供试品溶液的制备：精密称取样品2. 0134g，置烧杯中，加无水乙醇约30ml，在水浴上加热使溶解，再置冰水中冷却，滤过，滤液置l00ml量瓶中，如此提取3次，滤液并人量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。

测定法：精密量取对照品溶液与供试品溶液各1ml，分别置于干燥的具塞试管中，各精密加无水乙醇9ml与氯化三苯四氮唑试液1ml，摇匀，各精密加入氢氧化四甲基铵试液1ml，摇匀，在25℃的暗处放置40 ~45分钟，在485nm的波长处分别测定吸光度。

测得：供试品溶液的吸光度为0. 513；对照品溶液的吸光度为0.525。 计算：氢化可的松软膏的标示量%。 （七）设计题

32.已知某药物结构式为：

(1)该药物属于哪类药物，有哪些结构特点。

(2)根据药物的结构，设计合理的化学鉴别反应（5个）；该药物应检查何种特殊杂质，现行版中国药典采用何种方法检查；其含量测定现行版中国药典采用何种方法；含量测定，亦可采用哪些比色法，简述其原理。

33.今有三瓶药物分别为醋酸泼尼松(A)、苯丙酸诺龙(B)和炔诺酮(C)，但瓶上标签脱落，请采用适当的化学方法将三者区分开。

第十六章 抗生素药物的分析

（一）p内酰胺类抗生素

青霉素和头孢菌素分子中都有一个游离羧基和酰胺侧链。氢化噻唑环或氢化噻嗪环与p-内酰胺并合的杂环，分别构成二者的母核。青霉素类分子中的母核称为6一氨基青霉烷酸（6-aminopenicillanic acid，简称6-APA）；头孢菌素类分子中的母核称为7一氨基头孢菌烷酸（7-aminocephalosporanic acid，简称7-ACA）。由此也可以说，青霉素类的分子结构由侧链RCO-与母核6-APA两部分结合而成；头孢菌素类是由侧链RCO-与母核7-ACA组成。

本类药物的分子结构中有一个游离羧基，因此具有一定的酸性，能与氢氧化碱或有机碱成盐；B一内酰胺环是该类抗生素分子结构中最不稳定部分，在不同条件下部分水解生成青霉噻唑酸（碱性或青霉素酶）、青霉烯酸( pH 4)和青霉酸(pH 2)，在强酸、如热或金属离子催化下完全水解生成青霉醛、青霉胺和二氧化碳等降解产物而失活；青霉素类分子中含有三个手性碳原子，头孢菌素类含有两个手性碳原子，故都具有旋光性；头孢菌素类母核部分具有O=C-N-C=C结构，R取代基具有苯环等共轭系统，有紫外吸收；青霉素及头孢菌素可发生羟肟酸铁反应、茚三酮反应和钾盐或钠盐的火焰反应。

本类药物的鉴别试验，ChP、USP、BP采用的方法主要为HPLC、IR和TLC法。 本类抗生素的杂质主要有高分子聚合物、有关物质、异构体等，一般采用HPLC法控制其限量，也有采用测定杂质的吸光度来控制杂质量的。此外，有的还进行结晶性、抽针与悬浮时间等有效性试验，部分抗生素还要检查有机溶剂残留量。

各国药典收载的青霉素类和头孢菌素类的含量测定除少数几个样品采用抗生素微生物检定法测定外，大多采用HPLC测定方法。 （二）氨基糖苷类抗生素

本类抗生素的化学结构都是以碱性环己多元醇为苷元，与氨基糖缩合而成的苷，故称为氨基糖苷类抗生素（aminoglycoside antibiotics）。

链霉素（streptomycin，SM，即链霉素A）的结构为一分子链霉胍和一分子链霉双糖胺结合而成的碱性苷。其中链霉双糖胺是由链霉糖与N-甲基-L-葡萄糖胺所组成。链霉胍与链霉双糖胺间的苷键结合较弱，链霉糖与N-甲基-L-葡萄糖胺间的苷键结合较牢。

