胞外淀粉酶产生菌的分离

1材料与仪器 1.1 材料 1.1.1土样

采自………

1.1.2 培养基

淀粉培养基：蛋白胨，10g；NaCL，5g；牛肉膏，5g；可溶性淀粉，2g；蒸馏水，1000mL；琼脂，15～20g。

1.1.3 试剂

淀粉水解试验用碘液（卢戈氏碘液）：碘片，1g；碘化钾，2g；蒸馏水，300mL。

1.2 仪器

JT201N电子天平，上海精天电子仪器有限公司； HD650型桌上洁净工作台，苏州净化设备有限公司；

TP-S2027D智能蒸汽灭菌器，长春市百奥生物仪器有限责任公司； 可调式移液器 ，上海雷勃分析仪器有限公司；

KDM-500ML可调控温电热套，山东鄄城新天地实验仪器设备厂； DRH-100电热恒温箱，广东省环境保护仪器设备厂； C21A01-13苏泊尔电磁炉，浙江苏泊尔股份有限公司。

2试验方法 2.1 制备土壤稀释液

取5g土壤样品溶于盛有45mL无菌水中充分混匀后，取1mL土壤悬液加入盛有9mL无菌水的试管中混匀，此为10-2稀释液,依此类推,制成10-3～10-6不同稀释度的土壤溶液。

2.2 菌株分离

分别取10-2～10-6浓度的稀释液各100uL涂布于淀粉培养基中，倒置于37℃恒

温培养箱中培养24~48h。待长出单菌落后，往平板表面喷加卢戈氏碘液，菌落周围出现透明圈的即为胞外淀粉酶产生菌。

2.3 菌株纯化

将有透明圈的单菌落分别划线接种于淀粉培养基中进行进一步纯化，直至获得纯培养。

3 实验结果 3.1 平板分离结果

采集土样稀释涂布于淀粉培养基，37℃恒温培养24h，在……稀释度平板上形成大量单菌落，根据菌落特征初步判断获得……种细菌，分别编号，结果见表1。

表1 平板分离结果

菌株 1号 2号 3号 4号 ……..

菌落特征

3.2 产酶菌株的鉴别

往……稀释度平板表面喷加稀碘液，……..号菌落周围呈现透明水解圈，表明

这….个菌株均为胞外淀粉酶产生菌株。分别挑取后进行平板划线，直至获得纯培养。

4 结论与讨论

说明通过什么方法获得几株产酶菌株。实验中的不足及经验。