三、灭菌与无菌操作 （一）灭菌 1.物理灭菌法 （1）热灭菌法 1）干热灭菌法
A.火焰灭菌法 B。干热空气灭菌法 2）湿热灭菌法 （A）热压灭菌法： 特点及应用范围：
温度、压力、时间关系： 注意事项： (1)灭菌前对灭菌器进行全面检查 (2)灭菌物品应妥善放入灭菌器内 (3)采用饱和蒸汽灭菌4)要观察压力表与温度计是否相符(5)灭菌时间从全部灭菌物品达到要求温度计(6)灭菌完毕,锅内压与大气压相等时,逐渐开门。 （B）水浴式灭菌法 （C）流通蒸气灭菌法 （D）煮沸灭菌法
（E）低温间歇灭菌法（80摄氏度1h，20-25摄氏度24h，重复循环）： ◆不得用于静脉注射和椎管注射◆常需加入抑菌剂◆不属于最终灭菌（仅热压法为最终，适用于不耐热药物）
影响湿热灭菌的因素：
1.蒸气性质：饱和蒸气热含量高,潜热大,穿透力强，灭菌效率高；过热蒸气:不饱和蒸气 2.微生物的种类和数量：抗热能力:芽孢>繁殖体>衰老期 3.药物性质：营养性成分对微生物有一定保护作用。 4.药液pH：中性环境耐热性>碱性>酸性>
5.灭菌温度和时间：灭菌时间与温度成反比关系 6.灭菌物品数量：数量适当,整齐均匀摆放
3、射线灭菌法 （1）紫外线灭菌法
波长在200-300nm的紫外线,254nm灭菌力最強。 作用机理:核酸蛋白变性;空气产生臭氧 注意事項①表面灭菌、空气灭菌及水的测毒②不适宜易氧化药物或油脂等物质③不适用于玻璃器皿或安瓿④湿度:45-60%温度:10-55℃⑤对皮肤、眼结膜有影响⑥有效使用时限一般2000小时
（2）微波灭菌法
（3）辐射灭菌法
以放射性同位素Co60产生γ射线杀菌的方法 特点（考点）：
a,不升高灭菌产品的温度(2°C~3°C); b,穿透性强,效果可靠
适用范围:挥发性成分、不耐热药物的灭菌,如维生素类、抗生素、激素、中药制剂等物质的
灭菌
4)过滤除菌法0.22um
2.化学灭菌法（了解）
(1)气体灭菌法：环氧乙烷、甲醛、臭氧 (2)消毒剂消毒法
（二）灭菌操作法 （三）灭菌工艺参数
F值:在一定灭菌温度(T)下给定的Z值所产生的灭菌效果与在参比温度(T0)下给定的Z值所产生的灭菌效果相同时所相当的时间。常用于干热灭菌。
F0值:在一定灭菌温度(T)、Z值为10℃所产生的灭菌效果与121℃、Z值为10℃产生的灭菌效果相同时所相当的时间(min). 常用于湿热灭菌
四、药液过滤 五、渗透压调节
第三节灭菌制剂与无菌制剂的溶剂与附加剂 常用溶剂 (一) 注射用水
(二) 注射用油：碘值:126-140碘值高,不饱和键多,油易氧化酸败;碘值低杂质较多皂化
值:185-195；游离脂肪酸和结合成酯的脂肪酸的总量,可判断油种类和纯度。过高,脂肪酸分子量小,亲水性强;过低,含不皂化杂质较多酸值:〈0.5;游离脂肪酸多少,酸值高质量差,易酸败油脂氧化过程中,可能生成过氧化物,应控制。 (三) 其他溶剂：乙醇、甘油、丙二醇
附加剂
2.pH调节剂
3. 4.抑菌剂
红色判断题考点 5.
第四节灭菌与无菌制剂的制备 一、注射剂( Injection) (一)定义：原料药物与适宜的辅料灌封于特制容器中的无菌或灭菌制剂,通过注射器注入人体。 注射剂分类：
大多数为溶液型注射液；油注射液：肌肉注射
要求严格：静脉、脊椎腔给药
注射液特点
优点：1.吸收快,起效迅速,作用可靠
2.适用于不宜口服的药物、对胃肠道有刺激性的药物
3.适用于不能口服给药的病人:昏迷、抽搐状态;吞咽功能丧失或者有障碍者 4.给药途径广泛
缺点:给药不方便；注射时有疼痛威；制备过程复杂；易造成严重不良反应多无针粉末注 （胰岛素可被消化液破坏链霉素口服不易吸收）
注射剂的制备（注意顺序！！！考点）： 原辅料的准备、容器的处理 配制 过滤
灌封（有最终灭菌：C级区中A级区，无最终灭菌：B级区中A级区） 灭菌 质检 包装
小容量注射剂:20ml（流通蒸气使用较多，防止爆瓶） 过滤大容量注射剂:>50m
1、原辅料的准备
注射用规格，符合要求 2、容器的处理（了解）
3、注射剂的配制
注意事项①配制注射液时应在洁净的环境中进行,所用器具、原料和附加剂尽可能无菌②配制剧毒注射液时,严格称量与校核,并谨防交叉污染;③对不稳定的药物应注意调配次序,先加稳定剂或通惰性气体等,有时要控制温度与避光操作④不易滤清的药液可加0.1%~0.3%活性炭处理,小量注射液可用纸浆混炭处理⑤注射用水:贮存时间不得超过12小时⑥注射用油:经150℃干热灭菌1~2小时,冷却至适宜温度(主药熔点以下20~30℃),趁热配制、过滤(一般在60℃以下),温度不宜过低(黏度增大不易过滤)
4、过滤
粗滤(预滤)→精滤(终端过滤)（除去微生物） 5、灌封
(1)灌注药液环境要求:洁净区A级层流；剂量准确、药液不粘瓶；增加灌封量（避免容器遗留而剂量不足）