《生物化学实验》

教学方案

湖南文理学院生命科学学院学院

生化与分子生物学教研组

实验一 蛋白质的性质实验（1）—蛋白质和氨基酸的呈色反应

授课题目：蛋白质的性质实验（1）——蛋白质和氨基酸的呈色反应（3学时） 授课对象：生科、农学、动科专业 授课教师： 教学目标及基本要求： 1、了解蛋白质的基本结构单位及主要连接方式。 2、了解某些蛋白质和氨基酸的呈色反应原理。 3、学习几种常见的鉴定蛋白质和氨基酸的方法。 教学内容提要及时间分配： 1、实验原理讲解： 12分钟 ?双缩脲反应的原理 ?茚三酮反应的原理 ?黄色反应的原理 ?坂口反应的原理 ?考马斯亮蓝反应的原理 2、实验试剂与器材 2分钟 3、实验步骤讲解： 10分钟 4、总结。 2分钟 教学重点及难点： 1、 双缩脲反应的原理。 2、蛋白质、氨基酸与水合茚三酮的显色反应。 教学方法： 采用启发式教学，结合理论，对实验步骤进行分析并给于适当示范。 教学手段（挂图、幻灯、多媒体…等）： 采用板书等手段进行教学。 使用的教材及参考资料： 1、生物化学实验指导，自编讲义。 2、基础生物化学实验，高等教育出版社，王秀奇 主编，第二版，2003年。 思考题： 1、如果蛋白质水解后双缩脲反应呈阴性时，可以对水解反应程度作出什么样的推论？ 2、茚三酮反应的阳性结果为何颜色？能否用茚三酮反应可靠鉴定蛋白质的存在？ 3、考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量的原理是什么？ 4、如何正确使用分光光度计？ 5、测定蛋白质含量还有哪些方法，测定原理有哪些不同？ 本单元教学总结（教学的主要经验、效果、存在的问题、改进措施等） 1、 结合理论内容讲述实验内容，效果较好。 2、 强调实验基本操作规范，让学生养成良好的实验习惯，具有扎实的实验技能。 实验二 蛋白质的性质实验（2）—蛋白质等电点的测定和沉淀反应

授课题目：蛋白质的性质实验（2）——蛋白质等电点的测定和沉淀反应（3学时） 授课对象：生科、农学、动科专业 授课教师： 教学目标及基本要求： 1、了解蛋白质的两性解离性质。 2、学习测定蛋白质等电点的一种方法。 3、加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识。 4、了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义。 5、了解蛋白质变性与沉淀的关系。 教学内容提要及时间分配： 1、实验原理讲解： 10分钟 ? 蛋白质的两性解离性质 ? 蛋白质等电点的概念 ? 测蛋白质溶解度最低时的溶液pH值为其等电点 ?稳定蛋白质亲水胶体颗粒的因素 ?蛋白质沉淀反应的类型 2、实验操作讲解： 10分钟 ? 蛋白质的盐析 ? 重金属离子沉淀蛋白质 ? 某些有机酸沉淀蛋白质 ? 有机溶剂沉淀蛋白质 ? 乙醇引起的变性与沉淀 3、总结。 2分钟 教学重点及难点： 1、 稳定蛋白质亲水胶体颗粒的因素。 2、蛋白质变性与沉淀的关系。 教学方法： 采用启发式教学，结合理论，对实验步骤进行分析并给于适当示范。 教学手段（挂图、幻灯、多媒体…等）： 板书，PPT。 使用的教材及参考资料： 1、生物化学实验指导，自编讲义 2、基础生物化学实验，高等教育出版社，王秀奇 主编，第二版，2003年 思考题： 1、稳定蛋白质亲水胶体颗粒的因素有哪些？ 2、蛋白质变性与沉淀的关系。 3、解释蛋白质两性反应中颜色及沉淀变化的原因。 4、该方法测定蛋白质等电点的原理是什么？ 本单元教学总结（教学的主要经验、效果、存在的问题、改进措施等） 1、 结合理论内容讲述实验内容，效果较好。 2、 强调实验基本操作规范，培养学生对实验现象的观察和实验结果的思考。