植株全氮、全磷、全钾含量的测定(定1)-(1)
植株全氮、全磷、全钾的测定
一、待测液的制备（H2SO4—H2O2消煮法） 二、植株全氮的测定（H2SO4—H2O2消煮，蒸馏法） 三、植株全磷的测定（H2SO4—H2O2消煮，钒钼黄比色法） 四、植株全钾的测定（H2SO4—H2O2消煮，火焰光度法
一、待测液的制备（H2SO4—H2O2消煮法）
1 H2SO4—H2O2消煮原理
植物样品在浓H2SO4溶液中，经过脱水、碳化、氧化等一系列的作用后，易分解的有机物则分解，然后再加入H2O2 ，H2O2在热的浓H2SO4溶液中会分解出新生态氧，具有强烈的氧化作用，可继续分解没被H2SO4破坏的有机物，使有机态氮全部转化为无机铵盐。同时，样品中的有机磷也转化为无机磷酸盐，故可用同一消煮液分别测定N、P、K（植株中K以离子态存在）。 2 主要仪器：
万分之一电子天平、0.5 mm筛、三角瓶（50ml）或消煮管、移液管（5、10ml）+吸耳球、弯颈小漏斗、消煮炉、吸管、漏斗、无磷钾滤纸、容量瓶（100ml） 2 试剂：
浓硫酸（GB T625）：化学纯、比重1.84 30%H2O2（GB 6684）：阴凉处存放 3 操作步骤
称取烘干、磨细的植物样品(过0.5 mm筛)0.19g，置于50ml三角瓶（或消煮管）底部（勿将样品粘附在瓶颈上），加浓硫酸5mL，摇匀（最好放置过夜），瓶口盖一弯颈小漏斗，在电炉上先缓缓加热，待浓硫酸分解冒大量白烟时再升高温度（在消煮炉上先250℃消煮—温度稳定后计时，时间约30min，待浓硫酸分解冒大量白烟时再升高温度至400℃）。消煮至溶液呈均匀的棕黑色时，取下三角瓶，稍冷后提起弯颈漏斗，滴加30%H2O210滴，并不断摇动三角瓶。再加热(微沸)约7-10 min，取下，稍冷后重复滴加30%H2O2 5~10滴，再消煮。如此反复进行3-5次，每次添加的H2O2应逐次减少，消煮至溶液呈无色或清亮后，再加热5-10min（以赶尽剩余的H2O2 )，取下三角瓶冷却，用少量水冲洗漏斗，洗液流入三角瓶中。将消煮液无损地洗入100 ml容量瓶中，用水定容，摇匀。过滤或放置澄清后供氮、磷、钾测定。
二、植株全氮的测定（H2SO4—H2O2消煮，蒸馏法）
1、方法原理
蒸馏过程的反应：
（NH4)2SO4 + NaOH → Na2SO + 2NH3 + 2H2O
NH3 + H2O → NH4OH
NH4OH + H3BO3 → NH4·H2BO3 + H2O 滴定过程的反应：
NH4·H2BO3 + H2SO4 → （NH4)2SO4 + 2H3BO3 2、主要仪器、试剂
（1）主要仪器：万分之一电子天平、移液枪(2ml)、移液管（5、10ml）、三角瓶（50、150ml）、容量瓶（100、1000ml）、量筒、研钵、酸式滴定管、pH仪、定氮仪 （2）需用的试剂：
40%NaOH溶液（10mol/L氢氧化钠溶液）：称取40g氢氧化钠（GB 629分析纯）溶于100ml水中
硫酸（GB 625—77）：分析纯，0.005mol/L硫酸（将0.01mol/L硫酸标准溶液用水稀释一倍）或0.01mol/L盐酸标准溶液 0.02mol/L硫酸标准溶液：量取浓硫酸（C.R）2.83ml，加蒸馏水稀释至5000ml，此为0.02mol/L的（1/2H2SO4）标准溶液，然后用标准碱或硼砂标定之，将0.02mol/L的（1/2H2SO4）标准溶液用水稀释4倍。
硼酸—指示剂溶液：
