miRNA inhibitor miRNA mimc 下载本文

请教一下,使用miRNA inhibitor或者miRNA mimc后这个miRNA的表达水平会相应抑制或上升吗,还是相应的miRNA表达水平改变不一定,主要是检测下游靶基因的改变?

望高手指点,谢谢!

miRNA inhibitor will functionally inhibit endogenous miRNA and thus releasing the suppression on downstream genes.

However, many paper also showed that miRNA inhibitor decreased miRNA level, possibly due to degradation.

2) miRNA mimic will not change the endogenous miRNA expression. However, most common miRNA mimics are miRNA precursors, so they can be processed into corresponding mature miRNAs.

miRNA inhibitors的应用

l 利用miRNA inhibitors模拟内生miRNA活性来研究Loss-of-function效应l 筛选调控基因表达和影响细胞发育过程的miRNAsl 深入研究miRNA在一些生物过程中的作用,如细胞的发育、增殖、分化和凋亡l 发现和验证内源性的miRNA target 作用原理

化学合成的 miRNA inhibitors是单链RNA分子,转染至细胞后特异性抑制miRNA功能,可以结合到成熟的miRNA上、干扰miRNA的生成、阻止miRNA加工、或者阻止其从核内转运到胞浆发挥作用。理论上是抑制miRNA调控作用。单链的2’甲氧设计增强稳定性。miRNA inhibitors Library

对于客户指定的某个miRNA组合,我们根据miRBase已有的miRNA,为客户定制相关组合的miRNA inhibitors library进行高通量的组合研究。

miRNA的inhibitor是用来下调内源性miRNA的量的,mimics是用来上调miRNA的量的。所以,一般来说,这个关系是确定的。当然,生物体一定有特例和复杂性,有时用inhibitor下调了一个miRNA的量,可能也会激发细胞更快速的产生更大量的miRNA,这种现象应该也是存在的。首先最直接的变化,是看转染inhibitor或者mimics后,用定量的办法看相应的miRNA的量的变化,这个是最直接的。

请问miRNA表达载体和miRNA mimic是一样的吗?导入了miRNA表达载体,需要miRNA上调和下调的模型,如果上调的话是否miRNA表达载体就是了(我的理解是过表达);下调是否表达抑制,采用Antagomirs、LNA,microRNA sponge吗?

miRNA的表达载体,是构建的一段质粒,表达的是miRNA的前体,是DNA,miRNA mimics是一小段化学合成的小RNA,转到细胞里表达出来的是miRNA的成熟体,是RNA。两者的功能类似,都是上调细胞里原本的miRNA含量,但制备的办法不同。现在的化学合成的mimics,我们3-5天就可以合成好,价格实惠,操作简单,可以首先考虑用mimics.下调是把细胞里的原来miRNA含量变少,也就是抑制,您所述的Antagomirs、LNA,microRNA sponge,这几都有是可以实现下调miRNA含量的产品。