蛋白质的生物合成 下载本文

后来的肽酰基)的羰基进行亲核攻击,使其活化,转移到A位的氨酰-tRNA的氨基上形成肽键。

3、移位(translocation) (1)需要GTP 和 延伸因子 EF—G(移位酶)

EF-G对GTP有很强的亲和力,它催化的移位过程需要GTP水解提供能量。

(2)移位过程

在EF-G的作用下,核糖体沿mRNA5’ →3’方向 移动,每次移动一个密码子,结果使肽酰-tRNA 从A位移到P位。 (三)翻译的终止

1、终止信号:终止密码子

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UAA、UAG、UGA

2、释放因子(release factor,RF)

RF1 -- 识别 UAA 和 UAG RF2 -- 识别 UAA 和 UGA RF3 -- 负责激活RF1和 RF2 3、多肽链合成终止

? 当终止密码子进入核糖体的A位点时,RF 识别终止密码子并与之结合。

? RF 的某种作用改变肽酰基转移酶的肽基转移特性,同时催化P位点上的tRNA与肽链之间的酯键水解,使肽基与水分子结合。

? RF3是一种依赖于核糖体的GTPase, 结合GTP,帮助其他两种RF结合于核糖体上。

二、真核生物的蛋白质合成 (一)真核蛋白质合成的起始 1、起始于甲硫氨酸

2、起始密码子的识别——扫描模型(scanning model) ? 合适的AUG需要有正确的上下游序列:

5’ C C A C C AUG G 3’

-3 +1

+4

3、真核起始因子(eukaryotic initiation factor,eIF )

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(1)与核糖体亚基结合的因子:eIF3、eIF4C等

(2)与mRNA结合以识别5’帽子结构并解开二级结构的因子:eIF4B、eIF4F(eIF4E、eIF4A )

(3)与起始tRNA运输相关的因子:eIF2、eIF2B等

(4)其他的可替换因子:eIF5能替换eIF2和eIF3,促使60S亚基结合。

4、真核起始步骤

(一)40S起始复合物的合成:

1)mRNA5’端先与eIF4A和eIF4B结合,去除二级结构;

2)eIF3结合到40S亚基上,促使40S起始复合物与mRNA结合,并在mRNA上移动寻找AUG起始密码子;

3)eIF5替换eIF2和eIF3后,60S亚基与40S亚基结合,并水解GTP。 4)释放eIF2·GDP复合物和eIF3。

(二)真核蛋白质合成的延伸(与原核相似)

﹡ eEF—1 取代 EF—Tu 和 EF—Ts ﹡ eEF—2 取代 EF—G (三)真核蛋白质合成的终止

﹡ 只有一种释放因子eRF,可以识别三类终止密码子 原核与真核mRNA翻译过程比较 地点 点

细菌 真核 转录和翻译同一地转录在细胞核 翻译在细胞质 13

核糖体 mRNA 起始密码 30S、50S 40S、60S 多顺反子,无帽无尾单顺反子,5’帽子、3’polyAAUG AUG,GUG(极少)Met 扫描 起始tRNA载体fMet 起始密码子识SD序列 别 起始因子 延伸因子 释放因子 IF-1,2,3 EF-Tu,Ts, G RF-1,2,3 10多个eIF EF-1,EF-2 1种eRF 三、蛋白质合成的抑制剂

? 原核生物蛋白质合成抑制剂主要是一些抗生素

如:嘌呤霉素、氯霉素、四环素、链霉素、新霉素、卡那霉素等; ? 真核生物蛋白质合成抑制剂主要亚胺环己酮,另外白喉毒素(diphtheria toxin)也是一种毒性很强的蛋白质合成抑制剂。

第四章 蛋白质合成后的加工和运输 一、蛋白质合成后的加工 (一)蛋白质前体的共价修饰 1、N端fMet或Met的切除

原核细胞的蛋白质约有一半都不保留fMet中的甲酰基。原核细胞的大多数蛋白质中的Met也被切除

真核细胞蛋白质中的Met则全部被切除 2、二硫键的形成

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由两个半胱氨酸残基的侧链脱氢氧化形成 3、特定氨基酸侧链的修饰 (1)磷酸化 (2)甲基化

(3)乙酰化 (4)腺苷酸化

(5)糖基化(glycosylation)

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