课题1 微生物的实验室培养
基础巩固
1在微生物培养过程中,需要对培养基等进行灭菌,其标准是( )
A.杀死所有的病原微生物 B.杀死所有的微生物的细胞
C.杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子 D.使病原菌不生长
解析:灭菌是指利用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。 答案:C
2下列有关倒平板的叙述,错误的是( )
A.在火焰旁进行操作
B.将打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰 C.将培养皿打开,培养皿盖倒放在桌面上 D.等待平板冷却凝固后需要倒过来放置
解析:整个倒平板过程要防止外来杂菌的入侵,因此,应在火焰旁进行操作,打开的锥形瓶瓶口应迅速通过火焰。培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙进行操作,不能将培养皿盖完全打开。平板冷却凝固后需要倒过来放置。 答案:C
3下列有关平板划线法的操作,错误的是( )
A.将接种环放在火焰上灼烧
B.将已冷却的接种环伸入菌液中沾取一环菌液 C.沾取菌液和划线要在火焰旁进行
D.接种环划线要将最后一区的划线与第一区的划线相连
解析:每次划线之前都需对接种环进行灼烧灭菌,划线操作结束仍需灼烧接种环;灼烧接种环之后,要冷却后才能伸入菌液,以免温度太高,杀死菌种;为了避免杂菌污染,沾取菌液和划线要在火焰旁进行;在平板划线时不要将最后一区的划线与第一区相连,避免已分离开的菌体再次聚集,最终无法获得单菌落。 答案:D
4下列操作与消毒或灭菌无关的是( )
A.接种前用火焰灼烧接种环 B.接种前用酒精擦拭双手
C.将平板倒置,放入培养箱中培养 D.接种在酒精灯的火焰旁完成 解析:接种用具、器皿上以及空气中都有微生物,都有导致污染的可能,必须严格消毒、灭菌。A、B、D三项都属于实验操作过程中的消毒或灭菌。将平板倒置,放入培养箱中培养是为了防止杂菌污染,不属于消毒或灭菌。 答案:C
5微生物培养是微生物工程中的基础技术。下列相关叙述正确的是( )
A.病毒和细菌的培养基成分相同 B.平板划线法中的划线是连续进行的
C.微生物培养基中并不都必须添加碳源或氮源 D.在培养的过程中,细胞种类、数目都不断地增加
解析:病毒是寄生生物,在活细胞中才能进行生命活动;平板划线法是为了稀释细菌,划线间断进行;微生物培养基根据需要添加相应的碳源和氮源;在培养的过程中,细胞的数目不断地增加,种类不增加。 答案:C
6防止杂菌入侵,获得纯净的培养物,是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是( )
A.实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒
B.接种环、接种针等金属用具,直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌
C.在实验室中,切不可吃东西、喝水,离开实验室时一定要洗手,以防止被微生物感染 D.使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理,以免污染环境
解析:接种环等金属用具应放在酒精灯火焰的充分燃烧层即外焰处灼烧灭菌。 答案:B
7以下关于菌种保藏的叙述,错误的是( )
A.菌种保藏的目的是保持菌种的纯净 B.固体斜面培养基可用于菌种的临时保藏 C.菌种的长期保存一般采用甘油管藏法
D.甘油管藏菌种在-20 ℃条件下进行,因此对甘油可不必灭菌
解析:采用甘油管藏法保存菌种时,需对甘油灭菌,以避免杂菌污染。 答案:D
8下列是与微生物培养有关的问题,请回答下列问题。
(1)某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水,其中凝固剂是 ,碳源是 ,氮源是 。从同化作用类型看,用该培养基培养的细菌属于 。
(2)将少量细菌接种到一定体积的液体培养基中,适宜条件下培养,定时取样测定菌体数目,以时间为横坐标,以菌体数目的对数为纵坐标,可以得到细菌的 曲线。该曲线中以菌体数目的对数作为纵坐标的原因
是 。
解析:(1)在该细菌固体培养基组成成分中,凝固剂是琼脂,碳源是葡萄糖,氮源是尿素。由于该细菌利用有机物(葡萄糖)作碳源,故从同化作用类型看,该细菌属于异养型。(2)细菌的增长曲线反映了细菌群体从开始生长到死亡的动态变化过程。 答案:(1)琼脂 葡萄糖 尿素 异养型
(2)增长 培养中的细菌数量以指数形式增长,取对数便于反映细菌群体的生长规律
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9为了获得纯度高的大肠杆菌,需要对大肠杆菌进行培养和分离。培养大肠杆菌一般用牛肉膏蛋白胨固体培养基。
(1)培养大肠杆菌时,配制固体培养基的基本步骤是计算→称量→ → →倒平板。
(2)称量时,牛肉膏由于比较黏稠,可以用 挑取,放在 上称量。牛肉膏和蛋白胨由于 ,称量时动作要迅速,称后要及时盖上瓶盖。
(3)在牛肉膏蛋白胨固体培养基上大肠杆菌能生长,说明培养基含有 等大肠杆菌生长所需的营养要素。
(4)微生物纯化培养可以通过多种接种方法,如 和 等,使大肠杆菌在固体培养基上形成单个 ,从而获得纯菌株。 答案:(1)溶化 灭菌
(2)玻璃棒 称量纸 容易吸潮 (3)碳源、氮源、无机盐、水
(4)平板划线法 稀释涂布平板法 菌落
能力提升
1下列有关微生物培养的叙述,不正确的是( )
A.获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染 B.单菌落的分离是消除污染杂菌的一种方法 C.培养基都必须使用高压蒸汽灭菌法灭菌 D.倒置平板可防止培养皿盖上的冷凝水滴落
解析:防止杂菌污染是获得纯净培养物的关键,A项正确;单菌落由一个微生物繁殖而来,因此分离单菌落可以消除杂菌,B项正确;培养基灭菌一般使用高压蒸汽灭菌法,但是对于含有高温易分解的营养物质的培养基,就不能采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌,C项错误;倒置平板可以防止培养皿盖上的冷凝水滴落到培养基表面污染培养基,D项正确。 答案:C
2无菌技术常围绕着如何避免杂菌的污染展开,下列常见的无菌技术,属于灭菌处理的是( )
A.操作者的双手用酒精擦拭 B.实验室用紫外线照射 C.对接种环进行灼烧处理 D.水源用氯气处理
解析:灭菌是指用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。 答案:C
3金黄色葡萄球菌有很强的致病力,常引起骨髓炎等,还可能引起食物中毒。下列筛选金黄色葡萄球菌实验结束后的做法,错误的是( ) A.对接种环进行灼烧处理
B.带菌培养基必须经高压蒸汽灭菌后才能倒掉 C.带菌培养基必须经加热后才能倒掉
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