20.00ml废水，摇匀。以下操作同上。
八、预习与思考题
1、为什么要测定化学需氧量？
2、重铬酸钾法测定化学需氧量的过程中，硫酸汞和硫酸—硫酸银各起什么作用？
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实验四 生化需氧量的测定
一、实验目的与要求
掌握差压法测定生化需氧量的原理和方法。
二、实验类型
验证性实验。
三、实验原理及说明
把水样或经过预处理的水样注入培养瓶内，同时放入二氧化碳吸收剂（NaOH），然后将培养瓶密封置于20±1℃的恒温箱内，在一定搅拌速度下对瓶内试样进行培养。由于好气微生物的反应，将消耗水中的氧气，呼出二氧化碳，如果及时用NaOH吸收生成的二氧化碳，培养瓶内上部空间的氧气不断地供给试样中微生物的需氧量，就造成气体氧分压的下降，用差压剂测出氧分压的下降量就可以测出水样的BOD。
四、实验仪器
1、实验仪器
序 号 1 2 3 4
2、实验药剂 ①NaOH。
名 称
差压式直读BOD测定装置 恒温生化培养箱
主要用途
利用压差测BOD
维持培养瓶中样品温度在20±1℃
5ml移液管 100ml量筒
移取少量液体 称量水样
五、实验内容和步骤
A.装置使用前检查方法：
1.灌水银：用注射针筒将装置中附带的水银分别装到八个水银瓶中。步骤为拧开水银瓶盖，用针筒分别小心的对八个水银瓶灌入3ml水银，在分别注入2ml蒸馏水以防水银蒸发。
2.调整水银压力计零点：用洗耳球将压力计的水银柱吸至满标尺，然后松开吸球让其自由下降，正常时水银柱下降至一定位置时应有回跳一两次的现象，显得较灵活。若水银柱下降较慢且平稳无回跳现象，可能水银中有杂物或水银中夹有气泡，应设法清除。对于水银中的气泡可用洗耳球将水银柱压入后反复多次吸上放下，直至将气泡排除为止，八条水银柱高低应基本一致且活动灵活。
3.检查搅拌机构：将装置中的附带电源变换器连接上测定装置并插上220伏交流电源，
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将装置前面的板动开关扳到接通位置，这时指示灯发亮，往一个培养瓶注入约400ml的水，再放入搅拌子一根，把该培养瓶逐一放到装置平面的八个凹位上，观看瓶内水的旋涡深度正常为1～2cm。 B.测定时操作步骤及方法：
1.提前2～3小时接通培养箱电源把箱温控制在20±1℃。
2.拧松测定装置的八个水银瓶盖，并用洗耳球检查水银柱，主要检查有没有气泡夹在水银柱中，水银柱活动灵活否；高低是否基本一致。 3. 检查搅拌机构运转情况，方法同前所述。 4. 把测定装置及经清洗晾干的培养瓶放入培养箱中。
5.被测样品应加热或冷冻到20℃左右，根据样品的具体情况如要稀释或接种，可在此时进行，样品pH控制在6.5～7.5之间。
6.初步估计被测样品的BOD范围或通过分析COD来了解大约的BOD，通过投水样量选择合适量程。
7.按所选择的量程的投水样准确量取样品投入培养瓶中，如需要接种或稀释的样品，用烧杯配好后再按投水量装瓶，同时对接种水作平行测定，这时可初估接种水的BOD范围按投水量表选择一个合适量程，然后按投水量投样测试。
8.往每个培养瓶内放入一根搅拌子，把3～5小片NaOH放入吸收杯中，并将吸收杯放在培养瓶瓶口上。
9.把培养瓶小心放在测定位置的凹位置上，同时轻扣上培养瓶盖但不要拧紧，并打开仪器开关。
10.待培养瓶放入培养箱40～60分钟后，估计培养瓶中样品温度已稳定在20±1℃时，先把培养瓶盖拧紧，然拧紧水银瓶盖。在拧水银瓶盖时速度要慢，力要均匀，避免出现打压现象，以造成水银瓶内压力增大。封完后马上对好标尺零点，将培养箱关好。 11.15～30分钟后应无明显变化。允许1～2格误差。如有明显变化说明封口时培养瓶中样品温度偏差20℃较大。这时应拧松培养瓶盖和水银瓶盖，再恒温一段时间样品温度达20℃时再拧紧。