现代分子生物学 朱玉贤版 第2章 课堂笔记

分子生物学

第二章 染色体与DNA 原核细胞染色体:

1一般只有一条大染色体且大都带有单拷贝基因,除少数基因外(如rRNA基因)。 2整个染色体DNA几乎全部由功能基因和调控序列所组成。 3几乎每个基因序列都与它所编码蛋白质序列呈线性对应关系

组蛋白: 染色体的结构蛋白,与DNA组成核小体。 组蛋白的特性:

1进化上极端保守性。

2无组织特异性

3肽链上氨基酸分布的不对称性 4组蛋白的修饰作用。 5富含赖氨酸的组蛋白H5

C值: 一种生物单倍体基因组的DNA总量。

C值反常现象: 真核细胞基因组最大的特点是好有大量的重复序列,而且功能DNA

序列大多被不编码蛋白质的非功能DNA所隔开,这就是著名的“C值反常现象”。

DNA经过四级压缩,长度压缩将近10000倍。四级分别为:

核小体 螺线管

超螺旋圆筒 染色单体

{核小体: 是由H2A、H2B、H3、H4各两个分子生成的八聚体和由大约200bpDNA组成的。 八聚体在中间,DNA分子盘绕在外,而H1则在核小体的外面。每个核小体只有一个H1。 螺线管: 螺线管是由10nm染色质细丝盘绕形成的螺旋管状细丝,表现为30nm纤维。}

原核细胞DNA有如下特点:

1结构简练。非编码序列极少,这与真核细胞DNA冗余现象完全不同。 2存在转录单元。多顺反子mRNA。

3有重叠基因。同一段DNA含有两种不同蛋白质的信息.。

DNA的一级结构: 即是指四种核苷酸的连接及排列顺序。碱基的不同决定了脱氧

核苷酸的不同。

DNA一级结构特点是:

1DNA分子由两条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成。

2DNA分子中的脱氧核糖和磷酸交替连接,排在外侧,构成基本骨架,碱基排列在内侧。 3两条链上的碱基通过氢键相结合,形成碱基对,它的组成有一定的规律。

DNA二级结构:指两条多核苷酸链反相平行盘绕所生成的双螺旋盘绕结构。有三种构

想:A-DNA、B-DNA、Z-DNA,B型为普遍存在的结构。 B-DNA: A-DNA: Z-DNA:

DNA的二级结构(B-DNA特点):

螺旋直径2nm

链间有螺旋形凹槽,较小的为小沟(1.2nm),较大的为大沟(2.2nm) 碱基间距0.34nm 每轮碱基数10

维持DNA双螺旋的力:氢键、碱基堆集力、疏水作用力。

(磷酸基团间的静电斥力:带负电荷的磷酸基的静电斥力,所以DNA需要保存在含 Na+ 生理盐条件 。)

DNA变性(denaturation):在某些理化因素作用下,DNA分子互补碱基对之间的

氢键断裂,DNA双螺旋结构松散,变成单链的过程。

DNA复性(renaturation) :变性DNA在适当条件下,分开的两条单链分子按照

碱基互补原则重新恢复天然的双螺旋构象的现象,又称为退火。

DNA的高级结构:DNA的高级结构指DNA双螺旋进一步扭曲盘旋所形成的特定空

间结构。

DNA的超螺旋结构形成的意义:

1使DNA形成高度致密状态从而得以装入核中; 2推动DNA结构的转化以满足功能上的需要。如负超螺旋分子所受张力会引起互补链 分开导致局部变性,利于复制和转录。

双链DNA的复制:是一个非常复杂的过程,包括复制的起始、延伸和终止三个阶段。

半保留复制:DNA在复制时首先两条链之间的氢键断裂两条链分开,然后以每一条链

分别做模板各自合成一条新的DNA链,这样新合成的子代DNA分子中一条链来自亲代DNA,另一条链是新合成的,这种复制方式为半保留复制。

复制叉:复制时,双链DNA要解开成两股链进行,使复制起点呈叉状,被称为复制叉。

复制子:为生物体DNA的复制单位。

复制的起点、方向和速度:

1复制起点是固定的,表现为固定序列,并识别参与复制起始的特殊蛋白质。 2复制叉移动的速度虽多种多样,但以双向等速为主。

3复制方向有5’向3’复制,前导链连续合成,后随链合成不连续,形成冈崎片段。

复制的几种主要方式:

1线性DNA双链复制

2环状DNA双链复制{θ型、滚环型、D-环型}

原核生物DNA复制的特点:

1.DNA双螺旋的解旋

首先在拓扑异构酶I的作用下解开负超螺旋,并由解链酶解开双链,

接着由SSB蛋白来稳定解开的单链,以保证该局部结构不会恢复为双链。 2.DNA复制的引发

首先由引发酶(一种RNA聚合酶)在DNA模板上合成一段RNA链,

接着由DNA聚合酶从RNA引物3’端合成新DNA链,后随链的引发过程由引发体来完成。 3.冈崎片段与半不连续复制

已知DNA聚合酶的合成方向都是5’→3’,这使得后随链无法连续合成。 后随链以5’→3’的方式先合成片段(冈崎片段),再连接为完整的链。

4.复制的终止

当复制叉前移,遇到约22个碱基的重复性终止序列(Ter)时,Ter-Tus复合物能阻止DNA的解链,阻挡复制叉的前移。复制停止后,仍有50-100bp未被复制,将由修复方式填补空缺,而后两链解开

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