2
硼酸-指示剂混合液：每升A溶液中加20ml B混合指示剂，并用稀碱调节至红紫色（pH值约4.5）。此液放置时间不宜过长，如在使用过程中pH值有变化，需随时用稀酸或稀碱调节之。
A 2％硼酸溶液：20g硼酸（GB 628-78分析纯）溶于1L约60℃去离子水中。
B 甲基红-溴甲酚绿混合指示剂：0.5g溴甲酚绿（HG 3-1220-79）和0.1g甲基红（HG 3-958 -76）于研钵中，加入少量95％乙醇，研磨至指示剂全部溶解后，加95％乙醇至 100ml。
pH4.5的水 3、测定步骤
在150ml三角瓶中，加入2％硼酸-指示剂混合液5ml，放在定氮仪冷凝管末端，管口置于硼酸液面以上3～4cm处。之后吸取待测液10.00 mL（含NH4-N约1mg）置于蒸馏器的定氮内室中，于定氮仪相应位置上，盖上具塞并密封使之不漏气。
然后从加液漏斗处向蒸馏室内缓缓加入20ml 10mol/L氢氧化钠溶液，立即关紧蒸汽发生器上排气口的旋钮，同时打开蒸汽发生器和定氮冷凝管连接橡皮管上的夹子。通入蒸汽蒸馏，蒸馏约15min左右，馏出液体积约50ml时，即蒸馏完毕。取下三角瓶，关闭蒸汽发生器和定氮冷凝管连接橡皮管上的夹子，并打开蒸汽发生器上排气口的旋钮。用少量已调节至pH4.5的水洗涤冷凝管的末端，取下三角瓶。之后，用气压差的原理，倒吸的方法洗蒸馏瓶中的废液，洗净蒸馏瓶。
用0.005 mol/L硫酸（或0.01mol/L盐酸）标准溶液滴定馏出液由蓝绿色至刚变为紫红色。记录所用酸标准溶液的体积（ml）。空白测定所用酸标准溶液的体积，一般不得超过0.4ml。 4、结果计算
植株中N（%）=（V1-V0）×C×14×D×10 ×100/m
式中： V1 ——样品测定所消耗标准酸mL数；
V0 ——空白试验所消耗标准酸mL数； C——标准酸（H）的浓度mol·L；· 14 ——氮原子的摩尔质量（g·mol）； 10 ——mL换算为L；
D——分取倍数，定容体积/分取体积，100/10 m ——干样品质量（g）。
5、注意事项
（1）碱液要过量。要求中和完硫酸后再过量2mL； （2）蒸馏装置不能漏气；
（3） 硼酸要足量。估算方法：按1mL浓度为10.0g·L的硼酸能吸收0.46mg的N计算； （4）指示剂和硼酸最好分开配置保存。因二者混合过久，有指示终点不明显的可能。 （5） 指示剂和硼酸的pH要调到4.5（变色点）。
（6）定氮仪参数设置中，加碱量设置为3S；定氮仪开机预热后，要多空蒸几次，等读数稳定后再进行样品测定。
三、植株全磷的测定（H2SO4—H2O2消煮，钒钼黄比色法）
1、方法原理
在酸性条件下，正磷酸能与偏钒酸和钼酸发生反应，形成黄色的三元杂多酸—钒钼磷酸。溶液黄色稳定，黄色的深浅与磷的含量成正相关，所以，可用比色法测定溶液中磷的含量。 2、主要仪器、试剂
（1）主要仪器：万分之一电子天平、电磁炉、移液管（1、5、10ml 2个）、吸耳球、容量瓶（50ml 8个、100、1000ml）、量筒
吸管、塑料瓶、棕色瓶、pH试纸、烘箱 722或723型分光光度比色计
（2）试剂
浓硝酸(分析纯)
0.2%二硝基酚指示剂（0.25g 2,6-二硝基酚或2,4-二硝基酚溶于100ml水中，其变色范围是pH 2.4（无色）—4.0（黄色），变色点是pH 3.1）
6mol/LNaOH溶液（24g NaOH(分析纯)溶于水，稀释至100ml）
3
-1
-3
+1
-1
-3
+