庆大霉素( gentamycin)是由绛红糖胺、脱氧链霉胺和加洛糖胺缩合而成的苷。它是庆大霉素C复合物，其主要组分是C1、C2、C1a。及C2a。尚有少量次要成分(如庆大霉素A1、A2、A3、A4、B、B1、X……)。庆大霉素C1、C2、C1a。三者结构相似，仅在绛红糖胺C石位及氨基上甲基化程度不同。C2a是C2的异构体。

巴龙霉素( paromomycin)由巴龙胺和巴龙二糖胺结合而成的苷。

本类药物的分子结构具有一些共同或相似处，具有相似的性质，如旋光性、水解反应 及颜色反应。其中，与茚三酮反应、糠醛反应（Molisch反应）、葡萄糖胺反应(Elson- Morgan反应）等属于共有反应；而坂口反应（Sakaguchi反应）、麦芽酚反应（Maltol反应）是硫酸链霉素的特征反应。本类药物多为硫酸盐，因此，各国药典都将硫酸根的鉴定作为鉴别这类抗生素的一个方法。

各国药典对本类抗生素的有关物质检查主要采用TLC和HPLC法。本类抗生素多为同系

物组成的混合物，同系物的效价、毒性各不相同，为保证药品的质量，必须控制各组分的相对含量，如ChP2010对硫酸庆大霉素、硫酸小诺米星等规定了组分分析。

本类抗生素的效价测定主要有微生物检定法和HPLC法。目前各国药典仍主要采用抗生素微生物检定法。各国药典对本类的部分药物采用HPLC法测定，如ChP2010采用HPLC-蒸发光散射法测定硫酸卡那霉素、硫酸依替米星等药物的含量。 （三）四环素类抗生素

本类抗生素在化学结构上，都具有四并苯或萘并萘环构成，故统称为四环素类(tetracyclines)抗生素。四环素类抗生素在酸性和碱性条件下均不稳定，四环素类药物中含有许多羟基、烯醇羟基及羰基，在中性条件下能与多种金属离子形成不溶性螯合物。与钙或镁离子形成不溶性的钙盐或镁盐，与铁离子形成红色络合物，与铝离子形成黄色络合物。 本类药物分子中具有不对称碳原子，因此有旋光性；同时本类药物内含有共轭双键系统，在紫外光区有吸收；遇硫酸立即变色，不同的四环素类具有不同的颜色，加水稀释后变为黄色，可予以鉴别。

本类药物在弱酸性( pH 2.0~6.0)溶液中会发生差向异构化反应，形成差向四环素类( ETC)；在酸性条件下(pH<2)，特别是在加热情况下，生成脱水四环素( ATC)；在碱性溶液中，C环破裂，生成无活性的具有内酯结构的异构体。脱水四环素亦可进一步形成差向异构体，称差向脱水四环素( EATC)。

本类药物中的有关物质主要是指在生产和贮存过程中易形成的异构杂质、降解杂质（ETC、ATC、EATC）等。ChP2010、USP34-NF29和BP2010均采周HPLC法控制四环素类抗生素中的有关物质。

