胰岛素In：胰岛B细胞分泌，调节血糖水平并受血糖浓度的调控。 C肽：在蛋白水解酶作用下，在胰岛素原转变为胰岛素的过程中释放出一个由31个氨基酸组成的片断，测定血清C肽的水平可以了解胰岛素的分泌、代谢和胰岛B细胞的储备功能。

4. 糖化血红蛋白GHb：糖化血红蛋白：可反映病人二月前的血糖水平HbA1c: 4－6％

目前国际上普遍采用的糖尿病诊断标准：

①糖尿病症状加随意静脉血浆葡萄糖>=11.1mmol/L(200mg/dl) ②空腹静脉血浆葡萄糖>=7.0mmol/L(126mg/dl)

③OGTT时，两小时静脉血浆葡萄糖>=11.1mmol/L(200mg/dl) 八、临床常用免疫学检测

临床免疫学检查常用于感染性疾病、自身免疫性疾病、变态反应性疾病、免疫缺陷病、肿瘤等疾病的诊断与疗效监测。 1.血清免疫球蛋白（Ig）检测

?Ig通常是指一组具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白，由浆细胞合成和分泌，有特异性识别抗原的功能，但必须与抗原结合形成免疫复合物后才能启动效应功能。包括：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE 。 含量 特点 IgG 7.0-16.6g/L,占70-80％ 再次免疫应答抗体、具抗菌、抗病毒活性，能通过胎盘

IgA 0.7-3.5g/L，占10-15％ 分泌型（SIgA)有局部粘膜抗感染功能，存在各种分泌物中；血清型免疫作用弱 IgM 0.5-2.6g/L,占5-10％ 五聚体，分子量最大Ig，如天然凝集素抗A、抗B IgE 0.1-0.9mg/L 与变态反应、寄生虫病、皮肤过敏有关 临床意义：见课本 ?血清M蛋白测定

多发性骨髓瘤：IgG、IgA、IgE，少见IgD 巨球蛋白血症：大量IgM 2.血清补体检测 补体 ?总补体溶血活性CH50测定：溶血素（抗体）致敏绵羊红细胞 溶血 Normal Values：50-100kU/L

?补体C3与C4测定：C3是传统和旁路途径激活的关键 Normal Values：C3:0.8-1.5g/L C4:0.2-0.6g/L 临床意义（CH50、C3与C4）： ①升高：炎症、肿瘤等

②降低：肾炎、自身免疫病如系统性红斑狼疮等 3.细胞免疫检测 ?T细胞亚群的检测 ①E玫瑰花结形成试验（ERFT)：检测T细胞数量【T细胞表面具绵羊红细胞（SRBC）受体】

Normal Values：58-72％左右 临床意义：

升高：见于自身免疫性疾病及器官移植排斥反应等 降低：见于免疫缺陷性疾病等。 PHA

②淋巴细胞转化试验（LCT)：检测T细胞的生物学功能【淋T 淋母细胞】

临床意义：转化率降低，见于细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下患者。 ?淋巴细胞亚群的分化抗原测定(cluster differentiation CD) ①T细胞： CD3+-总T标志、CD4+-TH标志(help T cell)、CD8+-Ts标志(suppressor T cell)

临床意义：CD4+/CD8+: Th/Ts，降低常见于AIDS。 ②B细胞： CD19、CD20、CD22等 ?细胞因子检测

①白介素-2（IL-2)和IL-2R：白细胞介素（IL）多种细胞产生的能介导免疫细胞间的相互作用。IL-2是由活化T细胞产生，具有多向性作用的细胞因子 ②肿瘤坏死因子（TNF)：引起肿瘤组织出血、坏死和杀伤作用 ③干扰素（IFN)：抗病毒、抗肿瘤作用 4.肿瘤标志物检测

肿瘤标志物（tumor marker)是指在肿瘤发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身合成、释放或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。包括蛋白质类、糖类和酶类肿瘤标志物。

肿瘤标志物检测的意义是：高危人群的筛查、辅助诊断、观察疗效和肿瘤复发检测以及判断预后。 ?甲胎蛋白（AFP）：胎儿早期肝脏合成的糖蛋白，对诊断肝细胞癌有重要临床意义。

