设计题

1、贝诺酯中氯化物的检查，规定氯化物的限度为0.01％，请据此设计本药物中氯化物的检查方法（包括取样量、所用标准溶液与试液、检查方法）。

解：（1）标准氯化钠溶液的配制：称取氯化钠0.165g，置1000ml量甁中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液。临用前，精密量取储备液10ml，置100ml量甁中，加水稀释至刻度，摇匀，即得每1ml相当于10μg的Cl的标准溶液。检查时氯化物浓度以50ml中含50-80μg的Cl为宜，此范围内氯化物所显浑浊度明显，便于比较，相当于标准氯化钠溶液5-8ml。（2）由于贝诺酯不溶于水，检查前需过滤，用滤纸过滤时，滤纸中可能含有氯化物，可预先用含硝酸的水溶液洗净后使用。因需过滤，需考虑稀释倍数，比如，加水100ml后，滤过，取滤液25ml；如果加入5.0ml标准氯化钠溶液，根据L=(C×V)/S，计算出取样量S=(C×V)/L=（10×10^（-6）×5×100/25）/0.0001=2.0g。（3）具体检查方法如下：取本品2.0g，置100m量甁中，加水适量，加热煮沸后，放冷，加水至刻度，摇匀，滤过，取滤液25ml，加稀硝酸10ml，置50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml，摇匀，得供试液。另取标准氯化钠溶液5.0ml，同法处理，得对照液。于供试液和对照液中分别加入硝酸银试液1.0ml，用水稀释使成50ml，摇匀，在暗处放置5分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较，不得更浓。

2、葡萄糖酸亚铁中重金属的检查，规定其含重金属不得过百万分之二十。请设计 其重金属检查方法。

答：取50ml纳氏比色管两支，甲管中加水适量，加稀醋酸2ml 与抗坏血酸1g，滴加稀焦糖溶液调节溶液颜色与供试品一致，加标准铅溶液1.25ml，再加水使成25ml，作为对照液；另取本品0.5g，加水20ml溶解后，量取5ml，置乙管中， 加稀醋酸2ml、抗坏血酸1g、标准铅溶液1ml，加水适量使成25ml，作为供试液；甲乙两管中分别加硫化氢试液10ml，摇匀，在暗处放置10分钟；同置白纸上，自上面透视，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深，含重金属不得过百万分之二十。

3、根据药物结构设计合理的化学鉴别法、特殊杂质检查法（写出杂质限量计算公式，计算滴定度）及含量测定法（写出计算公式，计算滴定度）

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一、苯巴比妥

OHNOC2H5

NHO

C12H12N2O3 232.24

1. 化学鉴别 （1）结构性质：

①具有苯环取代基，可以发生硝化反应，生成黄色的硝基化合物；与甲醛-硫酸反应，呈玫瑰红色；与亚硝酸钠-硫酸反应，显橙黄色并转为橙红色。 ②具有丙二酰脲（-CONHCONHCO-)基团，与香草醛在浓硫酸下缩合显棕红色。 ③具有酰亚胺（-CONH-）基团，与碱共沸水解开环，产生氨气。

④具有丙二酰脲母体和酰亚胺基团，碱性条件下可与重金属离子（Ag+、Cu2+、Co2+、Hg2+）反应，生成有色化合物。

（2）鉴别方法：

①硝化反应：含有芳香取代基的巴比妥类药物，与硝酸钾及硫酸共热，可发生硝基化反应，生成黄色硝基化合物。

②与亚硝酸钠-硫酸反应：取本品约10mg，加硫酸2滴与亚硝酸钠约5mg，混合，即显橙黄色并随即转橙红色。

③与甲醛-硫酸反应：取本品约50mg，置试管中，加甲醛试液1ml，加热煮沸，冷却，沿管壁缓缓加硫酸0.5ml，使成两液层，置水浴中加热，接界面显玫瑰红色。

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2. 特殊杂质检查

（1）特殊杂质：由合成工艺过程中可以知道，苯巴比妥中的特殊杂质主要是中

COOC2H5CCONaCOOC2H5 4-氧钠基-5-苯基-4-辛烯二酯、中间体（Ⅱ）

间体(I)