本类药物分子结构中含有共轭系统，在紫外光区有吸收，目前各国药典多采用高效液 相色谱法进行含量测定。 （一）最佳选择题

A 1．具有6-APA母核的药物是

A．青霉素钠 B．硫酸庆大霉素 C．盐酸土霉素 D．盐酸四环素 E．头孢克洛 E 2．《中国药典》（2010年版）青霉素V钾的含量测定方法是

A．碘量法 B．微生物法 C．酸性染料比色法 D．气相色谱法 E．高效液相色谱法 C 3．青霉素在pH =2条件下，易发生分子重排，其产物是

A．青霉烯酸 B．青霉醛 C．青霉酸 D．青霉胺 E．青霉噻唑酸 E 4.具有B-内酰胺环结构的药物是

A.阿司匹林 B．奎宁 C．四环素 D．庆大霉素 E．阿莫西林 A 5．在碱性或青霉素酶的作用下，青霉素易发生水解，生成

A．青霉噻唑酸 B．青霉胺 C．青霉酸 D．青霉烯酸 E．青霉醛 D 6.青霉素族药物在pH =4条件下，易发生分子重排，其产物是

A．青霉胺 B．青霉醛 C．青霉酸 D．青霉烯酸 E．青霉噻唑酸 B 7．具有7-ACA母核的药物是

A．阿米卡星 B．头孢拉定 C．盐酸四环素 D．硫酸奈替米星 E．盐酸美他环素

D 8．各国药典中用于氨基糖苷类药物的含量测定方法主要是 A．紫外分光光度法 B．红外分光光度法 C．薄层法 D．抗生素微生物检定法 E．气相色谱法 B 9．可用糠醛反应（Molisch反应）鉴别的药物是

A．青霉素钠 B．庆大霉素 C．盐酸四环素 D．头孢拉定 E．盐酸美他环素 A 10.链霉素具有的特征反应是

A．坂口反应 B．柯柏反应 C．硫色素反应 D．差向异构反应 E．戊烯二醛反应 E 11.可发生麦芽酚反应的药物是

A．氨苄西林 B．头孢呋辛酯 C．庆大霉素

A 12. HPLC法测定庆大霉素C组分，《中国药典》用蒸发光散射检测器检测的原因是 A．分子结构中无共轭体系，在紫外区无吸收 B．利用庆大霉素与巯基醋酸反应后具有紫外吸收 C．利用分子结构中的氨基与茚三酮反应后具有紫外吸收 D．利用分子结构中的氨基与邻苯二醛反应后具有紫外吸收 E．利用分子结构中的氨基与8一羟基喹啉反应后具有紫外吸收 D13.各国药典中四环素类药物的主要含量测定方法是 A．紫外分光光度法 B．气相色谱法 C．比色法 D．高效液相色谱法 E．微生物检定法

A 14.在弱酸性(pH=2.0~6．O)溶液中可发生差向异构化的药物是

A．四环素 B．土霉素 C．青霉素 D．多西环素 E．美他环素 E 15.在酸性(pH<2)溶液中可发生脱水反应的药物是

A．庆大霉素 B．氨苇西林 C．头孢呋辛酯 D．链霉素 E．四环素

D 16．盐酸四环素在碱性条件下，易降解生成的产物是

A．金霉素 B．差向脱水四环素 C．脱水四环素 D．异四环素 E．差向四环素 （二）配伍选择题 [17—18J

A．羟肟酸反应 B．柯柏反应 C．硫色素反应 D．四氮唑盐反应 E．麦芽酚反应 下列药物可发生的反应是

A 17.磺苄西林钠 E 18.硫酸链霉素 [19—21]

A．与硫酸呈色反应 B．戊二醛反应

C．坂口反应 D．火焰反应 E．C．，．仅一醇酮基的呈色反应 可用于下列药物鉴别的反应是

D 19.青霉素钾 C 20.硫酸链霉素 A 21.盐酸四环素 [22~23]

A．抗生素微生物检定法 B．HPLC法

C．碘量法 D．硫色素荧光法 E．四氮唑比色法 用于下列药物含量测定的方法是 B 22.青霉素 B 23.盐酸四环素 [24—27]

A．绛红糖胺 B．链霉胍 C．氢化噻嗪环 D．氢化噻唑环 E．环戊烷并多氢菲 下列药物分子中含有的结构是

C 24.头孢氨苄 D 25.阿莫西林 A 26.庆大霉素 B 27.链霉素 （三）多项选择题

ABCDE 28.具有旋光性的抗生素类药物有

A．盐酸四环素 B．头孢氨苄 C．氨苄西林钠 D．盐酸土霉素 E．硫酸庆大霉素 ACDE 29.能发生羟肟酸铁反应的抗生素类药物有

A．青霉素钾 B．硫酸链霉素 C．氨苄西林钠 D．头孢他啶 E．阿莫西林钠 ABCE 30.能用于链霉素鉴别的有

A．N一甲基葡萄糖胺反应 B．麦芽酚反应 C．坂口反应 D．硫色素反应 E．茚三酮反应

AD 31.在弱酸性(pH 2.0-6.0)溶液中可发生差向异构化的药物有