文件编号： 尿素氮测定 1 检测原理 版本号： 页码：第 页 共 页 尿素酶能特异性地水解尿素为氨和二氧化碳。所生成的氨被谷氨酸脱氢酶（GLDH）利用以使酮戊二酸（α-KG）发生还原性氨化，同时使烟碱-腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化。由于NADH的消失而发生的在340nm波长上吸光率的变化与样本中的BUN浓度成正比。 尿素 + H2O 尿素酶 2NH3 + CO2 NH3 + α-KG + NADH GLDH L-谷氨酸盐 + NAD 2 标本采集与处理 2.1 采血方法 空腹采不抗凝静脉血2~3ml。 2.2 标本保存 室温保存，及时送检。尿素易于被细菌降解，血清和尿液样品在分析前放置在4~8℃。 2.3 注意事项 推荐选用血清。在测定过程中，各种器材和蒸馏水应无氨离子污染，否则结果偏高。标本不能使用氟化物和肝素铵抗凝剂，因氟化物有抑制脲酶的作用。标本应避免乳糜、脂血、溶血、黄疸。 3 试剂和设备 3.1 试剂 采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。 3.1.1试剂组成 试剂船1~3孔为α-KG4.69mmol/L，NADH0.34 mmol/L,尿素酶6.8U/mL，激活剂，稳定剂，片剂；4~6孔为GLDH2.0 U/mL，稳定剂，液体。 3.1.2 试剂准备 直接使用。 3.1.3 试剂保存 试剂2~8℃保存，有效期内稳定。 3.2 质控品 美国BIORAD液体多项质控品。 3.3 校准品 西门子校准品。 3.4 仪器 文件编号： 尿素氮测定 版本号： 页码：第 页 共 页 SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max全自动生化分析系统。 4 操作程序 4.1 检测过程流程 签收样品 → 离心 → 上机检测 → 审核报告 → 签发报告 → 标本保存。 4.2 样品签收 严格按照标本接收程序签收标本。 4.3 标本处理 以2500~3000r/min,离心6~10min，分离血清上机测定。如不能及时检测，分离血清于2-8℃保存。 4.4 标本检测 4.4.1 手工编排测试项目：样品按编号装入样品架，主屏幕按F1:ENTER DATA，在Position处输入样品所在样品架字母及所在位置号，按enter，在Patient Name处选择性输入病人名字，按enter，在Sample No处输入样品号，按enter，在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需要选择相应的按键改变Mode（按F7:MEXT MODE选择样品管类型）、Priority（按F4:NEXT PRIORITY选择样品的处理模式）、Fluid（按F8:NEXT FLUID选择标本类型）。 4.4.2 双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。 4.4.3 运行：输入完毕后按F3:LOAD LIST，确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行样品检测。 4.4.4 检验后标本保存 标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。 5 校准程序 5.1 校准品准备和储存 每瓶加2.0ml蒸馏水复融，轻轻旋转摇匀，室温放置30min,即可使用。 5.2 校准条件 在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准周期为3个月。 5.3 校准程序 主屏幕按F5:PROCESS CTRL→F1: CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP＆RUN,按项目键选择所需要校准的项目名称METHOD，选中相应试剂批号LOT，输入操作者姓名Operator、校准液货号Calibrator Product和批号Lot，以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position，最后把校准液各个水 平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4：ASSIGN CUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样品架上，按F7：LOAD/RUN→F4：RUN或“RUN”运行键运行校准程序。 6 质量控制程序 文件编号： 尿素氮测定 6.1质控品准备和储存 版本号： 页码：第 页 共 页 质控品为液体，可以直接使用。原包装质控品-10~-70℃可保存到瓶身有效期，未开启2~8℃可保存90d,开启后2~8℃可保存30d 。 6.2 质控水平和分析批长度 每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。 6.3 质控操作程序 与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NEXT PRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。 7 性能参数 本法线性范围为0 ~ 53.5mmol/L,对于超过测定线性范围的结果，用净化水对标本进行稀释，输入稀释因子后再重新检测。 8 生物参考区间 血清：2.5 ~ 6.4mmol/L 尿液：249 ~ 714 mmol/24小时。 9 临床意义 血清尿素氮增高:见于①肾前性氮质血症,由于肾血流量灌注减少或者尿素生成过多引起。后者见于高蛋白饮食、饥饿、发热、脓毒血症所致的蛋白质分解代谢增加以及胃肠道出血后血液蛋白吸收等。脱水、休克、心衰引起的肾供血不足，亦可使血液尿素氮升高。肾前性氮质血症，肌酐浓度往往不伴随升高。②肾性氮质血症，由于急性与慢性肾功能衰竭、肾小肾炎、肾盂肾炎和肾病等引起。肾结核、肾积水的血液尿素氮增高，与肾组织破坏程度相关。③肾后性氮质血症，经输尿管、膀胱、尿道的尿流受阻而引起的血液尿素氮升高。例如膀胱结石、泌尿生殖肿瘤、前列腺肥大、阻塞造成的肾小管内压烽升高，使管内尿素倒扩散入血液。 血液尿素氮浓度降低：较为少见，常表示严重的肝病，如肝炎合并广泛肝坏死。 10 参考文献 [1] 西门子医学诊断产品（上海）有限公司尿素氮（BUN）测定试剂说明书。 [2]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006：463~464。 编写： 审核： 批准：