COOC2H5CHCOOC2H5 4-苯基庚二酯和苯基丙二酰脲。

（2）检查方法：

?酸度 酸度检查主要用于控制副产物苯基丙二酰脲。中间体Ⅱ的乙基化反应不完全时，会与尿素缩合，产生酸性较苯巴比妥强的副产物苯基丙二酰脲，能使甲基橙指示剂显红色，故采用在一定量苯巴比妥供试品水溶液中，加入甲基橙指示剂不得显红色的方法，控制酸性杂质的量。

ChP苯巴比妥“酸度”检查：取本品0.20g，加水10ml，煮沸搅拌1分钟，放冷，滤过，取滤液5ml，加甲基橙指示剂1滴，不得显红色。

?乙醇溶液的澄清度 本项检查主要是控制苯巴比妥中的中间体I杂质的量。苯巴比妥酸杂质在乙醇溶液中的溶解度比苯巴比妥小，通过检查乙醇溶液的澄清度对其进行控制。

ChP苯巴比妥的“乙醇溶液澄清度”检查：取本品0.9867g，加乙醇5ml，加热回流3分钟，溶液应澄清。

(中性或碱性物质 这类杂质主要是中间体I的副产物2-苯基丁酰胺、2-苯基丁酰脲或分解产物等杂质，均为中性或碱性物质，难溶于氢氧化钠但溶于乙醚；而苯巴比妥具有酸性，可溶于氢氧化钠溶液，利用这些杂质与苯巴比妥在氢氧化钠试液和乙醚中的溶解度不同，采用提取重量法测定杂质含量。

ChP苯巴比妥“中性或碱性物质”检查：取本品1.0g，置分液漏斗中，加氢氧化钠试液10ml溶解后，加水5ml与乙醚25ml，振摇1分钟，分取醚层，用水振摇洗涤3次，每次5ml，取醚液经干燥滤纸滤过，滤液置105℃恒重的蒸发皿中，蒸干，在105℃干燥1小时，遗留残渣不得超过3mg。

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有关物质 ChP采用HPLC法对苯巴比妥的有关物质进行检查。

ChP苯巴比妥“有关物质”检查：取本品，加流动相溶解并稀释制成每1ml中含1mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置200ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。取对照溶液5μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的15%；精密量取供试品溶液与对照溶液各5

l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍，供

试品溶液色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积（0.5%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2倍（1.0%）。

3. 含量测定 （1）结构性质：

①具1.3二酰亚胺基团（-NH-CO-NH-)，易发生酮式-烯醇式互变异构，具有弱酸性，可用非水酸量法测定含量。

②具丙二酰脲（-CONHCONHCO-)母体和酰亚胺（-CONH-)基团，可用银量法测定含量。

③具有苯环，有紫外吸收，可用紫外分光光度法测定含量。

（2）测定方法：

一、银量法（原料药）

（1）原理：药物结构中的酰亚胺基团，在碳酸钠溶液中，生成钠盐而溶解，再与硝酸银溶液反应，首先生成可溶性的一银盐，加入过量的硝酸银溶液，则生成难溶性的二银盐白色沉淀。可用硝酸银滴定液直接滴定。反应摩尔比1:1

（2）测定条件：

溶剂：甲醇+3%无水碳酸钠 指示终点方法：电位法

滴定剂：硝酸银滴定液（0.1 mo1/L）

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（3）操作： 取本品约0.2 g，精密称定，加甲醇40 ml使溶解，再加新制的3％无水碳酸钠溶液15 m1，照电位滴定法（附录ⅦA），用硝酸银滴定液（0.1 mol/L）滴定。每1 ml 硝酸银滴定液（0.1 mo1/L）相当于23.22 mg的C12H12N2O3。

（4）计算：

T?cM0.1?232.24??23.22?mgml?n1

c?10?30.1?100%含量%?

TVF?100%?W23.22?V?W

（5）讨论：①无水碳酸钠应新鲜配制②AgNO3滴定液应新鲜配制③银电极使用前应进行处理

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