“物质结构组成与分析实

验”读书报告

（17现代高效液相色谱技术的应用和进展）

学院：化工与化学学院

姓名： 学号：

现代高效液相色谱技术的应用和进展

作为一种分离分析方法，高效液相色谱分析法具有准确、高效以及快捷的特点，广泛应用在食品安全、医药、环境、生命科学以及石油化工中，并且已经成为这些领域中进行检测工作的首选方法。

作为一种常规高效分离分析技术，高效液相色谱分析法在各种色谱模式中具有最广泛的应用，世界上现在有很多包括有生物活性的化合物、热不稳定化合物、离子型化合物以及高分子化合物在内的化合物都能够选择不同模式的高效液相色谱进行分离和分析，因此国际分析化学界目前发展最快的学科质疑就是高效液相色谱，并且其广泛的应用在了很多学科领域中。 1.高效液相色谱的发展历史

色谱法最早是由俄国植物学家茨维特（Tswett）在1906年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的，色谱法(Chromatography)因之得名。液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相，称为经典液相色谱法，此方法柱效低、时间长（常有几个小时）。高效液相色谱法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱法(High Pressure Liquid Chromatography，HPLC)。

高效液相色谱法是目前各种色谱模式中应用最广的一个领域，在化合物的分析方面，世界上约有80% 的化合物，如括高分子化合物、离子型化合物、热不稳定化合物以及有生物活性的化合物都可以用不同模式的HPLC(如正相 HPLC、反相 HPLC、离子交换色谱和离子色谱、体积排除色谱、亲合色谱等等)进行分离分析。

站在当今世界科技前沿的液相色谱用户现在又有了新的需求。首先是改进生产力的需求，因为大量的样品需要在很短的时间内完成；其次是在生化样品及天然产物样品的分析中，样品的复杂性对分离能力提出了更高的要求；第三是在与质谱等检测技术联用时，也提出了更高的要求。由此，UPLC（超高效液相色谱）概念得以提出，将HPLC的极限作为自己的起点。

2 高效液相色谱仪的应用原理和构造 2.1 高效液相色谱仪的原理

采用高压泵将储液器中的流动相打入到系统中，在经过样器之后会流入到流动相中，并且被流动相在固定相中载入。因为在两相中样品溶液中的各组分的分配系数是不同的，所以在两相进行相对运动的时候，在通过吸附- 解吸这样一种分配过程时，在移动速度方面各个组分就会出现较大的差别，并且变成单个的组分最终在柱内流出来。样品的浓度在经过检测器的时候就会以电信号的形式朝着记录仪传动，最后会以图谱形式将数据打印出来。 2.2 高效液相色谱仪的构造

高效液相色谱仪（HPLC）一般由高压输液系统、进样系统、分离系统、记检测系统、数据处理系统等几部分组成。制备型仪器还需配有馏份收集系统。为了取得较好的分析结果，HPLC 仪器对于准确度、精确度、灵敏度及结果重现性有较高的要求。 （1）高压输液系统

高压输液系统包括：溶剂储液瓶、溶剂脱气装置、高压输送泵以及梯度洗脱装置。其中，高压输液泵是高效液相色谱仪的主要部件之一，输送压力达150—350×105Pa。输液系统要为HPLC仪器提供流量恒定、准确、无脉冲的流动相，流量的精度和长期的重复性要好，同时还要提供精度好、准确度高、重现性好的多元溶剂梯度。因此，输液泵的好坏直接影响着整个系统的质量和分析结果的可靠性。 （2）进样系统

进样能在试样引入色谱柱，有六个接口：1,4之间接定量环；2接高压泵；3接色谱柱；5,6接废液管。