

探索遗传物质的过程(2)

DNA是主要的遗传物质 探索遗传物质的过程 提取DNA 边做边学:DNA的粗提取 继续探究:DNA的鉴定 步骤 原理 材料 试剂 步骤 原理 材料 试剂 “导”—自主预习

二、提取DNA (一)实验原理

1.DNA在NaCl溶液中的溶解度是随NaCl的浓度变化而改变的。DNA在___mol/L的NaCl溶液中的溶解度 ,据此可使溶解于NaCl溶液中的 。

2.DNA不溶于酒精溶液,但细胞中某些物质可以溶于 溶液,据此可提取杂质较少的DNA。

3.DNA+二苯胺?沸水浴??? 色(用于DNA的鉴定) (二)实验步骤 1.材料制备

0.1g/mL柠檬酸钠100mL??500mL烧杯?玻璃棒搅拌?1000r/min离心2min 活鸡血180mL? ?________?即得鸡血细胞液2.方法步骤

?取血细胞液5?10mL+20mL蒸馏水,玻璃棒沿一个??方向快速搅拌?纱布过滤,滤液中含DNA和其他________,如蛋白质(1)提取血细胞核物质 ??原理:血细胞的细胞膜、核膜吸水涨破,玻璃棒快速 ?? ?搅拌机械加速血细胞_______ (2)溶解核内DNA:滤液+2mol/LNaCl溶液40mL,玻璃棒沿 个方向搅

(3)析出含DNA的粘稠物:向上述溶液中 加入蒸馏水,并轻轻地沿_____个方向搅拌,出现丝状物,当丝状物不再增加时,停止加水(此时NaCl溶液相当于稀释到0.14mol/L)

(4)滤取含DNA的粘稠物:用 层纱布过滤,含DNA的粘稠物留在纱布

(5)DNA粘稠物再溶解: 20mL2mol/LNaCl溶液 50mL烧杯, 上述粘稠物 缓慢搅拌 min (6)过滤含DNA的2mol/LNaCl溶液:用 层纱布过滤,滤液中含DNA (7)提取含杂质较少的DNA:上述溶液+95%酒精, 搅拌,出现乳白色

物,用玻璃棒将丝装物卷起。

(8)DNA鉴定:

“学”—互动探究

探究一 DNA的粗提取

阅读课本P56-P57边做边学相关内容,并结合图4-4和图4-5,思考并小组讨论下列问题:

1.鸡血能用猪血代替吗?为什么?

提示:不能,因为哺乳动物的红细胞中没有细胞核,不能提取DNA。 2.鸡血中为何要加柠檬酸钠?为何要弃去鸡血细胞的上清液? 提示:防止血液凝固;因为上清液是血浆,不含细胞和DNA。

3.结合教材图4-4和图4-5回答,DNA在NaCL溶液中的溶解度是如何变化的?如何利用这一特点控制DNA在盐溶液中的溶解或者析出?

提示:DNA在0.14mol/L的NaCL溶液中的溶解度最小;高于或者低于0.14mol/L时,DNA的溶解度 又逐渐加大。

4.DNA对其它物质的溶解性和耐受性有什么特点?这些特点对DNA的提取和鉴定有何作用?

提示:DNA不溶于酒精溶液,某些蛋白能溶于其中,可以将DNA与蛋白质进一步分离。蛋白酶能水解蛋白质,但对DNA没影响,大多数蛋白质不能忍受60--80℃的高温,而DNA在80 ℃以上才变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。

5.前后三次过滤时,所用纱布的层数分别是多少?为什么?

提示:第一次用一层纱布,有利于核物质透过纱布进入滤液;第二次用多层纱布,能防止DNA丝状物透过纱布进入滤液;第三次用两层纱布,既有利于DNA透过纱布,又能防止其它杂质透过纱布。 6.若实验中所得黏稠物太少,其原因是什么?

提示:第一次加蒸馏水过少,细胞未充分胀破;第二次加蒸馏水过多或过少;第一次过滤用了多层纱布;第二次过滤用了一层纱布;使用了玻璃烧杯。 7.为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?

提示:用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。 8.用玻璃棒搅拌有什么意义?

提示:用玻璃棒搅拌可以加速血细胞和细胞核的破裂。注意应沿一个方向快速