些基因。
49.RNA分子经凝胶电泳后按大小不同分开,然后被转移到一张硝酸纤维素膜(尼龙膜) 上,同一放射DNA探针杂交的技术称__ Northern印迹_。 50.在__ Southern印迹_技术中,DNA限制性片段经凝胶电
泳分离后,被转移到硝酸纤维素膜(或尼龙膜)上,然后与放射性的DNA探针杂交。
51.可用T4 DNA聚合酶进行平末端的DNA标记,因为这
种酶具有__5’?3’合成酶_和_3’ ?5’外切核酸酶_的活性。
52.根据外源片段提供的遗传表型筛选重组体,必需考虑三种因素:(1)克隆的是完整的基因;(2)使用的是表达载体;(3)不含内含子。
53.Northern印迹和Southern印迹有两点根本的区别: (1)印迹的对象不同:Northern是RNA,Southern是DNA;
(2)电泳条件不同,前者是变性条件,后者是非变性条件。
54.放射免疫筛选的原理基于以下三点:(1)抗体能够被吸附
到固体支持物上;(2)同一个抗原可以同几种抗体结合; (3)抗体能够被标记 二、选择题(单选或多选)
1. 因研究重组DNA技术而获得诺贝尔奖的科学家是( )
(a)A.Kornberg (b)W.Gilbert (c)P.Berg (d)B.McClintock
2. 第一个作为重组DNA载体的质粒是( ) (a)pBR322 (b)ColEl (c)pSCl01 (d)pUCl8
3. 关于宿主控制的限制修饰现象的本质,下列描述中只有( )不太恰当。
(a)由作用于同一DNA序列的两种酶构成
(b)这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶 (c)这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰
(d)不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统 4.Ⅱ型限制性内切核酸酶: ( )
(a)有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列 (b)仅有内切核酸酶活性,甲基化酶活性由另外一种酶提供
(c)限制性识别非甲基化的核苷酸序列 (d)有外切核酸酶和甲基化酶活性
(e)仅有外切核酸酶活性,甲基化酶活性由另外一种酶提供
5.下面有关限制酶的叙述哪些是正确的?( ) (a)限制酶是外切酶而不是内切酶
(b)限制酶在特异序列(识别位点)对DNA进行切割
(c)同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的
(d)一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双链DNA,产生黏末端
(e)一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA,产生平末端
6.第一个被分离的Ⅱ类酶是: ( )
(a)EcoK (b)HindⅢ (c)HindⅡ (d)EcoB
7.在下列进行DNA部分酶切的条件中,控制那一项最好?( )
(a)反应时间 (b)酶量 (c)反应体积 (d)酶反应的温度
8.在下列试剂中,那一种可以螯合Ca2+离子?( ) (a)EDTA (b)柠檬酸钠 (c)SDS (d)EGTA
9.在下列工具酶中,那一种可以被EGTA抑制活性?( ) (a)S1单链核酸酶 (b)末端转移酶 (c)碱性磷酸酶 (d)Bal 31核酸酶
10.限制性内切核酸酶可以特异性地识别: ( )
(a)双链DNA的特定碱基对 (b)双链DNA的特定碱基序列
(c)特定的三联密码 (d)以上都正确
11.下列关于限制性内切核酸酶的表示方法中,正确一项的是( )。
(a)Sau3A I (b)E.coRI (c)hind III (d)Sau 3A1 12.限制性内切核酸酶的星号活性是指:( )
(a)在非常规条件下,识别和切割序列发生变化的活性。 (b)活性大大提高
(c)切割速度大大加快 (d)识别序列与原来的完全不同
13.下面哪一种不是产生星号活性的主要原因?( ) (a)甘油含量过高 (b)反应体系中含有有机溶剂
(c)含有非Mg2+的二价阳离子 (d)酶切反应时酶浓度过低
14.关于宿主控制的限制修饰现象的本质,下列描述中只有( )不太恰当
(a)由作用于同一DNA序列的两种酶构成
(b)这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶 (c)这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰
(d)不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统
15.在长模板链的指导下引物延伸合成长的DNA互补链时应选用( )
(a)T4DNA聚合酶 (b)Klenow酶.
(c)大肠杆菌DNA聚合酶I (d)T7DNA聚合酶 16.末端转移酶是合成酶类,( ) (a)作用时不需要模板
(b)在Ca2+的存在下,可以在突出的3,末端延长DNA链
(c)在Ca2+的存在下,可以在隐蔽的3,末端延长DNA链
(d)上述说法有两种是正确的
17.在基因工程中,可用碱性磷酸酶( )
(a)防止DNA的自身环化 (b)同多核苷酸激酶一起进行DNA的5,末端标记
(c)制备突出的3,末端 (d)上述说法都正确 18.下列酶中,除( )外都具有磷酸酶的活性
(a)λ核酸外切酶 (b)外切酶Ⅲ (c)单核苷酸激酶 (d)碱性磷酸酶
19. 下列哪一种酶作用时需要引物? ( )
(a)限制酶 (b)末端转移酶 (c)反转录酶 (d)DNA连接酶
20.S1核酸酶的功能是( )
(a)切割双链的DNA (b)切割单链的RNA (c)切割发夹环 (d)以上有两项是正确的
21.Klenow酶与DNA聚合酶相比,前者丧失了( )的活性。
(a)5,--3,合成酶, (b)3,--5,外切酶 (c)5,---3,外切酶 (d)转移酶
22. 下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid)性质的描述中,( )是不正确的
(a)质粒的复制只受本身的遗传结构的控制,而不受染色体复制机制的制约,
因而有较多的拷贝数
(b)可以在氯霉素作用下进行扩增 (c)通常带有抗药性标记
(d)同严紧型质粒融合后,杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子
23. 基因工程中所用的质粒载体大多是改造过的,真正的天然质粒载体很少,在下列载
体中只有( )被视为用作基因工程载体的天然质粒载体
(a)pBR322 (b)pSCl01 (c)pUBll0 (d)pUCl8
24. 下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大?( ) (a)质粒 (b)黏粒 (c)酵母人工染色体(YAC) (d) ?噬菌体 (e) cDNA表达载体 25. 松弛型质粒: ( )