5.1.1.2选择参照产品

最难清洗的产品就是水中溶解度最小的产品，从上表可知其中琥乙红霉素、罗红霉素、阿奇霉素均为几乎不溶，但结合以下几个风险因素分析:1)前一品种最小日剂量(残留物的毒性影响);2)最大共享面积(残留污染风险), 从表1、表2体现阿奇霉素MTD最小,和其他品种设备共享面积最大，所以参照产品定为阿奇霉素分散片中的阿奇霉素，在设备生产该产品结束后，进行清洗验证。 5.1.2 需监测设备设施

设备名称 分筛机 设备编号 相关清洁设备名称 SOP文件号 料勺/料桶 压片机 设备编号 相关清洁SOP文件号 二维混合机 槽形混合机 颗粒机 热循环烘箱 粉碎整粒机 泡罩包装机 5.2验证方法 5.2.1物理外观检查

参照产品(阿奇霉素)生产后，按规定的清洁程序清洗设备，目测设备表面应洁净，无肉眼可见残留痕迹。 5.2.2化学检测

5.2.2.1清洁接受标准的确定

任何产品不能受到前一产品带来超过其1/1000的最低日剂量的污染。对于本验证，参照药品A已确定为阿奇霉素，从以下几个风险因素分析:1)后续品种最大日剂量(安全性风险);2)后续品种的最小批量(残留污染风险); 从表1中可知LDSD/批量其比值大的为琥乙红霉素，因此将琥乙红霉素作为下一批产品B。 许可残留量的计算：

1）计算A的每日最低有效剂量同时带入B的每日最高给药剂量时,折算为每公斤B中含有A有百分之毫克数,即称为DA/B,min的10-6数。 MTDA,min 1 250mg 1

DA/B,min= ---------------× ----- = ---------× ----- = 3205

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LDSDB,max 10-6 78000mg 10-6

2)将DA/B,min乘以安全系数1/1000，即得允许A产品活性成分带入B产品的最大浓度L（10-6）

L=DA/B,min×0.001=3250×0.001=3.25

3) 计算单位面积上允许残留的A 药品活性成分的限度R：

R=（L*B产品的最小批量）/A和B产品共同使用设备的接触表面积总和S =(3.25×302)/31.67 m2 =0.0031mg/cm2

注：因B产品为颗粒剂，故和A产品共用面积为：26.49 m2为降低残留污染风险，此方案中将设备表面积总和定为A产品接触的设备表面积总和，即：31.67 m2

4)根据取样面积计算出被测样品中允许的最高限度

按取样点为4个，每个点的面积为25 cm2，计算，测定结果的最高限度为：0.0031×4×25=0.31mg/100 cm2

5.2.2.2取样方法及药品残留物分析方法的建立

5.2.2.2.1检测方法：参考阿奇霉素分散片质量标准溶出度项下检测方法，本品在482nm波长处有紫外吸收，所以参照阿奇霉素分散片溶出度检测方法进行检测。

方法：精密吸取供试提取溶液上清液各5.0ml，分别置具塞试管中，精密加入硫酸溶液（75→100）5ml，混匀，放置30分钟，冷却至室温，照紫外-可见分光光度法（中国药典2005年版附录Ⅳ A），在482nm波长处分别测定吸光度。

5.2.2.2.2检验方法验证： 1)线性关系和线性范围

精密称取阿奇霉素原料适量，(批号: 含量: ),加乙醇(每2mg,加乙醇1ml)溶解,并用水稀释成1.0 mg/ml的溶液,精密吸取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、10.0 ml分别置100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，浓度分别为0.010mg/ml、0.020 mg/ml、0.030 mg/ml、0.040 mg/ml、0.050 mg/ml、0.100 mg/ml，精密吸取上述浓度溶液各5.0ml，分别置具塞试管中，精密加入硫酸溶液（75→100）5ml，混匀，放置30分钟，冷却至室温，照紫外-可见分光光度法（中国药

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典2005年版附录Ⅳ A），在482nm波长处分别测定吸光度，其吸光度和浓度应成线性关系（0.9＜r＜1）且其线性范围应达到被测样品检测限度的50%-150%。

