值。

λa ,λb选择原则：干扰组分在两波长无有相同的吸收；被测组分在两波长处的吸光度差值最大。

14、为什么最好在最大波长处测化合物含量？

答：最大吸收波长表示物质对该波长光的吸收能力最大，所以用该波长做测定波长时，测定灵敏度高。

15、比色法中，对显色反应的要求及显色反应条件的选择。 答：显色反应要求：

A 被测物质与生成有色物质之间，必须有确定的定量关系； B 反应物必须有组后的稳定性，以保证测得吸光度有重现性； C 如果试剂本身有色，则产物颜色应与试剂颜色有差别； D 反应产物摩尔吸收系数足够大，才能有足够的灵敏度； E 显色反应须具有较好的选择性，才能减免干扰因素。

反应条件：显色试剂；酸碱度，许多有色物质颜色随容易热衷H+浓度改变而改变，；时间，产物颜色在防止过程中会发生变化；温度，一般在室温下进行； 16、紫外可见分光光度分析中，误差的来源有几个方面？如何避免？ 答：误差来源主要有 ，溶剂，吸光度测量误差，比色皿的配对与空白校正。 17、紫外分光光度计主要部件，各部件功能？

答：光源：发射强度足够稳定，有连续光谱，发光面积小。 常用氢灯，钨等灯。

单色器：将来自光源的连续光谱按波长顺序色散，并从中分离出一定能够宽度的谱带。

常用的有棱镜，光栅。

样品池：可见光区，用玻璃；紫外光区，可用石英，或者玻璃 检测器：讲解收到的辐射功率变成电流。 数据处理系统：

显示器：显示透光率 吸光度两种 第十章 荧光分析法

1、如何区别荧光、磷光、瑞利光、拉曼光

答：荧光：由第一激发态单线态的最低振动能级回到基态个振动能级发射的光； 磷光：由第一电子激发三线态的最低振动能级回到基态各振动能级发射的光； 瑞利光：物质分子与光子发生弹性碰撞，不发生能量交换，仅光子方向改变，其波长与入射光相同；

拉曼光：物质分子与光子发生非弹性碰撞，光子改变方向，同时与物质有能量交换，散射光波长有所改变。 2、荧光光谱的特征。 答：

3、简述简述荧光分析法比紫外-可见分光光度法灵敏度高的原因

答：荧光分析中与浓度有关的参数是银光物质发射的荧光强度，测量的方式是在入射光的直角方向，即在黑暗背景下检测所发射的强度信号，因此可采用增强入射光强度或增大检测新还得放大倍数来提高灵敏度；

在分管光度法中与浓度相关的参数是吸光度，如果正大入射光强度，相应也增大了透射光强度，同样不能提高其比值；如果增大检测器放大倍数，检测到的入射光强度和透射光强度同时增大，比值同样不增大，也就不能达到提高灵敏度的目的，所以，荧光分析法的灵敏度比紫外分管光度法高。

4、分子处于激发态后，去活化过程有哪些方式？分子荧光如何发生？ 答：①振动弛豫：激发态各能级的分子，通过与溶剂分子碰撞而将部分振动能量传递给溶剂分子，电子返回同一电子的最低振动能级。

②内转换：当两个电子激发态自己建的能量相差较小，以致其振动能级有重叠时，手机分子常有搞电子能记忆无辐射的方式转移至低电子能级的过程。

③外转换：让你工业中激发态分子与溶剂分子或其他溶质分子之间相互碰撞而失去能量，并以热能的形式释放能量的过程。

④体系间跨越：从第一电子激发单线态的最低振动能级无辐射跃迁转移至激发三线态的高振动能级。

⑤荧光发射：处于任意激发单线态的分子，通过内转换及振动弛豫，均可返回到第一激发单线态的最低振动能级，然后再以辐射形式发射光量子返回至基态的任一振动能级。此时发射的光量子为荧光。

5、荧光分析时为什么要用标准溶液校正仪器刻度？

答：因为荧光分光光度计灵敏度的影响因素很多，同一型号仪器，甚至同一台仪器在不通过实践操作，所得的结果也不尽相同。因而在每次测定时，在选定波长以及狭缝宽度的条件下，先用一种稳定的荧光物质配成浓度一定的对照品溶液对仪器进行校正。

6、何谓荧光量子效率？那些分子结构的物质具有较高的荧光效率？、 答：荧光量子效率是发射荧光的量子数与吸收激发光的量子数之比。

一般来说，具有长共轭结构具有较强的紫外吸收；刚性平面结构分子具有较高的荧光效率。

7、物质发生荧光的条件？

答：强的紫外可见吸收，一定的荧光效率。 8、影响荧光强度的因素？ 答：（1）外部因素

①温度：一般情况下，随着温度的升高，溶剂中荧光物质的荧光效率和荧光强度降低；

②溶剂：一般情况下，荧光波长随着溶剂极性的增强而长移，荧光强度也增强。 ③酸度：的那个荧光物质本身是弱酸或弱碱时，溶液的酸度对其荧光强度有较大的影响。因为在不用算杜仲吗分子和离子键的平衡改变，因此荧光强度也有差异。 ④熄灭剂：荧光物质分子与溶剂分子或其他溶质分子相互作用引起荧光强度降低的现象为银光熄灭，能引起荧光熄灭的物质叫荧光熄灭剂。

