微生物的培养与应用

一、单选题

1．下列有关发酵过程的做法中，符合生产实际的是（ ） A．通过人工诱变、杂交、基因工程和细胞工程育成菌种 B．生产过程中排出的废弃物可直接排入附近农田作肥料 C．分离单细胞蛋白时，通常采用萃取、离子交换等方法 D．在连续培养过程中补充的同种培养液和空气须先灭菌 【答案】D 【解析】

2．下列实验材料、试剂等，不必放入冰箱的是

A. 层析光合色素后的滤纸 B. 长期保存得到的菌种 C. 用于粗提取DNA的酒精 D. 保存PCR所需的Taq酶 【答案】A

【解析】A. 层析光合色素后的滤纸不必放入冰箱，A符合题意；B. 长期保存得到的菌种需要放在低温条件下保持，B不符合题意；C. 用于粗提取DNA的酒精是冷却的，C不符合题意；D. 保存PCR所需的Taq酶，酶的保存需要低温条件，D不符合题意。故选A。 3．下列关于微生物培养和利用的叙述，不正确的是 ．．．A．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作流程是计算、称量、溶化、灭菌和倒平板 B．接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步分开获得单个菌落 C．含酚红的培养基可鉴别尿素分解菌

D．菌种的临时保藏是将菌种接种于固体斜面培养基中，然后再放入-20℃的冰箱中保存 【答案】D 【解析】

试题分析：将菌种接种在适宜的斜面培养基上，待菌种生长完全后，置于4℃左右的冰箱中保藏，每隔一定时间（保藏期）再转接至新的斜面培养基上，生长后继续保藏，如此连续不断。此法广泛适用于细菌、放线菌、酵母菌和霉菌等大多数微生物菌种的短期保藏及不宜用冷冻干燥保藏的菌种。所以D选项是错误的。

考点：本题考查微生物培养和利用，意在考查学生能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。

4．若要通过稀释涂布平板法分离纯化土壤中的微生物，其正确的操作步骤是（ ） ①土壤取样；

﹣2

②称取1g土壤加入盛有99mL无菌水的锥形瓶中，制备10土壤稀释液； ③吸取0.1mL土壤稀释液进行平板涂布；

﹣3﹣4﹣5﹣6﹣7

④依次将土壤稀释液稀释至浓度为10、10、10、10、10的溶液． A. ①②③④ B. ①③②④ C. ①②④③ D. ①④②③ 【答案】C

【解析】稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是：①土壤取样；②称取1g土壤加入盛有99mL无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液；④进行梯度稀释，即依次

﹣3﹣4﹣5﹣6﹣7

稀释至10、10、10、10、10稀释度，③吸取0.1mL土壤稀释液进行平板涂布，故选C。

5．科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解石油成分“多环芳烃菲”的菌株，步骤是：采集菌种→选择培养→纯种分离→性能测定。下列相关的叙述中，错误的是 ．．A.筛选目的菌的培养液中必须以多环芳烃菲作为唯一碳源 B.选择培养需多次进行的目的是为了分离和纯化目的菌 C.利用平板划线法纯化目的菌，接种环最少灼烧1次

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D.接种后需将平板倒置且需一个未接种的培养基作对照 【答案】C 【解析】

试题分析：要想分离能降解石油成分“多环芳烃菲”的菌株，配制培养液时，必须用多环芳烃菲作为唯一碳源，故A正确；选择培养的目的是为了分离和纯化细菌，故B正确；用平板划线法纯化目的菌时，每次划线前都要灼烧，故C错误；接种后需要将平板倒置过来培养，需要设置空白对照，故D正确。

考点：本题考查微生物的实验室培养的有关知识，意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。

6．下列有关微生物培养的叙述中，不正确的是（ ） A. 获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染 B. 单菌落的分离是消除污染杂菌的通用方法 C. 培养基都必须使用高压蒸汽灭菌法灭菌 D. 倒置平板防止培养皿盖上的冷凝水滴落 【答案】C

【解析】试题分析：微生物培养的关键是防止杂菌污染；培养基制作完成后需要进行灭菌处理，培养基通常可以进行高压蒸汽灭菌；倒平板后需要将培养皿倒置． 解：A、微生物培养中获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染，A正确；

B、通常可以采用稀释涂布平板法或平板划线法进行单菌落的分离，以消除污染的杂菌，B正确；

C、培养基通常可以进行高压蒸汽灭菌，但对于培养基中有高温易分解的成分，就不能用此方法，如培养基中的碳酸氢钠等物质，C错误；

D、倒平板后需要将培养皿倒置，以防止培养基蒸发冷凝成的水滴入培养基而污染，D正确． 故选：C．

考点：微生物的分离和培养．

7．下列有关刚果红染色法的叙述，不正确的是 A. 刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入 B. 刚果红可以在菌落形成后加入

