530-490nm，每隔10nm．测一次)。然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制出吸收曲线，从吸收曲线上确定测定的适宜波长。
(2)邻二氮杂菲—亚铁配合物的稳定性：用上面溶液继续进行测定，其方法是在最大吸收波长510nm处，每隔一定时间测定其吸光度，例如在加入显色剂后立即测定一次吸光度，经30、90、120min后，分别再测一次吸光度，然后以时间(t)为横坐标，吸光度A为纵坐标绘制曲线。此曲线则表示该配合物的稳定性。 (3)显色剂浓度试验：取50mL容量瓶7个，进行编号， 用5mL移液管准确移取10μg.mL-1铁标准溶液5mL于容量瓶中，然后加入1mL 10％盐酸羟胺溶液，经2min后，再加入5mL 1
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mol.L NaAc溶液，然后分别加入0.1％邻二氮杂菲溶液0.3、0.6、1.0、1.5、2.0、3.0和4.0ml，用水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，用适宜波长(例如510nm)、2cm比色皿，以水为参比，测定上述各溶液的吸光度。然后以加入的邻二氮杂菲试剂的体积为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制曲线，从中找出显色剂最适宜的加入量。
(4)溶液酸度对配合物的影响：准确移取100μg.mL铁标准溶液5mL于100mL容量瓶中，加入5mL2mol.L-1的HCI溶液和10mL 10％盐酸羟胺溶液，经过2min后再加入0．1％邻二氮杂菲溶液30mL,用水稀释至刻度，摇匀，备用。取50mL容量瓶7个，进行编号，用移液管分别准确移取上述溶液10mL于各容量瓶中。在滴定管中装入0.4mol.L-1的NaOH溶液，然后依次在容量瓶中加入0.4mol.L的NaOH溶液0.0、2.0、3.0、4.0、6.0、8.0及10.0mL(如果按本实验步骤准确加人铁标准溶液及盐酸，则此处加入的0.4mol.L-1的NaOH溶液的量能使溶液的pH达到要求；否则会略有出入，因此在实验时，最好先加几ml的NaOH(例如3mL,6ml)，以pH试纸确定该溶液的pH值，然后再确定其他几个容量瓶应加NaOH溶液的量)，然后，以水稀释至刻度，摇匀，使各溶液的pH从≤2开始逐步增加至12以上。测定各容量瓶中溶液的pH，先用pHl—14广范pH试纸粗略确定其pH，然后用精密pH试纸确定其较准确的pH。同时在分光光度计上用适宜之波长(例如510nm)、2cm比色皿、水为空白测定各溶液吸光度A。最后以pH值为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制A—pH曲线。并从此曲线上找出适宜的pH范围。
根据上面条件试验的结果，确定邻二氮杂菲分光光度法测定铁的分析步骤。 2．铁含量的测定：
(1)标准曲线的测绘：取50mL容量瓶(或比色管)6只，分别移取(务必准确量取，为什
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么?请讨论)10μg.mL铁标准溶液2.0、4.0、6.0、8.0和10.0mL于5只容量瓶中，另一容量瓶中不加铁标准溶液(配制空白溶液，作参比)。然后各加lmL 10％盐酸羟胺，摇匀，经2min后，再各加5mL的1mol.LNaAc溶液及3mL的0.1％邻二氮杂菲，以水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，用2cm比色皿，在最大吸收波长(510nm)处，测定各溶液的吸光度。以铁含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
(2)未知液中铁含量的测定：吸取5mL未知液代替标准溶液，其它实验步骤同上，测定吸光度。由未知液的吸光度在标准曲线上查出5mL未知液中的铁含量，然后以每毫升未知液中含铁多少微克表示结果。
注意：(1)、(2)两项的溶液配制和吸光度测定宜同时进行。
五、记录及分析结果
1．记录：
比色皿____ 光源电压_______
2．绘制曲线：
(1)吸收曲线；(2)A-t曲线；(3)A-c曲线；(4)标准曲线。
3．对各项测定结果进行分析并得出结论：例如从吸收曲线可得出：邻二氮杂菲亚铁配