广州大学学生动物学实验报告
开课学院及实验室:生科院生化楼603 2014年10月10日 学院 生命科学学院 年级、专业、班 生科121 姓名 廖怡诚 学号 成绩 指导老实验项目名称 实验六 神经体液因素对循环、呼吸的调节 师 [实验原理]
动物机体总是以整体的形式存在,不仅以整体的形式与外环境保持密切的联系,而且可通过神经-体液调节机制不断改变和协调各器官系统(如循环、呼吸系统)的活动,以适应内环境的变化,维持新陈代谢正常进行。 在正常生理情况下,心血管活动受神经、体液和自身机制的调节。心脏受交感神经和副交感神经的支配。心交感神经兴奋时,使心率加快、心肌收缩力加强,心内兴奋传导加快,心输出量增加、动脉血压升高。心迷走神经兴奋时,使心率减慢、心房肌收缩力减弱、房室传导减慢,从而使心输出量减少、动脉血压下降。在神经调节中以颈动脉窦-主动脉弓的减压反射尤为重要,当动脉血压升高时,压力感受器发放冲动增加,通过中枢反射性引起心率减慢、心肌收缩力减弱、心输出量下降、血管舒张和外周阻力降低,使血压降低。反之,当动脉压下降时,压力感受器发放冲动减少,神经调节过程又使血压回升。支配血管的交感缩血管神经兴奋时,使血管收缩、外周阻力增加、动脉血压升高。
家兔的压力感受器的传入神经在颈部从迷走神经分出,自成一支,称为减压神经,其传入冲动随血压变化而变化。心血管活动还受肾上腺素和去甲肾上腺素等体液因素的调节。它们对心血管的作用既有共性,又有特殊性。关键取决于心、血管壁上哪一种受体占优势。肾上腺素对α与β受体均有激活作用,去甲肾上腺素主要激活α受体而对β受体作用很小,因而使外周阻力增加,动脉血压升高,但对心脏的作用要比肾上腺素弱。
呼吸运动是呼吸中枢节律性活动的反映。呼吸中枢的活动受内、外环境各种刺激的影响,可直接作用于呼吸中枢或通过不同的感受器反射性地影响呼吸运动。其中较重要的有呼吸中枢、牵张反射和各种化学感受器的反射性调节。 [实验对象]
健康成年家兔1只 [实验药品]
25%氨基甲酸乙酯、4%柠檬酸钠、1∶5000去甲肾上腺素、1∶10000乙酰胆碱、3%乳酸、5% NaHCO3 、钠石灰、CaCO3、HCl。 [仪器与器械]
手术器械一套、兔手术台、动脉夹、注射器(1ml、5ml、50ml)、计算机生物信号采集处理系统计滴器、刺激电极、压力换能器、张力换能器、气管插管、橡皮管,动脉插管、铁支架、丝线。
[实验方法与步骤] 1.实验的准备
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(1)麻醉固定:家兔称重后,耳缘静脉缓慢注射25%氨基甲酸乙酯(4 ml·kg)进行麻醉。当动物四肢松软,呼吸变深变慢,角膜反射迟钝时,表明动物已被麻醉,即可停止注射。将麻醉的家兔仰卧位固定于兔手术台上。
(2)颈部手术:①行常规气管插管术;②行右侧颈总动脉插管术,并连接压力换能器,记录血压。
潘顺波 1214100058 实验课程名称 动物生理学实验
分离颈部气管、神经、血管:颈部剪毛,沿颈部正中线切开皮肤5-7 cm,用止血钳钝性分离皮下组织及浅层肌肉,暴露和分离气管;分离左、右两侧颈总动脉(左颈总动脉尽量分离长些,以做动脉插管用。);分离右侧的迷走神经、交感神经和减压神经。在分离的气管、颈总动脉及神经下方各穿一不同颜色的线备用。并在减压神经下放一钩状记录电极,实验过程中将电极悬空(但不要拉得过紧)。
插动脉插管:取适当长度的塑料管,插入端剪一斜面,另一端连接于装有抗凝溶液的血压换能器上,让导管内充满溶液。给动物静脉注射肝素(300 U/kg),分离出一段颈总动脉,在其下穿两根线备用。将动脉远心端的线结扎,用动脉夹夹住近心端,两端间的距离尽可能长。用眼科剪在靠远心端结扎线处的动脉上呈45o 度剪一小口,约为管径的1/3,向心脏方向插入动脉导管,用近心端的备用线,在插入口处将导管与血管结扎在一起,其松紧以开放动脉夹后不致出血为度。小心缓慢放开动脉夹,如有出血,即将线再扎紧些,但仍以导管能抽动为宜。操作完毕后将血管放回原处。
