(3)下图显示的是靠近ORF5起点区域的一段RNA序列,这种结构有什么意义?它来自哪一个转录物?
(4)在细菌的培养基中加入Arg,能够提高ORF4的转录。这意味着ORF4编码的蛋白质的功能是什么?ORF4有可能参与合成Arg吗?为什么?
4、(1)有人得到一种哺乳动物的细胞系:它的一个基因的启动子被细菌的强启动子序列(-35区和-10区一致序列)取代,因此,可以被细菌的RNA聚合酶有效识别。然而,当他将带有原核生物转录所有必需成分的质粒(独立的实验证明,这些质粒能够高表达出有功能的蛋白质)导入到上述细胞系的时候,发现这个受原核生物启动子驱动的基因表达的效率很低,最后只产生很少的mRNA。对此现象试提出两种可能的机制给予解释。
(2)在真核细胞内,RNA聚合酶Ⅱ发生磷酸化修饰是基因表达十分重要和关键的一步。试回答:①催化磷酸化的激酶是什么?②磷酸化的具体对象是什么?③磷酸化的主要功能是什么?
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习题四 翻译及其后加工
一、名词解释(每题3分,共15分) 1、Shine-Dalgarno sequence 2、wobble rule 3、signal hypothesis 4、N-end rule
5、translational frameshift
二、填空题(每空1分,共15分)
1、翻译的时候肽链延伸的方向总是____________,而阅读mRNA模板的方向总是__________。
2、核糖体上与tRNA结合的部位有A、P和E,其中与空载tRNA结合的是__,与起始tRNA结合的部位是__。
3、翻译的起始密码子通常是______,有时也可以是______。然而,它们都编码______。终止密码子则有_______、______和______。
4、原核生物和真核生物在翻译的时候第一个被参入的氨基酸分别是__________________和____________。
5、原核生物在蛋白质生物合成的时候,参与起始阶段的起始因子有3种,其中与起始tRNA结合的是______;参与延伸阶段的延伸因子有3种,其中与氨酰-tRNA结合的是__________;终止释放因子有3种,其中能够水解GTP的是______。 三、判断题(每题1分,共10分)
1、通过封闭多肽离开通道起作用的抗生素一定结合在核糖体的小亚基上。( ) 2、抑制转肽酶活性的抗生素通常与核糖体的大亚基结合。( )
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3、根据摆动法则,tRNA上的反密码子在第三个位置的核苷酸处于摇摆的位置。( ) 4、如果将细胞质中的mRNA导入到线粒体基质内翻译,通常得不到有功能的蛋白质产物。( )
5、参与糖酵解和糖异生途径的酶都没有信号肽。( )
6、甲硫氨酸的密码子只有一个(AUG),但起始密码子可以是AUG,也可以是GUG或UUG。由于GUG和UUG编码的是其他氨基酸,故如果以它们作为起始密码子的话,第一个参入的氨基酸将不再是Met。( )
7、密码子第一位碱基发生的突变要比第三位发生的突变的危害要大得多。( ) 8、催化大肠杆菌其实甲硫氨酰-tRNA合成的氨酰-tRNA合成酶识别的氨基酸是甲酰甲硫氨酸。( )
9、核糖体大亚基的主要功能是催化肽键的形成,而小亚基主要是结合mRNA和tRNA。( )
10、与tRNA相连的氨基酸本身在决定何种氨基酸参入到正在延伸的肽链上不起任何作用。( )
四、单项选择题(每题2分,共20分)
1、不是通过模拟tRNA的结构与核糖体结合的蛋白质是( ) A、IF2 B、EF-G C、RF2 D、eRF2
2、一种新发现的抗生素能够抑制细菌的蛋白质合成。如果将这种抗生素加到以AUGUUUUUUUAG为模板的体外翻译系统之中,则只形成一种二肽产物fMet-Phe。根据以上信息,你认为该抗生素抑制( )
A、翻译的起始 B、氨酰-tRNA进入A部位 C、核糖体移位 D、翻译的终止
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3、在中度胁迫条件下,细胞内的蛋白质发生变性或去折叠。有助于细胞度过胁迫条件而提高表达或开始表达的基因是( )
A、编码糖酵解途径的酶 B、编码分子伴侣 C、编码RNA聚合酶Ⅱ D、编码核糖体亚基
4、大肠杆菌16S rRNA的3’端序列是5’-CACCUCCUUAOH-3’,那么mRNA分子上的SD序列是( )
A、UCCUU B、UCCUCC C、GGAAU D、AGGAGG 5、嘌呤霉素通过分子模拟抑制翻译,被它模拟的分子是( )
A、肽酰-tRNA B、氨酰-tRNA C、肽酰转移酶 D、终止释放因子 6、假定一个编码蛋白质(由200个氨基酸组成)的基因由2个外显子和1个内含子组成。以下几种突变中最有可能阻止这种蛋白质不能合成的是( )
A、第2个外显子内发生一个插入突变 B、基因的内含子区域缺失5个核苷酸 C、内含子内发生一个碱基置换 D、第2个外显子内发生一个无义突变 7、以下有关翻译进位的叙述正确的是( ) A、EF-Tu在结合氨酰-tRNA的时候水解GTP
B、在EF-Tu释放以后,氨酰-tRNA必须旋转,肽键才能形成 C、aa-tRNA-EF-Tu在与EF-Ts结合的时候水解GTP D、EF-Tu能够与EF-G同时与核糖体结合
8、在核糖体上,mRNA的结合部位和转肽酶的活性中心分别位于( ) A、两个亚基之间;大亚基 B、两个亚基之间;小亚基 C、大亚基;小亚基 D、小亚基;大亚基
9、在一个真核细胞内,由一种特定的mRNA翻译出来的蛋白质的量部分取决于( )
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A、DNA甲基化的程度 B、mRNA降解的速率
C、某些转录因子的存在 D、mRNA含有的内含子的数目
10、一种转基因突变细菌有望用于人体疫苗,为了获得FDA的批准,突变的性质需要预先知道,而最重要的是回复突变成野生型的可能性更需要明确。你认为获得FDA批准可能性最低的突变是( )
A、点突变 B、插入突变 C、缺失突变 D、染色体重排 五、问答题(每题10分,共40分)
1、(1)原核生物与真核生物在识别起始密码子的机制上有何不同?这种差别与原核生物的mRNA多数是多顺反子及真核生物的mRNA绝大多数是单顺反子有无某种关系?为什么? (2)在大肠杆菌细胞里表达来自嗜热菌的基因现在已经是十分普遍的实验技术。然而,有时表达的效果不错,有时表达得则不理想。Ishida和Oshima在研究中发现,在大肠杆菌细胞里表达量极低的基因在紧靠RBS附近含有回文序列。如果将此序列去除,这些基因的表达量将大大提高。为什么这种回文序列在嗜热菌体内对基因表达不构成问题,但在大肠杆菌却能降低基因翻译的效率?
(3)遗传密码的哪些性质有利于基因从一种生物向另外一种生物的转移(通过基因工程或自然转移)?哪些性质不利于基因从一种生物向另外一种生物的转移?
2、如果你分离到一个病毒的400 nt的DNA片段,它能编码至少两种不同的蛋白质,一个长度是120个氨基酸残基,另一个的长度为80个氨基酸残基。 (1)你认为这种现象普遍吗? (2)试提出两个模型解释以上现象。
(3)如果你测定这两种蛋白质的氨基酸序列,发现它们无序列同源性,那么,你能排除哪
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