高中生物实验总结

实验一 观察DNA和RNA在细胞中的分布

1.实验原理： 利用甲基绿和吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布；甲基绿和吡罗红对DNA和RNA的亲和力不同： 甲基绿+DNA→绿色

吡罗红+RNA→红色

2.分布：真核生物DNA主要分布在细胞核中；

线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA； RNA主要分布在细胞质中。

3.实验结果: 细胞核呈绿色,细胞质呈红色.

4.实验结论：DNA主要分布在细胞核中；RNA主要分布在细胞质中； 5.实验流程：

（1）取口腔上皮细胞制片：①载玻片上滴一滴质量分数为：0.9%NaCl溶液；

②漱口后，用消毒牙签刮口腔内壁后放在载玻片的液滴中涂抹几下； ③载玻片在酒精灯上烘干，盖上； （2）水解：①载玻片放入盛有30ml质量分数为8%的HCl的小烧杯中； ②大烧杯中加入30℃温水；

③将小烧杯放入大烧杯中保温5min；

（3）冲洗涂片：用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s; （4）染色：①吸水纸吸去载玻片的水分； ②滴两滴混合染液，染色5min； ③吸去多余的染液，盖上盖玻片； （5）观察：先低倍后高倍； 6、几种液体在实验中的作用：

（1）0.9%NaCl溶液：保持口腔上皮的正常形态。

8%的HCl：①改变细胞膜等的通透性； ②使染色质中的DNA与蛋白质分开。 蒸馏水：配置染液；冲洗载玻片。 （2）混合染液需要现配现用；

（3）该实验不宜用深色的材料，避免颜色对实验的干扰。

实验二、 物质鉴定

一、实验原理：还原糖 + 斐林试剂～砖红色沉淀（水浴加热）

脂 肪 + 苏丹III ～橘黄色 （滴液观察或制片显微镜观察）

脂 肪 + 苏丹IV～ 红色

蛋白质 + 双缩脲试剂 ～紫色反应 （不加热）

1、还原糖的检测

（1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如：苹果，梨，白萝卜。

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（2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用。

（3）步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2min左右→观察颜色变化（白色→浅蓝色→砖红色）

操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 1. 制备组织样液。 苹果或梨组织液必须临时制备。 因苹果多酚氧化酶含量高，（去皮、切块、研磨、过滤） 组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。 2. 取1支试管，向试管内注入2mL组织样液。 3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂，振荡。 应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂； 切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。 最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管口不朝向实验者。 也可用酒精灯对试管直接加热。 斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的Cu 0( OH ) 2在70~ 90C下分解成黑色CuO和水； 甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无Cu OH生成。 防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤； 缩短实验时间。 4. 试管放在盛有50-65C温水的大烧杯中，加热约2分钟，观察到溶液颜色：浅蓝色 → 棕色 → 砖红色（沉淀）

★模拟尿糖的检测

01、取样：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液

2、检测方法：斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸

3、结果：试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。

4、分析：因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应。 2、脂肪的检测

（1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。

（2）步骤： 制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央 ↓

染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精） ↓

制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片） ↓

镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒）

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操 作 方 法 花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。 在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，染色1分钟。 用吸水纸吸去薄片周围染液，用50%酒精洗去浮色，吸去酒精。 注 意 问 题 干种子要浸泡3~4小时，新花生的浸泡时间可缩短。 解 释 因为浸泡时间短，不易切片；浸泡时间过长，组织较软，切片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察。 染色时间不宜过长。 酒精用于洗去浮色，不洗去浮色，会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。 滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。 时间一长，油滴会溶解在乙醇中。 用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上1~2滴蒸馏水，盖上盖玻片。 低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处，可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。

3、蛋白质的检测

装片不宜久放。 （1）试剂：双缩脲试剂（A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液）

（2）步骤：试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B液4滴，摇匀→观察

操 作 方 法 制备组织样液。 （浸泡、去皮研磨、过滤。） 鉴定。加样液约2ml于试管中，加入双缩脲试剂A，摇匀；再加入双缩脲试剂B液3~4滴，摇匀，溶液变紫色。 A液和B液也要分开配制，储存。鉴定时先加A液后加B液。 CuSO4溶液不能多加。 注 意 问 题 解 释 黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节约实验时间。 先加NaOH溶液，为Cu与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入，2+会导致Cu变成Cu ( OH ) 2沉淀，而失效。 否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。 如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。 以免影响颜色观察 2+可用蛋清代替豆浆。 蛋清要先稀释。 附：淀粉的检测和观察 碘液不要滴太多 用试管取2ml待测组织样液，向试管内滴加2滴碘液，观察颜色变化。

4、考点提示：

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