镉及其化合物（以Cd 计）（mg/kg） ≤ 铅及其化合物（以Pb计） （mg/kg） ≤ 铬及其化合物（以Cr计）（mg/kg） ≤ 汞及其化合物（以Hg计）（mg/kg） ≤ 10 100 150 5 （2）牧用微生物菌种执行企业标准。 其主要技术指标：

有效活菌总数≥20.0亿个（cfu）/g（ml） 杂菌率≤20.0% 含水量≤30.0% 其它同（1）。

4. 生产工艺技术方案

4.1 生产工艺

企业主要生产发酵微生物菌种产品，包括农用微生物菌种和饲用微生物菌种。

农用微生物菌种采用好气性发酵培养技术生产而成，包括固体和液体两种剂型产品；饲用微生物菌种采用厌气型发酵培养技术生产而成，包括固体和液体两种剂型产品。

1、农用微生物菌种生产流程

微生物斜面菌种 ↓ 活化 ↓

好气型液体培养→检测 ↓

微生物原菌种→包装入库 ↓

其他原料混合均匀←高温湿热灭菌 ↓ 无菌室接种 ↓

恒温（28～30℃）培养 ↓

干燥（低温真空或冷冻干燥）←质量检测 ↓ 计量 ↓ 包装成品 ↓

入库→留样备检

2、牧业微生物菌种生产工艺流程

微生物斜面菌 ↓ 分别活化 ↓

厌气型液体培养 ↓ 种子液扩大

↓

煮浆→液态发酵→检测 ↓

充分搅拌←粉碎←烘炒 ↓

固态发酵→检测 ↓

出料、包装 ↓

成品入库 →留样备捡

4.2 技术内容

4.2.1农用微生物菌种生产技术要点

1、农用微生物菌种生产

其关键步骤是：选择微生物、活化、一级、二级、配料、好气发酵、（液体成品）；固体吸附、低温干燥、检测、计量包装、固体成品入库。

（1）选择微生物。经过大量试验研究和反复筛选，确定用于生产农用微生物菌种的菌株主要有枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、巨大芽孢杆菌（B. megaterium）、地衣芽孢杆菌（B.licheniformis）、环状芽孢杆菌（B. circulans）、胶冻样芽孢杆菌（B. mucilaginosus）、汉逊酵母（Hensenula sp.）、粉状毕赤酵母（Pichia farinosa）、土壤范菌（Pantoea terrea）和米曲霉（Asperigillus oryzae）等。

（2）活化。菌种活化培养要选用适宜的培养基。芽孢杆菌一级培养选用牛肉膏蛋白胨培养基，二级培养选用PD培养基。酵母菌一级培养基：

磷酸氢二铵1g、氯化钾0.2g、硫酸镁0.2g、豆芽汁10ml、水1000ml、pH值7.0，加12ml0.04%溴甲酚绿作指示剂；二级培养选用PD培养基，或选用下述培养基：黄豆芽100g、葡萄糖50g、水1000ml。土壤泛菌一级培养基：磷酸氢二钾1g、蛋白胨5g、硫酸镁0.5g、葡萄糖10g、水1000ml、pH值自然；二级培养选用PD培养基。米曲霉一级培养选用察氏培养基，二级培养基：麸皮85g、豆粕粉15g，料水比=100:85，pH值自然。

表4-1微生物培养温度一览表

序号 菌种类别 菌种名称 枯草芽孢杆菌 巨大芽孢杆菌 地衣芽孢杆菌 环状芽孢杆菌 胶冻样芽孢杆菌 土壤泛菌 汉逊酵母 粉状毕赤酵母 米曲霉 培养温度（℃） 28～32 30～37 28～30 30～37 28～30 28～35 25～28 25～28 25～30 1 细菌 2 3 酵母菌 丝状真菌 （3）发酵。该菌种发酵为好气性发酵，分液体发酵和固体发酵两种方式。要保证发酵过程中O2的充足供应，生产上，可以通过检测O2/CO2浓度比来判定是否补充无菌空气，实现好气发酵。

（4）液体成品。保证其中有效活菌总数达到2.0亿个（cfu）/ml，并能保证功能菌的比例合适、稳定、安全。

（5）固体吸附。为了保证菌种活力，延长保质期，通过筛选，选定米糠：麸皮：豆粕：硅藻土：增效剂按1：1：1：4：1体积比充分混合，高温消毒后，作为菌种的固体载体培养基，保证微生物菌种中有效活菌总数和保存期最长，是经济有效的。

（6）低温干燥。干燥时，物料温度≤40℃，保证微生物菌种活力。

成品含水量维持在35%以下。

（7）质量检测。按照《农用微生物菌剂》GB20287-2006标准执行。 （8）包装。采用塑料袋、压膜纸袋或其它材料密闭包装，包装规格多样化。

2、饲用微生物菌种生产

其关键步骤是：选择微生物、活化、一级、厌气发酵、（液体成品）；固体吸附、低温干燥、检测、计量包装、固体成品入库。

（1）选择微生物。经过大量的试验研究和反复筛选，发现用于生产农用微生物菌种的菌株主要有嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、发酵乳杆菌(L. fermentum)、乳酸乳杆菌(L. lactis)、

植物乳杆菌(L. plantarum)、枯草芽孢杆菌(Bacillus. subtilis)、地衣芽孢杆菌(B. lincheniforms)、短小芽孢杆菌(B. pumilus)、嗜热双歧杆菌(Bifdobacterium thermophilum)、两歧双歧杆菌(B. bifidum)、瘤胃生拟杆菌(B. ruminocola)、解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)和酿

酒酵母（Sacchaeomyces cerevisiae）等。

（2）活化。菌种活化培养要选用适宜的培养基。芽孢杆菌、链球菌选用牛肉膏蛋白胨培养基。酵母菌选用PD培养基。乳酸菌选用MRS培养基。

表4-2微生物培养温度一览表

序号 1 菌种类别 细菌 菌种名称 嗜酸乳杆菌 发酵乳杆菌 乳酸乳杆菌 植物乳杆菌 培养温度（℃） 37