第一章 组织学绪论 [学习重点]

本章主要介绍组织学研究内容、发展简史、学习方法和主要研究技术。 重点学习光镜用石蜡切片，HE染色技术，电镜技术的基本原理，常用光镜和电镜组织学术语；组化、免疫组化和原位杂交技术的基本原理；了解组织培养、组织工程和图像分析等技术。 [主要内容]

一、组织学的定义、内容及其在医学中的地位

1、组织学（histology）：是研究正常人体微细结构及其相关功能的科学，即在光镜(Light Microscope, LM)和电镜(Electron Microscope, EM)下观察人体的微细结构，及其与功能的关系，重点是形态结构。 2、学习内容包括：

总论：上皮组织、结缔组织、肌肉组织、神经组织等基本组织的组织结构与

功能。

各论：各系统器官的组织结构及其与功能的关系。

3、组织学是重要的医学基础形态学科, 是学习病理学的基础，也是学习生理、生化等机能学科的形态学基础课程。 二、组织学常用的研究技术 （一）一般光镜技术

1、石蜡切片，苏木精, 伊红(Hematoxylin， Eosin，HE)染色制作基本原理： 取材：取出所需的组织，切成小块。

固定：用固定剂（甲醛等）使组织块中的蛋白质变性凝固，以保持其形态结构。

石蜡包埋：先用由低到高浓度的酒精脱去组织块中的水，再用溶解的石蜡渗透入组织块，冷凝后组织块变硬，便于切片。

切片：在切片机上切成5~10μm厚的组织切片，贴到载玻片上。

HE染色：用HE染色，增加组织、细胞各部分之间的色差，光镜下才能观察分辨。

封片：树胶封固组织切片，便于切片保存和光镜下观察。

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苏木精(H)：为碱性染料，将细胞核和核糖体等染成蓝色，故细胞核等具有嗜

碱性。

伊红(E)：为酸性染料,可将细胞质的其它成份染成红色,故细胞质具有嗜酸性。 2、恒冷箱切片：取材→快速冷冻→恒冷箱切片机切片→染色→封片。不须石蜡包埋，快捷。不经高温，对酶活性保存好，常用于酶组化和外科快速诊断。 3、涂片：刮取物或液体→涂片→固定→染色→封片

此外，用于光镜的还有火胶包埋切片、撕片(铺片)和磨片等切片方法。除HE染色法外，还有硝酸银染色法、醛复红染色法和活体染色法等。 （二）电镜技术

包括 透射电镜术：观察组织细胞的平面超微结构（Ultrastructure）。

扫描电镜术：观察组织细胞的表面立体结构。

普通光镜和透射电镜的主要不同

普通光镜 透射电镜

光 源 可见光束 电子束 透镜 玻璃透镜 电磁透镜 切 片 石蜡包埋切片 树脂包埋切片 厚 5~10μm 50~80nm（超薄切片） 染 色 有机染料 重金属：铀、铅等 成 像 彩色 黑白 有效分辨率 可达0.1μm 可达0.2nm 描述术语 显微结构 超微结构

嗜酸性，嗜碱性 高电子密度，低电子密度

3、组织化学与细胞化学：通过化学或物理反应原理,研究组织或细胞内某种化学成分的研究方法。

如：过碘酸希夫反应（periodic acid Schiff reaction, PAS反应）：显示多糖和某

些糖蛋白。

过碘酸 （无色）

多糖 多糖—醛基 + 希夫试剂 紫红色产物

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福尔根反应（Feulgen反应）：显示核酸。 稀盐酸 （无色）

DNA DNA—醛基 + 希夫试剂 紫红色产物

酶组化：显示存在于组织细胞内的酶，如过氧化酶等。

细胞内过氧化酶

联笨胺+H2O2 联笨胺兰（蓝色产物） +2 H2O

4、免疫细胞化学：应用抗原与抗体特异性结合的免疫学原理，用荧光、酶、胶体金等标记抗体，标记抗体与组织细胞内的抗原（多肽、蛋白质及膜表面抗原和受体等大分子物质）发生特异性结合，形成带有标记物的抗原抗体复合物。检测标记物，确定抗原的存在与分布。

5、原位杂交术(in situ hybridization)：即核酸分子杂交组织化学术。该技术应用已知碱基序列的带有标记物（放射性核素、酶、地高辛等)的RNA或DNA片段作为核酸探针（probe），按两条单链核苷酸碱基互补专一配对的特点，与组织切片或细胞内的待测核酸进行杂交。在光镜或电镜下原位观察标记物，指示目的mRNA或DNA的定性与定位分布，研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。

6、组织细胞体外培养与组织工程技术：取活组织或细胞在体外无菌的适宜条件（如适宜的营养、生长因子、pH值、渗透压、温度等）下培养生长。在倒置相差显微镜下观察细胞的生长、代谢、增殖、分化、形态和功能变化，以及各种理化因子(激素、药物、毒物、辐射等)对活细胞的直接影响等。组织工程是用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技术。

7、图象分析术(image analysis)又称形态计量术(morphometry)：是应用数学和统计学原理，在图象分析仪下分析组织切片上的平面图像，从而获得组织和细胞内的各种有形成分的数量、体积、表面积等参数，如肺泡的数量和表面积、肾小体的数量和表面积等，从量的角度显示了结构与功能的关系。 [测试题]

（一）单项选择题

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