用一滴瓶装入蒸馏水,并把上次配制好的溶液分别装入滴瓶(先用标签编号)。然后吸取5~~8滴14号溶液,张开口滴到根部,使受试者品位,若感觉没有苦味,再用13号和12号,渐次测定至没有苦味为止。重复一次,若结果相同就记录下来其尝味结果值(感到苦味的溶液等级号)。测试时注意一定要从低浓度到高浓度,或者只用11号、7号两个P、T、G溶液和一瓶蒸馏水交替使用的方法来进行此项实验。
四、实验结果的分析
根据自己的P、T、G尝味能力,定出本身的基因型,并的推出父母的基因型和表现型。也可测出其父亲和母亲的直系亲属的尝味能力。进一步扩大家系系谱分析,即可绘制P、T、G尝味能力性状的家系图。
实验七 双因子杂交实验
一、目的:验证孟德尔自由组合定律。
二、材料与工具:野生型果蝇与双隐性果蝇(黑檀体和小翅);用具同实验二 方法与步骤:
1、确定杂交组合,正交或反交均可。 2、选取处女蝇(同实验二)
3、杂交:每个培养瓶放入1~~~2对处女蝇和与之交配的雄蝇。 4、观察F1表型,取下F1数对放入新的培养基,使其自交。 5、统计F2的各种类型数目。 四、作业
1、根据以上杂交实验,绘出遗传图式。
2、用X测验F2的分离比例是否符合9:3:3:1的规律。
实验编号 开始日期
野生型(+ / +)×黑檀体(e)小翅( nuy)) 统 计 日 期 F2 E果蝇数目与表型 2 12
X 测验
实际观察数(O) 理论数(3:1) (E) 偏 差 (O-E) (O-E) E 2(O?E)X??
E2常翅黄体 常翅黑体 小翅黄体 黑体小翅 合计 P?
实验八 性别的细胞学判定——性染色质检查
一、目的:掌握以性染色质判定性别的方法 二、材料:人口腔粘膜 三、器材、试药:
载玻片、盖玻片、显微镜、药、1%地衣红、染色液的制备、合成台红素(地衣红)1克加45毫升冰醋酸,在80~90℃煮沸溶液,冷却过滤,将此液用量70%乳酸稀释过后过滤。
四、标本制作方法
1、用药刮取口腔粘膜后放在载玻片上。
2、滴下0.5~1毫升1%地衣红,放置10~15分。
3、轻轻盖上盖玻片。此时注意防止进入浸泡将它夹放在滤纸间。从滤纸上面用手指垂直方向盖上。
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五、结果分析
只有雄性口腔粘膜上皮细胞中可见到该周围染上深红的一个性染色质颗粒(sex-dnromalln)而雄性则无颗粒。
具有核边缘深染色的染色质块(圆形)的细胞叫阳性。人是(女)30~80%。母猪是1.8~22%,公猪是1.4~20%。这是自然状态下的出现率。
性别的细胞学判定方法
牛
马 + +
猪 + +
山羊 +
绵羊 +
狗 + +
猫 + +
性染色质 锺
(+)为雌性 (―)为雄性
胞质 细胞核
染色质 图 性染色质模式图
六、作业
简述检查性染色质标本的制作方法,并画出镜检结果。
实验九 LDH同功酶醋酸纤维薄膜电泳
一、原理
LDH(乳酸脱氢酶)是一种参与糠酵解的酶,催化乳酸生成丙酮酸,完成葡萄糖的无氧分解过程。
O CH2-CHOH-COOH + NAD + LDH CH2-C-COOH + NADH + H L(+)— 乳酸 氧化型辅酶Ⅰ α还原型辅酶Ⅰ
LDH是由分子量为35,000多的α亚基和β亚基组成四聚体。α和β亚基的不同组成构
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成五种LDH同工酶(见表):
表 LDH同工酶的基因型和表现型
同工酶 LDH1 LDH2 LDH3 LDH4 LDH5 基因型 B4 A1B3 A2B2 A3B1 A4 亚基 ββββ αβββ ααββ αααβ αααα
由于同工酶分子结构的差异,分子大小、形状就不同。在一定pH缓冲液中所携带的电荷也不同。因此,在电泳时导致各同工酶酶组分的不同迁移率,使各同工酶组分得以分离。从正极到负极显示出LDH1、LDH2、 LDH3 、LDH4 、LDH5五条区带(见图)。
成年小鼠组织LDH同工酶电泳图(酶谱)
(+)
电 泳 迁 移 方 向
LDH1 LDH2 LDH3 LDH4 LDH5 心 骨骼肌 脑 子宫
LDH 的五种同工酶的生理功能是不同的,表现出种属特异性,组织几发育的特异性,成为基因活性表达的很好的生化标志。
各同工酶电泳区带有特性染色法显示。在酶促反应中,利用底物、产物及其生物和它们与染料结合后颜色变化以检测各区带酶的活力。这种把同工酶凝胶电泳和活性特异性染色巧妙结合和同工酶鉴定的方法,称为“酶谱法”。醋酸纤维素薄膜系用纤维素的醋酸酶溶于有机溶剂涂抹制成。现有商品市售,适用于多种蛋白质电泳。具有操作简便,分离快速,透明后便于定量和照相记录等优点。
二、目的
本实验以小白鼠的组织为材料,用醋酸纤维薄膜电泳分离组织中的乳酸脱氢酶(LDH)
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