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10种藤黄科植物遗传多样性的ISSR分析

作者：刘子金 杨小波 林泽钦 来源：《江苏农业科学》2016年第07期

摘要：运用内部简单重复序列（inter-simple sequence pepeat，ISSR）分子标记对采自海南省的10种藤黄科植物进行遗传多样性分析，结果显示：（1）从100条ISSR引物中筛选出8条能扩增出清晰条带且多态性明显的引物；8条引物扩增出331条条带，其中多态性位点有106个，多态性比例为100%，平均每条引物扩增位点数为13.25个。（2）材料间的遗传相似系数范围为0.407 8～0.699 0，平均为0.562 2。以0.620 0作为最低遗传相似系数，将10种藤黄科植物划分为5大类：①铁力木；②菲岛福木、单花山竹子、山竹子；③多花山竹子、越南黄牛木、黄牛木；④岭南山竹子；⑤红厚壳、薄叶红厚壳。研究结果首次从分子水平揭示了藤黄科植物的遗传多样性，为合理地引种、驯化、保护、利用藤黄科植物野生资源提供了重要的参考依据和数据支持。

关键词：藤黄科；ISSR；遗传多样性；聚类分析；相似系数

中图分类号： S567.1+90.32 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2016）07-0055-04 藤黄科（Guttiferae）属双子叶植物纲五桠果亚纲，是一个热带科。我国有8属87种藤黄科植物，分别隶属于3亚科，几乎遍布全国各地[1]，海南省主要有黄牛木属、红厚壳属、铁力木属、藤黄属等。近年来，随着人们对藤黄科植物研究的不断深入，从中出离出大量黄酮类化合物[2]、呫吨酮类化合物[3-4]、萜类化合物[5]等。药理研究表明：藤黄科植物药用活性成分具有抗肿瘤[6]、抗艾滋病[7]、抗菌[8]等多种生物活性，极具研究和开发价值。因此，对藤黄科植物进行深入研究具有重要意义。

内部简单重复序列（inter-simple sequence pepeat，ISSR）是由Zietkiewicz等在1994年提出的一种新型分子标记技术[9]，用于检测简单重复序列（SSR）间的DNA序列差异，具有比随机扩增多态DNA（RAPD）更高的可重复性、稳定性[10]。同时，该试验操作简单、快速、高效，不需要繁锁的构建文库、设计引物、杂交、同位素显示等步骤，而且ISSR标记可以揭示整个基因组的一些特征，并呈孟德尔式遗传。目前，ISSR技术己在品种鉴定[11]、遗传作图[12-13]、遗传多样性[14-15]等研究中得到了广泛应用[16]。本研究利用ISSR技术对采自海南省的10种藤黄科植物进行亲缘关系、遗传多样性分析，以期为藤黄科植物种质资源的收集、鉴定、保护和利用提供理论基础。 1 材料与方法 1.1 试验材料