A．过程①的反应体系中需要加入逆转录酶和核糖核苷酸 B．过程②需使用限制酶和DNA聚合酶，是基因工程的核心步骤 C．过程③需要使用NaCl溶液制备感受态的大肠杆菌细胞 D．过程④可利用PCR技术鉴定CarE基因是否成功导入受体细胞

25. 若用a表示骨髓瘤细胞，b表示B淋巴细胞，则单克隆抗体制备过程中的两次筛选可表示为

选项 A B C D 筛选前 a、aa、ab、bb、b a、aa、ab、bb、b a、aa、ab、bb、b a、aa、ab、bb、b 第一次筛选获得 a、aa、ab ab、bb、b ab ab 第二次筛选获得 ab ab 能无限增殖的ab 能产生特定抗体的ab 26. 下列关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，正确的是 A．都需要无菌操作 B．都需要使用胰蛋白酶 C．都需要使用激素 D．都需要含5%CO2的气体环境 27. 已知某种细菌以CO2为唯一碳源，下列相关叙述正确的是 A．可推测该细菌的代谢类型为自养需氧型 B．无机盐是该细菌不可缺少的营养物质 C．培养过程中碳源同时充当该细菌的能源物质 D．培养该细菌的培养基中无需添加氮源

28. 黑茶是以肉食为主的中国边疆游牧民族的主要饮品。在一系列微生物的作用下，黑茶会产生一种对人体非常有益的金黄色颗粒“金花”。研究人员对“金花”中的微生物进行了分离和鉴定，过程如图。下列说法不正确的是 ．．．

A. 向“金花”样品中加入蒸馏水制成样品悬液 B. 可根据菌落特征对菌种进行初步鉴定 C. 涂布平板上长出的菌落可通过划线进一步纯化 D. 可通过基因组测序对菌种进行准确鉴定

29. 下列实验中所使用的两种试剂，不能混合后再使用的是 ．．选项 A B C D 实验目的 蛋白质的鉴定 绿叶中色素的提取 解离植物根尖 植物组织培养 试剂1 CuSO4溶液 CaCO3 盐酸 生长素 试剂2 NaOH溶液 SiO2 酒精 细胞分裂素 30. 下列生物学经典实验中，“方法与结果”和“结论或观点”不匹配的是 ．．．

选项 方法与结果 取胡萝卜韧皮部的一些细胞，放入特定培养基中培养，形成细胞团块，继而分化出根茎叶，最终得到完整植株 在豚鼠的胰腺腺泡细胞中注射H标记的亮氨酸，3min后被标记的亮氨酸出现在附着有核糖体的内质网中；17min后出现在高尔基体中；117min后出现在靠近细胞膜内侧的运输蛋白质的囊泡中，以及释放到细胞外的分泌物中 用发绿色和红色荧光的染料分别标记小鼠和人细胞表面的蛋白质分子，两种细胞刚融合时，一半发绿色荧光，一半发红色荧光。37℃经过40min后，两种颜色的荧光均匀分布 将活的R型肺炎双球菌与加热杀死的S型肺炎双球菌混合后注入小鼠体内，小鼠体内出现活的S型肺炎双球菌

第二部分（非选择题 共50分）

本部分共6小题，共50分。

31.（8分）小球藻是一种单细胞藻类，具有光合效率高、营养方式多样且富含有机物等特点，在食品和饲料等多个

方面均有广泛应用。

（1）科学家曾以小球藻为材料进行了光合作用机理的研究。鲁宾与卡门在研究光合作用中氧气来源时，利用同

位素O分别对 中的氧元素进行标记，得到的结论是 ；卡尔文利用C标记的CO2供小球藻进行光合作用，目的是研究 。

（2）科研人员研究了不同处理条件对小球藻细胞数量及叶绿素含量的影响。

① 实验条件的设计如下表所示，请将表格内容补充完整。

营养方式 培养基中葡萄糖含量（g/L） 光照强度（Lux） ②实验结果如下列图表所示。

实验结果 营养方式 自养 混养 异养 单位质量小球藻中 总叶绿素含量（mg/g） 31.99 6.31 3.31 单位体积藻液中 总叶绿素含量（mg/L） 9.44 13.39 6.34 自养 a b 混养 10.0 2500 异养 10.0 0 18

