（2）鉴别方法：

①二硝基氯苯反应：在无水条件下，吡啶及其某些衍生物与2,4-二硝基氯苯混合共热或共热至熔融；冷却后，加醇制氢氧化钾试液使残渣溶解，溶液显紫红色。

例1 BP异烟肼注射液的鉴别 取本品适量（约相当于异烟肼25mg），加乙醇

5ml，加硼砂0.1g及5%的2,4-二硝基氯苯乙醇溶液5ml，水浴蒸干，继续加热10min，残渣加甲醇10ml搅拌溶解后，即显紫红色。

②还原反应：异烟肼的酰肼基具有还原性，可还原硝酸银为单质银，有黑色混浊，在试管壁上形成“银镜”，肼基被氧化生成氮气发生气泡。

例 BP异烟肼的鉴别 取本品约10mg，加水2ml溶解后，加氨制硝酸银试液

1ml，即发生气泡与黑色混浊，并在试管壁上生成银镜。

③缩合反应：异烟肼的酰肼基与芳醛缩合生成腙，如与香草醛反应生成异烟腙，为黄色结晶，并具有固定的熔点，可用于鉴别。

2、特殊杂质检查

（1）异烟肼中游离肼的检查 杂质来源：原料残存、降解产生 检查方法：TLC

例 异烟肼中游离肼的检查： 取本品，加丙酮-水（1:1）溶解并稀释至成每毫升

中约含100mg的溶液，作为供试品溶液；另取硫酸肼对照品，加丙酮-水（1：）溶解并稀释制成每毫升约含0.08mg（相当于游离肼20μg）的溶液，作为对照品溶液；取异烟肼与硫酸肼各适量，加丙酮-水（1:1）溶解并稀释制成每毫升中分别含异烟肼100mg及硫酸肼0.08mg的混合溶液，作为系统适用性试验溶液。按照薄层色谱法进行试验，吸取上述3种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙酮-丙酮（3:2）为展开剂，展开，晾干，喷以乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液，15min后检视，系统适用性试验溶液所显游离肼与异烟肼的斑点应完全分离，游离肼的Rf值约为0.75，异烟肼的Rf值约为0.56。在供试品溶液主斑点前方与对照品溶液主斑点相应的位置上，不得显黄色斑点。

3、含量测定

24

（1）结构性质：

①酰肼基具有较强还原性，可在强酸性介质中用溴酸钾滴定液直接滴定； ②异烟肼在稀盐酸中可被定量过量的溴氧化，可采用溴量法剩余滴定。 （2）测定方法：（氧化还原滴定法） ①溴酸钾滴定法：

例 注射用异烟肼的含量测定 取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取约0.2g，

置100ml量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度。摇匀，精密量取25ml，加水50ml、盐酸20ml与甲基橙指示液1滴，用溴酸钾滴定液（0.01667mol/L）缓缓滴定（温度保持在18-25℃）至粉红色消失。每毫升溴酸钾滴定液（0.01667mol/L）相当于3.429mg的C6H7N3O。（反应摩尔比为3:2）

②溴量法：

例 异烟肼注射液的含量测定 精密量取本品适量（约相当于异烟肼0.4g），加水稀释至

250ml，摇匀。精密量取25ml置具塞锥形瓶中，精密加溴滴定液（0.05mol/L）25ml，再加盐酸5ml，立即密塞并振摇1min，在暗处静置15min后，注意微开瓶塞，加碘化钾1g，立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每毫升溴滴定液（0.05mol/L）相当于3.429mg的C6H7N3O。（反应摩尔比为1:2）

七、重酒石酸间羟胺

结构：

HO

HCH(OH)CHCNH2·CH(OH)OHCH3

1、结构性质：

25

①具有脂烃胺侧链，有弱碱性，可用非水碱量法测定含量； ②具有酚羟基，可与三氯化铁反应呈色，或被氧化剂氧化呈色； ③具有酚羟基，其邻、对位氢易被溴取代，可用溴量法测定含量。

