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06生物技术遗传学实验

实验一 果蝇遗传性状的观察

背景知识

果蝇是在世界各地常见的昆虫,属于昆虫纲,双翅目,果蝇科,果蝇属(Drosophila)。果蝇属有3000多种,我国发现800多种,遗传学研究中通常用的是黑腹果蝇(D.melanogaster)。作为遗传学研究的材料,果蝇具有非常突出的优点。它形体小,生长迅速,繁殖率高,饲养方便;世代周期短(约12天即可繁殖一带);突变性状多;染色体数目少,基因组小;实验处理十分方便,容易重复实验,便于观察和分析。果蝇的遗传学研究广泛而深入,尤其在基因分离、连锁、互换等方面十分突出,为遗传学的发展做出了突出的贡献。目前果蝇仍然是遗传学、细胞生物学、分子生物学、发育生物学等研究中常用的模式生物。

一、实验目的

1.掌握果蝇的基本特征及鉴别雌、雄果蝇的方法,熟悉常见突变型。 2.了解果蝇生活周期特征及各阶段的形态变化。

二、实验材料

野生型和几种常见的突变型黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)。 三、仪器设备

双筒立体解剖镜,培养瓶(粗平底试管或牛奶瓶)及麻醉瓶(与培养瓶一致的空瓶),白瓷板,毛笔。

四、药品试剂

乙醚,玉米粉,酵母粉,蔗糖,丙酸。

五、实验内容和步骤

(一)生活周期的观察

果蝇是完全变态昆虫,其完整的生活周期可分为4个明显的时期,即卵、幼虫、蛹和成虫(图1-1)用放大镜从培养瓶外即可观察到这4个时期,也可取出用立体解剖镜仔细观察。

果蝇的生活周期长短与温度关系很密切,低温使生活周期延长,生活力减 低,高于30℃使果蝇不育甚至死亡。果蝇培养的最适温度为20~25℃,25℃培养 条件下果蝇从受精卵到成虫约10天,其中卵和幼虫期5天,蛹4天。成虫果蝇在25℃时约成活15天。

卵:受精卵白色,椭圆型,腹面稍扁平,长约0.5mm,在前端背面伸出一触丝,他能使卵附着在事物上。

幼虫:受精卵经24h就可孵化成幼虫,幼虫经2次蜕皮到第3龄期体长可达4~5mm。肉眼观察可见幼虫一端稍尖为头部,上有一黑色沟状口器。

蛹:幼虫4天左右即开始化蛹。化蛹前3龄幼虫停止摄食,爬到相对干燥的表面(如培养瓶壁),渐次形成一个菱形的蛹,起初颜色淡黄、柔软,以后逐渐硬化变成深褐色,此时即将羽化。

成虫:刚从蛹壳中羽化出来的果蝇,虫体较肥大,翅还未展开,体表也未完全几丁质化,所以成半透明的乳白色。透过腹部体壁还可以观察到消化道和性

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腺。约1h后蝇体即变为粗短椭圆型,双翅伸展,体色加深,如野生型果蝇初为浅灰,后变为灰褐色。

成虫果蝇自羽化后8h即可交配。雄果蝇的精子可储存于雌果蝇的受精卵,以后逐渐释放到输卵管。雌蝇2天后即开始产卵。最初几天每天可产50~70个,随后逐渐减少。

图1-1 果蝇的生活周期

(二)果蝇的形态特征和常见的突变类型

1.果蝇雌雄性别的鉴别

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雌雄成蝇在一些形态结构上的区别很明显,可以通过放大镜和直接观察进行鉴别。只有雄性果蝇在腹尖下侧具有可识别的生殖器,但太微小,难以直接观察辨认。通常在分别雌雄果蝇时,综合各种形态特征进行观察确定(参见表1-1,图1-2)。

表1-1 雌雄果蝇的形态特征观察 雌果蝇 雄果蝇 大小 大 小 形态 腹部宽厚呈椭圆状,腹端稍尖 腹部相对窄小呈柱状,腹部呈钝圆形 颜色 腹部背面外观呈宽度相近的5条黑色腹背只能看到3条条文,条纹 上部2条窄一些,后一条宽且延伸至腹面,呈一明暗黑斑 性梳 无性梳 在第一对足的跗节基部有一黑色鬃毛结构,形式一小梳,即性梳

图1-2雄性和雌性成虫果蝇的形态特征

2.一些常见的突变性状 果蝇的突变性状很多,已知的达几百种,并且随着研究的深入会发现或诱变

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