Normal Values：血清<25μg/L

临床意义：特异——原发性肝细胞癌显著增高，诊断阈值>300μg/L ?癌胚抗原（CEA）

Normal Values：血清<5.0μg/L

临床意义：非特异性——广谱性肿瘤标志物，特别是消化道肿瘤患者中可升高，对肠癌复发、转移有重要意义。 ?前列腺特异抗原（PSA）：PSA是一种由前列腺上皮细胞分泌的单链糖蛋白。在血清中PSA以游离PSA和复合PSA两种生化形式存在。在前列腺癌时血清水平明显升高，敏感性、特异性高。 ?鳞状上皮癌抗原（SCC)

Normal Values：血清<1.5μg/L

临床意义：SCC水平升高见于肺鳞状上皮癌和宫颈癌

?CA19-9用于诊断胰腺癌、肝胆和胃肠道疾病；CA125用于诊断卵巢癌；CA15-3用于诊断乳腺癌。 5.自身抗体检测

自身免疫病是指免疫系统对自身成分的免疫耐受性减低或破坏，产生自身抗体损伤含有相应自身抗原的组织器官而造成的疾病。

?类风湿因子（RF)：是变性IgG刺激机体产生的一种自身抗体，主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液中。主要为IgM型。

临床意义：类风湿性疾病时，RF↑，阳性率达70-90％; 其他自身免疫性疾病，RF亦↑

?抗核抗体检测 ①抗核抗体（ANA）：指抗各种细胞核成分的自身抗体，是血清中存在的一类和自身组织细胞的细胞核发生反应的自身抗体的总称。

临床意义：SLE(未治疗的)，阳性率达80％-100％，亦可见于其他自身免疫性疾

病。

②可提取性核抗原（ENA）：ENA抗体谱包括抗Sm、抗核糖体、抗Scl-70、抗Jo-1、抗SS-B、抗SS-A和抗nRNP等的抗体。 临床意义：

抗Sm抗体：SLE的特异性标志之一 ，抗dsDNA和抗Sm 抗体同时检测，可提高SLE的诊断率。

抗SSA、SSB抗体－－干燥综合征 抗nRNP抗体--混合性结缔组织病

③抗双链DNA（ds-DNA）抗体：抗dsDNA抗体靶抗原是细胞核中DNA的双螺旋结构。

临床意义：SLE的高特异性试验，但敏感性较低，活动期SLE阳性率70％-90％。 6.感染免疫检测 ?细菌感染免疫检测

①抗链球菌溶血素“O”抗体（ASO）测定

临床意义：风湿、风湿性关节炎、风湿性心脏病、急性肾小球肾炎时↑

②肥达氏反应：利用伤寒和副伤寒沙门菌菌液为抗原，检测病人血清中有无相应抗体的一种凝集试验。伤寒第三周后阳性率达80%，初期阴性。——简答题19：简述肥达试验的原理及其临床意义 Normal Values：伤寒H<1:160，O<1:80，副伤寒甲、乙、丙<1:80 临床意义： O、H均升高：伤寒 O不高、H升高：预防接种或回忆性反应 O升高、H不高：感染早期或交叉反应 ?病毒感染免疫检测

TORCH试验：弓形虫、风疹、巨细胞病毒、单纯疱疹 ?性传播疾病免疫检测 ①梅毒感染检测

筛选试验：RPR－快速血浆反应素试验 确诊试验：TPHA－梅毒螺旋体血凝试验 ②HIV感染检测

筛选试验：ELISA法测HIV抗体

确诊试验：蛋白印迹试验或RT-PCR测HIV-RNA 九、临床常见病原体检测

1. 标本的采集运送和检查方法

?细菌检验标本采集与送检的基本原则

①注明被检人姓名、性别、年龄、临床诊断、标本来源及检验目的、抗生素使用情况。

②尽量在抗生素使用前采集标本。 ③在采集血液、脑脊液、穿刺液等标本时，应严格执行无菌操作，避免杂菌污染。 ④立即送到实验室，某些细菌还应注意保温、保湿。 ⑤盛标本容器须经灭菌处理，勿用消毒剂。 ?常见标本的采集 ①血液与骨髓