气管插管:暴露、游离出气管,并在气管下穿一较粗的线。用剪刀于喉头下2~3 cm处的两软骨环之间,横向切开气管前壁约1/3的气管直径,再于切口上缘向头侧剪开约0.5 cm长的纵向切口,整个切口呈”┴” 。若气管内有分泌物或血液要用小干棉球拭净。然后一手提起气管下面的缚线,一手将一适当口径的“Y”气管插管斜口朝下,由切口向肺插入气管腔内,再转动插管使其斜口面朝上,用线镈结于套管的分叉处,加以固定。 2.连接实验装置
分别将压力换能器、呼吸换能器和记滴器与计算机生物信号采集处理系统相连,选定各信号输入的通道,调整好波宽、增益、刺激强度、时间常数等实验参数,调整动脉血压波形、呼吸波形,以便获得良好的观察效果。 3.实验项目:
(1) 记录一段正常的动脉血压曲线、呼吸曲线
(2) 吸入CO2气体:用碳酸钙和盐酸制CO2,将管口对准气管插管,观察血压、呼吸的变化。
(3) 缺氧: 将气管插管的一侧管与装有钠石灰的密封袋相连,动物呼出的CO2可被钠石灰吸收,随着呼吸的进行,气囊里的O2逐渐减少,可造成缺氧。观察血压、呼吸的变化。
(4) 改变血液的酸碱度:①由耳缘静脉较快的注入3% 乳酸2 ml观察H+增多时对血压、呼吸的影响。②由耳缘静脉较快的注入5% NaHCO3 6 ml观察血压、呼吸的变化。
(5) 夹闭颈总动脉:待血压稳定后,用动脉夹夹住左侧颈总动脉,观察血压、呼吸的变化。出现明显变化后去除夹闭。
(6) 电刺激迷走神经和减压神经:将保护电极与刺激输出线(通道)连结,待血压恢复后,分别将右侧迷走神经、减压神经轻轻搭在保护电极上,选择刺激强度6V,刺激频率40~50 次·s-1,刺激15~20 s,观察血压、呼吸的变化。
(7) 静脉注射去甲肾上腺素(NE): 待血压恢复后,由耳缘静脉注射1∶5000去甲肾上腺素0.15 ml·kg-1,观察血压、呼吸的变化。
(8) 静脉注射乙酰胆碱(ACh): 待血压恢复后,由耳缘静脉注射1∶10000乙酰胆碱0.15 ml·kg-1,观察血压、呼吸的变化。
(9) 动脉放血:待血压恢复后,调节三通管使动脉插管与50ml注射器(内有肝素)相通,放血30 ml (分3次,每次放10ml,放血后立即用肝素生理盐水将插管内血液冲回兔体内,以防凝血),观察血压、呼吸的变化。 (10) 回输血液:于放血后5 min,经动脉插管将放出的血液分3次全部回输入兔体内,观察血压、呼吸的变化。
[实验结果]
实验因素
收缩压变化(%) 舒张压变化(%) 呼吸频率变化(%) 呼吸幅度变化(%)
吸入二氧化碳
缺氧
-5% -5% - +350%
-5% -5% +20% +100%
注射乳酸 -10%
-10%
-10% -10%
+20% -10%
+100% -20%
注射碳酸氢钠 夹闭颈总动脉
+30% +66% +10% 10%
刺激迷走神经 +5% -10% +30%
+5% -14% +30%
+10%
- +20%
-20% - +66%
刺激减压神经 注射去甲肾上腺素
注射乙酰胆碱
-110% -80% - 66%
图1 CO2对血压、呼吸的变化
分析:当增加CO2的气体后,呼吸幅度变化较大,呼吸运动加深加快。
图2 缺O2对血压、呼吸的变化
分析:血压变化不大,呼吸频率和呼吸强度均有增加。减少吸入氧气造成肺泡中氧分压降低,低氧对呼吸中枢的直接作用是抑制性作用,但轻、中度缺氧时,兴奋作用大于抑制作用使呼吸中枢兴奋,呼吸运动加强。重度缺氧时抑制作用为主,出现呼吸抑制。
图3 注入3% 乳酸观察H+增多时对血压、呼吸及尿量的影响
分析:处理后,收缩压和舒张压有所下降;呼吸频率和幅度增加比较明显。乳酸酸中毒(血液中H+增高)呼吸加深加快。 静脉注射乳酸后,改变了血液中的PH值,血液[H+]↑,H+是化学感受器的有效刺激物,它可以通过刺激外周化学感受器调节呼吸运动,也可以通过血脑屏障后刺激中枢化学感受器而起作用。