2、鉴别试验：

①与三氯化铁反应：酚羟基在弱酸性条件下，与Fe络合呈色，加入碱性溶液，即被高铁离子氧化而显紫色或紫红色。

②氧化反应：具有酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾等氧化剂氧化呈色。 ③与亚硝基铁氰化钠反应：具有脂肪伯氨基，可用其专属反应（Rimini反应）鉴别。

3+

例 重酒石酸间羟胺的鉴别： 取本品约5mg，加水0.5ml使溶解，加亚硝基铁氰

化钠试液2滴、丙酮2滴与碳酸氢钠0.2g，在60℃的水浴中加热1min，即显红紫色。

3、特殊杂质检查： 4、含量测定：

①非水碱量法：利用本类药物的弱碱性，原料药大多采用非水碱量法测定含量。

②溴量法：苯乙胺类药物中的苯酚结构，酚羟基邻、对位氢较活泼，能与溴定量的发生溴代反应，可用溴量法测定含量。（反应摩尔比1:3）

八、盐酸氯丙嗪

SNClNCH3

CH3·HCl

26

C17H19ClN2S·HCl 355.33

1.鉴别

（1）含S、N的三环共轭的大π体系，S、N与苯环形成p-π共轭，有紫外吸收，可用紫外可见分光光度法鉴别。

（2）10位的含氮取代基有碱性，可与生物碱进行沉淀进行鉴别。 （3）5位S具有还原性，可与硝酸等氧化剂发生氧化还原反应进行兼备。 （4）硫氮杂蒽母核可与钯离子配合显色反应，可用钯离子鉴别。 （5）是盐酸盐，可用氯化物的反应进行鉴别。 2.杂质检查

合成时有残留的原料及中间产物、副产物、药物的氧化产物，CH.P用TCL或HPLC法进行测定。 3.（1）含量测定

?10位的含氮取代基有碱性，可用非水滴定法测定含量。

?盐酸氯丙嗪为盐酸盐，其水溶液显酸性，在乙醇-水溶液中，可用氢氧化钠滴定液测定其含量。

?含S、N的三环共轭的大π体系，S、N与苯环形成p-π共轭，有紫外吸收，可用分光光度法测定其含量。

?是有机物，可用高效液相测定其含量。 （2）CH.P采用非水滴定法测定其含量

?原理：盐酸氯丙嗪10位的含氮取代基具有碱性，在醋酸-醋酐溶液中可与高氯酸滴定液定量滴定，从而测定其含量。 ?滴定液：高氯酸滴定液 ?试剂：冰醋酸和醋酐的混合溶液 ?指示终点方法：电位指示法 ?滴定度：T??含量计算

T?(Vo?Vs)?F?100%原料药：含量%?W

C?M0.1?355.33??35.53mg/ml n1

27

A片剂、注射液：标示量%?

á1cm?l?V?D?W?100%-W?标示量

九、对乙酰氨基酚

1.结构

HONH2.鉴别：

OCH3

（1）具有酚羟基，可与三氯化铁试液发生显色反应进行鉴别。 （2）具有潜在芳伯胺基，可在加热条件下发生重氮化-偶合反应鉴别。 （3）具有酰胺键，可利用其水解及水解产物鉴别。

3.对乙酰氨基酚合成以对硝基氯苯为原料，水解后制得对硝基酚，经还原生成对氨基酚，再经乙酰化制得成品；或以苯酚为原料，经亚基化及还原反应制得对氨基酚。Ch.P采用HPLC法检查对氨基酚和对氯苯乙酰胺进行检查。 4.含量测定方法

（1）具有苯环，有紫外吸收，可用紫外-可见分光光度法测定含量。 （2）具有潜在芳伯胺基，在加热条件下可用亚硝酸钠溶液法测定其含量。 （3）有机物，可用高效液相测定含量。 4.1Ch.P采用吸光系数法测定含量

（1）原理：对乙酰氨基酚具有苯环，有紫外吸收，在氢氧化钠溶解后测定其吸光度，根据朗伯-比耳定律即可测定含量。 （2）含量计算公式

Aá?l1cm含量%??V?D?100% 原料药：

W

28