加试特训(九)

1．请回答下列有关微生物的相关问题。

资料一 微生物在现代生物技术中应用非常广泛，如酿酒制醋等。获取纯种酿酒酵母菌的基本程序是：配制培养基—接种—培养—观察记录—纯化培养。 (1)酵母菌的培养最好使用下列哪种培养基( ) A．牛肉膏蛋白胨培养基 B．麦芽汁琼脂培养基 C．无土栽培培养基 D．MS培养基

(2)采用划线分离法接种时，开始接种时要灼烧接种环，目的是____________________。要把接种后的培养基和一个未接种的培养基同时放入恒温箱培养，设置“未接种的培养基”的目的是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)如果将分离出来的纯种酿酒酵母接种到葡萄汁中发酵，如何获得酒精含量更高的果酒？ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)把从酵母细胞中提取的淀粉酶固定在尼龙布上制成固定化酶，与传统酶应用技术相比，此技术最显著的优点是__________________________________________。

(5)某实验小组欲按上述方法从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，应将菌液涂布接种于以____________为唯一碳源的固体培养基上，30 ℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈__________状态放置；筛选时应将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是出现透明圈，则说明此种菌能够______________________________________。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用__________法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。

资料二 基因工程中常选用一些微生物作为工程菌，下图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图。

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(6)a代表的物质和质粒的化学本质相同，都是________________，二者还具有其他共同点，如①____________，②________________(写出两条即可)。

(7)若质粒DNA分子的切割末端为错误!，则与之连接的目的基因的切割末端应为____________________；可使用__________________________把质粒和目的基因连接在一起。

(8)氨苄青霉素抗性基因在质粒DNA上被称为__________________，其作用是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (9)下列常在基因工程中用做载体的是( ) A．苏云金芽孢杆菌抗虫基因 B．土壤农杆菌环状RNA分子 C．大肠杆菌的质粒 D．动物细胞的染色体

答案 (1)B (2)灭菌 检验培养基是否被污染 (3)往葡萄汁中加入适量的蔗糖 (4)可重复使用(产品易纯化)

(5)淀粉 倒置 分泌淀粉酶使淀粉发生水解 划线分离 (6)DNA 能够自主复制 具有遗传效应 (7)错误! DNA连接酶

(8)标记基因 筛选到含有重组DNA分子的受体细胞 (9)C

解析 (1)“细菌喜荤，霉菌喜素”，A培养基适用于细菌培养，B培养基适用于真菌培养；C培养基适用于植物体培养，D培养基适用于植物组织培养。(2)开始接种时要对接种环灼烧灭菌，接种后的培养基和一个未接种的培养基同时放入恒温箱培养，目的是检验培养基在接种中是否被污染。(3)葡萄汁中添加蔗糖发酵能促进酵母菌快速生长，加快发酵产生酒精更多。(4)使用固定化酶的优点是酶制剂更加稳定、可以重复使用、产品易纯化等。(5)以淀粉为唯一碳源的固体培养基通常只生长能利用淀粉的微生物。培养皿在培养过程中会有冷凝水

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从盖上滴落到培养基上，培养皿倒置培养可以防止菌体随水滴扩散，使分离菌种失败。培养基中含淀粉遇碘液会显蓝色，若菌体能分解利用淀粉，其菌落周围会出现透明圈。通过划线分离法可以进一步分离纯化菌种。(6)a为拟核，与质粒的化学本质相同，都为DNA，均为大肠杆菌的遗传物质，可以自主复制，并具有遗传效应。(7)相同的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒，产生粘性末端的碱基序列互补，可以通过DNA连接酶连接。(8)质粒上的抗性基因作为标记基因，可以用于筛选含有重组DNA分子的受体细胞。(9)作为基因工程中的载体，应能够自主复制，并具有标记基因和多个限制性核酸内切酶切点。

2．在工业生产中，α-淀粉酶主要是通过固定化酶技术将其用于淀粉的分解，α-淀粉酶广泛分布于动物、植物和微生物中。请回答下列相关问题：

(1)在上个世纪50年代，酶已经大规模地应用于各个生产领域，到了70年代又发明了固定化酶技术。固定化酶技术将酶固定在不溶于水的载体上，使酶既能与____________________接触，又能与__________________分离，同时固定在载体上的酶还能______________________

。

常

用

的

固

定

方

法

有

_______________________________________________________。 (2)“α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测”实验中：

①α-淀粉酶固定在________上，使用了下图中方法________(填出号码及名称)。

②实验中，用滴管滴加淀粉溶液时，使淀粉溶液以________流速过柱，目的是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 ③灌注了固定化酶的注射器在使用完后要__________________________________，放置在__________________中保存。

(3)正常大鼠体内因含有α-淀粉酶基因可以正常利用淀粉。但研究发现某一突变型大鼠因体内缺少α-淀粉酶基因无法利用淀粉。现科研人员通过基因改造使其可以正常利用淀粉。具体流程如下：

①卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可从已处死的雌鼠____________________中获取。 ②图中的α-淀粉酶基因作为________________，质粒作为____________________，二者需用____________________________切割后连接成重组载体，该过程与质粒上含有

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