2）精密度（重现性）

取上述浓度为0.050mg/ml的溶液连续测量5次,计算RSD值，RSD应≤1％。

5.2.2.2.3取样方法：

用棉签擦拭法取样，将4支棉签分别放入盛有10ml乙醇-水（1：1）溶液的离心管中湿润，并将其靠在管口上挤压以挤去多余的溶剂，每支棉签分别擦拭取样25 c㎡，共擦拭取样100 c㎡（应避免和微生物检测取样点重复）。擦拭时，将棉签头按在取样部位表面上，平稳而缓慢地擦拭取样表面，在向前移动的同时将其从一边移到另一边，擦拭过程应覆盖整个确定的取样表面，翻转棉签，让棉签的另一面也进行擦拭但和前次擦拭移动方向垂直，将棉签头剪下放回乙醇-水（1：1）溶液中，样品应贴上标签，注明样品名称、批号、样品编号、取样人及取样日期。

取样示意图：

5.2.2.2.4取样方法验证： 1)空白试验

对于取样用的棉签、溶剂、设备材质，进行空白试验。取不锈钢板一块（约20×20㎝2），和设备材质相同，划线，使成若干个5×5㎝2方块，按设备清洁标准操作规程对试验材料进行清洁，取四个方块，将4支棉签分别放入盛有10ml乙醇-水（1：1）溶液的离心管中湿润，分别擦拭方块，擦拭过程应覆盖整个确定的取样表面，将棉签头剪下放回乙醇-水（1：1）溶液中超声2分钟溶解，离心，取上清液5ml检测，在482nm波长处测定吸光度，其吸光度应≤0.01，确定试验材料对测定有无干扰，共取样3次。

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2)取样回收率

表面擦拭引起的被检测物的损失主要是由棉签和设备表面的潴留引起的，我们提出被检测的回收率限度≥50%，当回收率小于这个值时，方法应当修改。最终检测结果将根据回收率的平均值进行调整，即检测结果被平均回收率除，以补偿棉签和设备表面的潴留引起的损失。

在空白试验中的不锈钢板上选择12块面积为5×5㎝

2

方块 ，取浓度为

0.050mg/ml、0.080 mg/ml、0.100 mg/ml的阿奇霉素对照溶液1ml各4份,每1ml溶液均匀涂布于一块方块上,在环境温度下干燥过夜；各级浓度分别将4支棉签放入盛有10ml乙醇-水（1：1）溶液的离心管中湿润，按取样方法取样，擦拭完后，将棉签头剪下放回乙醇-水（1：1）溶液中超声2分钟使活性成分溶解，离心，取上清液5ml检测，在482nm波长处测定吸光度，计算各级浓度的回收率应≥50%，表面回收率的RSD应RSD≤20%。

5.2.3微生物测定—细菌 5.2.3.1取样方法及检验方法：

生产阿奇霉素分散片后，按各设备清洁标准操作规程对设备进行清洁后（应在化学残留检测取样前取样），用无菌棉签4支，分别用0.9%灭菌氯化钠溶液湿润后，并将其靠在瓶口上挤压以挤去多余的溶剂，每支棉签分别擦拭取样25 c㎡，共擦拭取样100 c㎡。擦拭时，将棉签头按在取样部位表面上，平稳而缓慢地擦拭取样表面，在向前移动的同时将其从一边移到另一边，擦拭过程应覆盖整个确定的取样表面，翻转棉签，让棉签的另一面也进行擦拭但和前次擦拭移动方向垂直，将棉签头剪下放入0.9%灭菌氯化钠溶液中（20ml/瓶），超声2min，样品应贴上标签，注明样品名称、批号、样品编号、取样人及取样日期。取水样1ml，照微生物限度检查法检查，于30~35℃培养48小时，观察菌落数。

每个棉签菌落数=（平均菌落数×总体积）/4。 5.2.3.2 接受标准：

微生物限度标准(CFU/签)：菌落数≤50CFU/棉签[产品标准规定量（个/g）×B批量]/设备内表面积×取样面积/签×安全系数 由上式可得：

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