14

14

3结论或观点 A 植物细胞具有全能性 B 说明了分泌蛋白的合成和运输途径 C 细胞膜上的蛋白质可以运动 D DNA是肺炎双球菌的遗传物质

由结果可知，单位质量小球藻中总叶绿素含量以 方式为最高，但由于该方式下 ，因此单位体积藻液中总叶绿素含量未达最高。据此分析，三种营养方式中 更具优势，这对高密度规模化培养等生产问题具有指导意义。

32.（10分）“微卫星DNA”是一类广泛分布于真核生物核DNA中的简单重复序列，以1～6个核苷酸为基本单位，

重复次数在不同个体和品种间有较大可变性，可作为一种标记对基因进行定位。

（1）由于两侧序列高度保守，可利用PCR技术对重复次数不同的微卫星DNA加以鉴定，如图1。请在方框中补

充C组PCR产物电泳结果的大致位置。

（2）研究人员以纯种紫心大白菜为父本、纯种非紫心大白菜为母本进行杂交，F1自交后共收获F2植株330株，

其中紫心245株，非紫心85株。实验结果表明 是显性性状，推测相关基因的传递符合 定律。

（3）为了对大白菜的紫心基因进行有效标记和定位，研究人员针对已知的微卫星标记A710两侧序列设计引物，

并对两亲本和部分F2个体的DNA进行PCR扩增，产物电泳结果如图2。由此初步推测：大白菜紫心、非紫心基因与标记A710位于同一对染色体上。图2紫心F2单株中，最可能是杂合子的有 （填数字编号）。若上述推测成立，请解释非紫心F2单株中10号和12号扩增后的电泳结果 。

（4）研究人员发现，位于标记

A710附近的Br基因内部存在CTC重复序列，且该序列在两亲本中重复次数不同，如图3所示。

对全部F2个体中的Br基因片段进行PCR扩增，如果 个体的扩增结果中有长度为78个碱基对的片段， 个体的扩增结果中有长度为87个碱基对的片段，则可证明大白菜紫心和非紫心基因与Br基因位于同一对染色体上且完全连锁，由此可知Br基因可对大白菜紫心基因进行更有效的标记和定位。 （5）根据“微卫星DNA”的特点判断，应用这种标记可进行的研究有 （填字母）。

A. 人类亲子鉴定 B. 物种或品种间亲缘关系鉴定 C. 诱导基因突变 D. 物种和基因多样性研究

33.（10分）人体血压、体温、激素分泌等都存在着节律性变化的“生物钟”，研究表明，抑郁症、肥胖、癌症等多

种疾病与生物钟的紊乱紧密相关。

（1）昼夜节律是典型的“生物钟”之一，研究发现PER蛋白的含量与此密切相关。如图1，PER基因通过 过

程表达出的PER蛋白在夜间与TIM蛋白结合为二聚体，经 进入细胞核后抑制该基因的表达；白天在光信号的影响下，上述二聚体生成量 ，PER基因的表达量 。

（2）为探究PER基因与肿瘤发

胞和胶质瘤细胞，定期检测PER基因的表达水平。

①由实验结果（图2）可知，PER基因在两种细胞中的表达均呈现明显的 变化。

②进一步研究X射线对两种细胞的影响，结果如图3。综合图2、图3可知，在PER基因表达的高位点时，正常纤维细胞对 X 射线的敏感性 其他时间组，胶质瘤细胞对 X 射线的敏感性 其他时间组。

③科研人员把PER基因与运载体连接后，分别导入正常纤维细胞和胶质瘤细胞中（实验组a、b），使其在细胞中过量表达。除设置空白对照组a1和b1外，此实验还应设置 的两种细胞作为对照组a2和b2。对各组细胞进行X射线照射，统计细胞凋亡率，实验结果如图4。据此可知，该基因的过量表达对正常纤

展的关系，科研人员体外培养大鼠的正常纤维细