实验一 分子生物学实验常用试剂配制
一、实验目的与要求
（1）了解分子生物学实验常用试剂配制方法； （2）掌握试剂配制的基本技能。 二、实验内容
分子生物学所用试剂必须是分析纯或分子生物学试剂级。溶液配制所用水尽可能使用灭菌、蒸馏、去离子的水。除非有特殊说明，大部分配制的溶液需用0.22μm孔径滤膜过滤除菌或者高压灭菌。使用高压灭菌的水、灭过菌的容器以及灭过菌的贮液来配制溶液，会延长所配溶液的使用时间。用干燥的化学试剂和无菌水配制的溶液一般不需要再灭菌；有些酸、碱和一些有机化合物也不需要灭菌，因为微生物不能在这些溶液中生长。制备的溶液应分为小份保存。如果没有特殊的说明，则所有的贮液和缓冲液至少能在室温下贮存6个月。作为贮存液应贮存在4℃或-20℃，使用时取出待达到室温后再开启，以防止试剂内的缩合作用，以确保度量精确。 三、常用试剂配制：
1、LB培养基（最常用的培养基，用于大肠杆菌的培养。添加氨苄青霉素的LB培养基长写作LA培养基） 将下列组分溶解在0.9L水中：
蛋白胨 10g、酵母提取物 5g、氯化钠 10g，用1mol/L NaOH调整pH至7.0，再补足水至1L。
ps：琼脂平板需添加琼脂粉15g/L。 2、氨苄青霉素（100mg/mL）
溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10mL。分装成小份于-20℃贮存。常以25μg/mL—50μg/mL的终浓度添加于生长培养基。 3、溶液Ⅰ（pH8.0）
葡萄糖 50mmol/L、Tris-HCl 25mmol/L 、EDTA 10mmol/L 4、溶液Ⅲ
5mol/L乙酸甲 60mL、冰醋酸 11.5mL、水 28.5mL 5、TE缓冲液（pH8.0）
10mmol/L Tris－HCl 、1mmol/L EDTA 6、0.5mol/L EDTA（pH8.0）
80mL水中加所需的EDTA-Na2和2gNaOH，再用5mol/LNaOH调pH8.0，待EDTA完全溶解后定容至100mL。 7、5×Tris-硼酸（TBE）缓冲液
Tris碱 54g/L、硼酸盐 27.5g/L、0.5mol/EDTA 20mL/L 8、氯仿：异戊醇（24:1） 10、10% SDS溶液：
11、TE缓冲液:10m mol/L Tris-HCl(Ph8.0),1m mol/L EDTA(Ph8.0),121℃高压灭菌20min，备用。 12、CTAB抽提液（灭菌）
13.70%的乙醇200ml 14.无菌水
15.1M Tris-Hcl（pH8.0）(200ml配方)如上方法配制 预习作业：
1、分子生物学实验中使用试剂有哪些要求。 2、配置试剂需要注意哪些细节以保证配置效果精确。 3、灭菌的方法与步骤。