⑤散射光：对荧光测定有干扰，尤其是拉曼光，选择适当的激发波长可消除散射光。 ⑥时间： （2）内部因素：

①长共轭结构：共轭程度越大，荧光强度也越大；

②分子的刚性：在同样的长共轭分子中，分子刚性越强，荧光效率越大，荧光波长产生越长。本来不发生荧光或荧光较弱的物质与金属离子形成配位化合物后，如果刚性和共平面性增加，那么久可以发生荧光或者增强荧光。

③取代基：能增加Π电子共轭程度的取代基，常使荧光效率提高，荧光波长长移。减弱共轭程度的取代基，是荧光效率减弱甚至熄灭。

9、荧光与磷光发光机制有何不同，什么条件下可以观察到磷光？

答：荧光：由第一激发态单线态的最低振动能级回到基态个振动能级发射的光； 磷光：由第一电子激发三线态的最低振动能级回到基态各振动能级发射的光； 处于激发三线态的分子常常通过无辐射的过程失活回到基态，因此在室温下很少呈现磷光，只有通过冷冻或者固定化而减少外转换才能检测到磷光。 10、什么是激发光谱和发射光谱，发射光谱的特征有哪些？

答：激发光谱：指不同激发波长的辐射引起物质发射某一波长的相对效率。 发射光谱（荧光光谱）：表示在所发射的荧光中各种波长组分的相对强度. 荧光光谱的特征

a.Stokes位移：激发光谱与发射光谱之间的波长有差值。 λ发射光谱> λ激发光谱 (振动弛豫消耗了能量)

b.发射光谱的形状与激发波长无关：电子跃迁到不同激发态能级，均回到第一激发单重态的最低振动能级再跃迁回到基态，产生波长一定的荧光。

c. 镜像规则：通常荧光发射光谱与它的吸收光谱（与激发光谱形状一样）成镜像对称关系。

11、荧光分析法定量关系式？ 答：荧光强度与荧光物质浓度的的关系

F ?Kc

浓度高时， F与C不呈线形关系，有时C增大， F反而降低,有时发生荧光猝灭效应 12、

第十一章 红外吸收光谱法 1、影响IR峰位因素 答：（1）内部因素：

1）诱导效应（吸电效应）：使振动频率移向高波数区 2）共轭效应： 使振动频率移向低波数区

3）氢键效应：使伸缩频率降低。分子内氢键：对峰位的影响大不受浓度影响；分子间氢键：受浓度影响较大，浓度稀释，吸收峰位发生变化 4）杂化的影响：杂化轨道中s轨道成分↑，键能↑，键长↓，υ↑

5）分子互变结构 6）振动偶合：

7）费米共振：振动的倍频与另一振动的基频接近是相互作用而产生的强的吸收峰或裂分。

2．外部因素：受溶剂的极性和仪器色散元件性能影响 溶剂极性↑，极性基团的伸缩振动频率↓ 色散元件性能优劣影响相邻峰的分辨率 2、红外的原理。

3、红外中指纹区和特征区特点以及作用？

答：（1）特征区（特征频谱区）：4000~1250cm-1的高频区。 包含H的各种单键、双键和三键的伸缩振动及面内弯曲振动 特点：吸收峰稀疏、较强，易辨认。特征峰常出现在特征区 （2）指纹区： 1250~400cm-1的低频区

包含C—X（X：O，H，N）单键的伸缩振动及各种面内弯曲振动 特点：吸收峰密集、难辨认→指纹。相关峰常出现在指纹区 4、基频峰，泛频峰

答：基频峰：分子吸收一定频率红外线，振动能级从基态跃迁至第一振动激发态产生的吸收峰；（即V=0 → 1产生的峰）

倍频峰：分子的振动能级从基态跃迁至第二振动激发态、第三振动激发态等高能态时所产生的吸收峰；（即V=1→V=2，3- - -产生的峰） 5、吸收峰减少的原因，吸收峰增多的原因

答：减少的原因：①振动形式是非红外性振动，在谱图上不出峰。 ②不同振动因频率相同而简并；

③振动频率超出仪器检测范围而无法分辨。

增多的原因：倍频，组合频产生的吸收峰；振动偶合或费米共振。 6、红外光谱产生条件

答：①红外辐射能量必须与分子的振动能级差相等。 ②欧几句必须发生变化。只有红外性振动才能产生吸收峰。 7、吸收峰强度影响因素