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StepOnePlus型PCR仪 操作规程

1. StepOnePlus上机可由两种方式来进行：

由StepOne Software Quick Start进行上机或由StepOnePlus 机器面板直接触控上机。

2. 由StepOne Software Quick Start进行上机：

开启StepOne Software v2.0 进入主画面后点选 Quick Start 窗口进行快速上机设定。进入Experiment Properties后输入：Experiment Name及档案储存位置；选择Experiment Type选择使用荧光系统；选择Ramp Speed选择实验样品种类；点选Run Method确定PCR 反应条件是否需要修改后，按下START RUN。

如欲使用StepOnePlus机器上VeriFlex Block的功能，请由左方Setup功能列上点Plate Stepup窗口，在“Assign Targets and Samples”窗口下，勾选Enable VeriFlex Block选项，此时Block即被分成六个区块。

接着点选Run Method，在run program上点一下欲调整的温度步骤，选择“Set different temperatures for one or more zones”并设定每个区块的温度，请注意两相邻区块温度差异不可以超过5度，第一和第六区块最多可差异25度。

按下Start Run Now进行data 收集，反应结束后，则会回到 “Main Menu”画面，触控Collect Result将data 存出。

2. 由StepOnePlus 机器面板直接触控上机：

开启电源后，进入主画面，由触控式屏幕来进行StepOnePlus 的设定。 按下TaqMan cDNA（Standard）进入PCR Thermal Cycle Program，可利用下面工具列再重新编辑反应条件，如果条件相同则直接按下Save。

如欲使用StepOnePlus机型上VeriFlex Block的功能，请点选Options下的VeriFlex step并设定每个区块温度，请注意两相邻区块温度差异不可以超过5度以上，第一和第六区块最多可差异25度。

触控需要更改之处则会跳出触控式键盘，重新给予实验名称、选择档案储存的Folder、并更改实际反应样品体积，按下Save & Exit；然后在Browse Last

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Accessed Experiments 下选择刚设定好的实验，按下Start Run。此时跳出警告标示，提醒之前的档案是否存出，如果已经将前一个档案存出的话，则可直接触控Overwrite进行Data收集；如未储存的话则触控Collect将Data存出。 确定反应体积及实验名称无误后，触控Start Run Now，则会进入PCR Program实时显示画面。反应结束后，则会回到“Main Menu”画面，触控Collect Results将data 存出后，再回到StepOne Software 进行实验盘建立及分析。

清洁与维护保养：

1. 外壳要用柔软的布配合温和的清洁液清洗，不要用酒精或其他洗涤用品；加热孔可以用酒精棉球擦洗，但在清洗前应注意加热板的温度需降至室温。 2. 注意保持热盖和Block的清洁，特别注意不能将带有荧光染料的试剂溅洒在热盖或者Block里，否则需用蘸有70%酒精（纯酒精稀释在蒸馏水里）的干净棉球擦洗，直到不影响实验结果。

注意事项：

1. 为避免触电事故，仪器的输入电源线必须可靠接地。

2. 操作人员不得擅自打开仪器，元件的更换或机内调节须由持证的专业人员进行。

3. 在连接交流电源前，需保证电源电压与仪器要求电压一致220V（允许偏差±10%），并确保电源插座的额定负载不小于仪器要求。

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StepOne定量PCR仪简易设置指南

启动电脑，打开定量PCR仪电源开关：

双击桌面“StepOne Software”图标，出现Login登录界面，点击“OK”，打开软件。

起始界面如图所示，点击红色椭圆的三角图标，展开软件功能按钮。

点击左侧“Set Up”功能选项中的“Advanced Setup”高级设置向导。

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