C. 刚果红在菌落形成前倒平板时加入，加入的刚果红不需要灭菌 D. 在菌落形成后加入刚果红时，刚果红不需要灭菌 【答案】C

【解析】刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入，也可以在菌落形成后加入，A、B项正确；若在细菌菌落形成前倒平板时加入刚果红，则所加刚果红要进行灭菌，以防杂菌的侵入，影响纤维素分解菌菌落的形成，C项错误；若在菌落形成后加入刚果红，则不需要灭菌，D项正确。

【考点定位】刚果红染色的原理和方法

8．微生物的实验室培养有较高的技术要求，下列操作不符合规范的是 A. 溶化琼脂时，需要用玻璃棒不断搅拌以防止糊底

B. 新配置的培养基可以用高压蒸汽灭菌或干热灭菌的方法灭菌 C. 倒平板操作时，待平板凝固后，需要将其倒过来放置 D. 用平板划线法分离大肠杆菌时，需要多次灼烧接种环 【答案】B

【解析】试题分析：琼脂熔化时，容易糊底，所以熔化琼脂时，需要用玻璃棒不断搅拌以防止糊底，A正确；培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，不是干热灭菌，B错误；倒平板操作时，待平板凝固后，需要将其倒过来放置，防止水珠落到培养基上，C正确；用平板划线法分离大肠杆菌时，第一次划线前和每次划线后，都要对接种环进行灼烧灭菌，D正确。

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考点：本题主要考查微生物的分离的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间内在联系的能力。 9．生产用菌种的来源主要是

①自然环境 ②收集菌株筛选 ③购置生产用菌种 ④培养基 Ａ．①②④ Ｂ．①③④ C．②③④ Ｄ．①②③ 【答案】D 【解析】略

10．以下有关生物技术实践的叙述中，不正确的是

A. 除活菌计数法外,显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法

B. 在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌，符合生物与环境相适应的生物学观点 C. 在酿酒生产上，常向发酵罐中加少量尿素，其目的是作为氮源，用于酵母菌合成蛋白质和核酸

D. 不能用稀释涂布平板法来测定土壤溶液中某活菌数目 【答案】D

【解析】本题考查培养基对微生物的筛选与微生物的分离计数，要求考生明确利用选择培养基可对微生物进行筛选，利用平板划线法或稀释涂布平板法可进行微生物分离，利用稀释涂布平板法可测定土壤溶液中某活菌数目。

除活菌计数法外，显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法，A正确；在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌，符合生物与环境相适应的生物学观点，B正确；在酿酒生产上，常向发酵罐中加少量尿素，其目的是作为氮源，用于酵母菌合成蛋白质和核酸，C正确；可用稀释涂布平板法来测定土壤溶液中某活菌数目，D错误。

11．在生物工程中，科学家已经可以利用多种类型的生物反应器来生产人类需要的生物产品。下列生物反应器的应用中，必须破坏相应细胞才能获得生物产品的是 A．利用单克隆抗体制备技术制作精确诊断SARS病毒的试剂盒 B．利用筛选出来的优质酵母酿造葡萄酒

C．利用植物组织培养技术培育人参细胞快速获得大量人参皂苷 D．利用微生物的发酵作用将沼气池中的有机废物转化为沼气 【答案】C 【解析】

试题分析：单克隆抗体是由杂交瘤细胞分泌的蛋白质，生产不需要破坏细胞，A错误。酵母菌无氧呼吸产生的酒精也可以排出细胞外，B错误。人参皂甙位于人参细胞内，获得该物质需要破坏细胞，C正确。微生物发酵产生的沼气能直接排到细胞外，D错误。 考点：本题考查细胞工程、微生物工程的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。 12．下列叙述错误的是 （ ）

A. 培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素 B. 培养霉菌时需将培养基的pH调至碱性

C. 培养细菌时需将培养基的pH调至中性或微碱性 D. 培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件 【答案】B

【解析】维生素是乳酸菌生长繁殖所必须的，在体内又不能合成，因此要在培养乳酸菌的培养基中添加维生素，A正确；霉菌生长所需要的PH是酸性，培养霉菌时应将PH调至酸性，在碱性情况下不易繁殖，甚至会导致霉菌死亡，培养霉菌时应将PH调至酸性，B错误； C、细菌生长繁殖所需要的PH是中性或微碱性，所以培养细菌时需将PH调至中性或微碱性，C正确；厌氧微生物在有氧时无氧呼吸受抑制，因此培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件，D正确。 【考点定位】微生物代谢的条件

13．可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是

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