采血部位多为肘静脉，切忌在静滴抗菌药物的静脉处采集血标本，无菌操作。

每次采血量为5～10ml左右，培养基与血液之比以10:1为宜，以稀释血液中的抗生素、抗体等杀菌物质。

选择体温上升或高温时采血。对已用抗菌药物而又不能停药者，应在下次用药前采血。

每例建议不同时间不同部位采血3次，注意区别感染菌和皮肤污染菌。 ②尿液

中段尿采集：最常用的方法。采样前须消毒尿道口将中段或近后段的尿液留于无菌容器中。

导尿管采集尿液：可减少污染，但易引起逆行感染。不可从集尿袋下端管口留取标本。

膀胱穿刺采集尿液：病人耻骨上皮肤消毒后，以无菌针筒作膀胱穿刺。此法主要用于尿液厌氧菌培养或婴幼儿。 ③粪便

挑取有脓血粘液部分的新鲜粪便约2～3克盛于灭菌容器中送检，也可用拭子挑取粪便插入Cary-Blair运送培养基中送检。

对不易获取粪便者，如婴幼儿可用直肠拭子采集送检。 ④呼吸道标本

自然咳痰：清水反复漱口后用力咳嗽，从呼吸道深部咳出,以清晨第一口痰为好。

气管镜下采集法、气管穿刺法：下呼吸道病原学的理想标本，可减少污染，但病人有一定的痛苦，不易接受和推广。

应及时送检和处理(<1小时)，放置时间长可导致肺炎链球菌，流感嗜血杆菌等的检出率明显下降。 ⑤脑脊液等无菌体液标本

严格无菌条件下采集标本。 尽量采集多的标本送检。

尽快送检或床旁接种可提高阳性率，特殊标本需保温。如脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等。

⑥其它标本(伤口、烧伤创面、脓肿等)

无菌生理盐水清洗病灶表面后，用无菌拭子取病灶深部的脓液和分泌物，立即送检。

对未溃破的脓肿直接用碘酒、酒精消毒皮肤后，以无菌注射器抽取脓液送检，也可以切开排脓时用无菌拭子采样。

生殖道标本包括尿道口分泌物、外阴糜烂物、宫颈口分泌物、前列腺液等，应注意保温。 ?检查方法

①直接涂片、镜检：初步诊断但阳性率低。如抗酸染色找结核杆菌。

②分离、培养、鉴定：金标准较费时（3天）,同时可进行药物敏感试验。 ③血清学检查：如肥达氏试验、军团菌抗体检查等。抗体检测应进行双份血清检测，两次抗体效价相差4倍以上有现症诊断价值，但无早期诊断意义。（但IgM有早期诊断意义）

④病原体特异性抗原检测 免疫荧光技术、酶免疫技术、化学发光技术、胶乳凝集技术等。

⑤病原体核酸检测 PCR、分子杂交、DNA测序等。

2. 病原体耐药性检测

?当前临床分离的常见细菌

①革兰阴性菌：大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌等，占70%。

②革兰阳性菌：葡萄球菌、肠球菌、肺炎链球菌、卡他布兰汉菌等，占30%。 ?耐药机制

①耐药基因的整合子系统

②产生灭活抗生素的水解酶或钝化酶 ③改变抗生素作用的靶位 ④细菌膜的外排泵出系统 ⑤生物膜的形成，提高耐药性 ?药物敏感试验

①K-B纸片琼脂扩散法：最常用，操作相对方便

②稀释法：包括琼脂稀释法和肉汤稀释法，可获得最小抑菌浓度（MIC），但较麻烦

③E试验：结合稀释法和扩散法，价格昂贵 ?重点耐药菌株监测试验

①耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的筛选

②氨基糖苷类抗生素高耐药肠球菌 (HLAR)筛选 ③耐青霉素肺炎链球菌(PRSP)筛选

④染色体Ι型β-内酰胺酶AmpC酶的检测 ⑤超广谱β内酰胺酶(ESBL)检测 ?病原菌耐药基因的检测

①适全生长缓慢的细菌如结核分枝杆菌 ②对病原菌的耐药具有确证意义

③考核其它耐药性检查方法的金标准,可能成为未来耐药性检查的主导方法。 3. 临床感染常见病原体检测 ?流行病学特征

①新的病原体不断被发现，如SARS病毒、禽流感染病毒等。 ②老传染病死灰复燃 如结核、梅毒、霍乱等 ③多重耐药菌株不断出现

④器官移植、放/化疗、侵入性医疗检查或治疗导致医院感染发生率不断增加 ?检查项目和临床应用

①细菌感染：细菌培养是最重要的确诊方法

②病毒感染：血清学检查，如HBV，HIV检测，PCR方法 ③真菌和寄生虫感染：形态学检查 4. 病毒性肝炎检测

?甲型肝炎(粪口途径)： 临床意义：

①IgM抗体：特异性早期诊断指标,提示HAV现症感染 ②IgG抗体：出现于恢复期且长期存在,提示既往感染 ?乙型肝炎

①最常用的定性检测：乙肝两对半 常用测定方法：ELISA法 ②乙肝DNA定量PCR检测：病毒复制的指标