DNA引物测定活性，则发现在加入无DNA聚合酶的细胞粗抽提物以后，纯化好的DNA聚合酶能像使用线形模板一样，很好地使用环状模板。对此你又如何解释？如何验证你的解释？

（3）你本以为在测活系统中加入大肠杆菌的SSB可能会刺激DNA的合成，但结果不然。然而，如果你加的是T4噬菌体的SSB，则能刺激DNA的合成。另外，在有ATP的情况下加入RecA，结果也能刺激DNA的合成，但如果使用不能水解的ATP类似物代替ATP，则对DNA的合成无刺激。对此，试提出合理的解释。

4、（1）DNA复制起始区一般具有哪些特征？

（2）细菌染色体只有一个复制起始区，而真核细胞染色体具有多个复制起始区，为什么？ （3）使用何种方法可以得到一个染色体DNA上的复制起始区序列？

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习题三 DNA转录、逆转录及其转录后加工

一、名词解释（每题3分，共15分） 1、Pribnow box 2、cis-acting element 3、enhancer 4、core promoter 5、mRNA editing

二、填空题（每空1分，共15分）

1、一个基因的有意义链是指_________，它的序列与mRNA______。

2、大肠杆菌的RNA聚合酶由_________和__因子组成，参与转录起始的是______，而参与延伸的是_________。

3、真核细胞核mRNA前体后加工最重要的三种方式是______、______和______。 4、snRNA即是____________，它的主要功能是参与_____________________________；snoRNA即是_______________，它的主要功能是参与____________________后加工。 5、使用______________方法可以确定原核细胞的启动子序列，使用________________方法可以确定真核细胞基因转录的起始点。 三、判断题（每题1分，共10分）

1、原核生物与真核生物的RNA聚合酶在结构上具有高度的同源性，构成原核生物RNA聚合酶的每一个亚基在真核细胞内都有同源的亚基。（ ）

2、内含子在剪接反应中被切除，所以一种蛋白质的基因如果在内含子内发生突变，一般不会影响到这种蛋白质的功能。（ ）

3、与蛋白质酶不同的是，核酶的活性不受温度的影响。（ ）

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4、RNA病毒因为无DNA基因组，所以其生活史省去了从DNA到RNA的过程。（ ） 5、真核细胞mRNA的加帽反应需要GTP。（ ） 6、mRNA的剪接总是产生套索结构。（ ）

7、AAUAAA是真核细胞mRNA的主要加尾信号，该序列在加尾反应完成以后被切除。（ ） 8、多数真核生物mRNA的降解开始于“脱帽”，随后是“去尾”。 （ ） 9、mRNA前体上与5’端最近的内含子最有可能先被剪接掉。（ ）

10、既然内含子大都是遗传“垃圾”，所以在RNA剪接的时候不必进行精确的切除。（ ） 四、单项选择题（每题2分，共20分）

1、tRNA基因的转录不需要的转录因子是（ ）

A、TFⅢA B、TFⅢB C、TFⅢC D、TFⅢD

2、在正常的生长条件下，某一细菌基因的启动子的普里布诺框由TCGACT突变成TATACT，由此而引起该基因转录水平发生变化，以下几项描述中正确的是（ ） A、该基因的转录增加 B、该基因的转录降低 C、该基因不能转录 D、该基因的转录没有变化

3、如果你想设计一种新的抗菌药物，其作用对象是原核细胞的RNA聚合酶，那么，你所设计的药物作用的最佳靶点应该是（ ）

A、α亚基 B、β亚基 C、ω亚基 D、σ因子 4、以下不会出现在一个cDNA克隆中的序列是（ ）

A、加尾信号 B、多腺苷酸尾巴 C、5’-非翻译序列 D、TATA框 5、DNA复制过程中合成RNA引物与细胞内其他RNA的差别在于（ ） A、T代替U B、由DNA聚合酶催化 C、只能以DNA-RNA杂交双链形式存在 D、合成的方向是3’→5’

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6、真核细胞的TATA框（ ）

A、与-35区一道起作用 B、存在于所有编码蛋白质基因的启动子上 C、将RNA聚合酶定位到启动子上 D、存在于-10区

7、原核细胞内受RNA聚合酶全酶浓度的提高而加速的转录步骤是（ ） A、封闭的转录起始复合物的形成 B、启动子清空 C、转录延伸 D、转录终止

8、某些发生在RNA聚合酶β亚基上的突变能够阻止依赖于ρ因子的转录终止，你认为下列最有可能在体外恢复依赖于ρ因子的转录终止的条件是（ ）

A、降低转录体系中的ATP浓度 B、降低转录体系中的GTP、CTP和UTP的浓度 C、使用强启动子启动转录 D、在转录系统中加入核糖体 9、RNA聚合酶和DNA聚合酶所具有的共同性质是（ ） A、都需要模板和引物 B、都具有自我校对的活性 C、都需要Mg2+ D、都能够导致DNA发生解链 10、以下属于转录后基因表达调控的机制是（ ）

A、DNA分子上的C发生甲基化修饰 B、转录因子与启动子结合 C、RNA分子上的C脱氨基转变成U D、基因扩增 五、问答题（每题10分，共40分）

1、（1）如果将由RNA聚合酶Ⅱ催化转录的一个蛋白质的基因让RNA聚合酶Ⅰ或RNA聚合酶Ⅲ来转录，那么，这种蛋白质的mRNA前体还能经历哪些后加工反应？为什么？ （2）细菌体内的转录和翻译在时空上是偶联的，但真核生物并没有这样的偶联关系。然而，真核细胞内却有其他的过程与转录偶联，你认为它们是哪些过程？产生这种偶联机制的直接原因是什么？

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2、假定枯草杆菌基因组一共具有7300个基因，其中5125个基因在营养型细胞内表达，而在芽孢形成中只有3532个基因表达（假设枯草杆菌的全基因组序列和所有基因的编码序列均已经被确定）。

（1）使用何种技术可以快速确定这5125个在营养型细胞表达的基因和3532个在芽孢形成中表达的基因？

（2）将营养型细胞内表达的基因数和在芽孢形成中表达的基因数相加并非是7300，为什么？

（3）一种枯草杆菌突变体已失去了产生芽孢的能力，只能以营养型细胞生长，你认为哪些基因的突变能产生这种表型？

3、下图显示的是一种细菌的几个相邻的基因结构图谱。基因的名称用带有数字的ORF表示，每一个ORF似乎是一个基因，但还没有得到专门的鉴定。某些ORF后来被证明参与Arg的合成，因此这些基因也用arg来表示，图中弯曲的箭头为转录起始点。图中单纯的数字是基因之间的核苷酸数目。

（1）已有证据表明一种调节蛋白的结合位点与argF的启动子序列重叠。部分证据来自DNA酶Ⅰ足迹实验，受这种调节蛋白保护的区域有29 nt，从-10区的中间延伸到-35区的上游。试画出导致上升结论的足迹实验的结果，需要同时给出对照实验。

（2）从（1）给出的信息来看，你认为调节蛋白最有可能是激活蛋白还是阻遏蛋白?为什么?

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