细胞膜的渗透性实验报告
一、 实验目的：
1． 了解细胞膜的渗透性
2 ．了解各种小分子物质跨膜进入红细胞的速度 二、 实验原理：
1. 细胞膜具有对物质选择透过的生理功能。脂溶性越高通透性越大，水溶性越高通透性越小；非极性分子比极性容易透过，小分子比大分子容易透过。水分子可通过由膜脂运动而产生的间隙。非极性的小分子如O2、CO2、N2可以很快透过脂双层，不带电荷的极性小分子，如尿素、甘油等也可以透过人工脂双层，尽管速度较慢，分子量略大一点的葡萄糖、蔗糖则很难透过，而膜对带电荷的物质如：H+、Na+、K+、Cl–、HCO3 –是高度不通透的。
2.hemolysis（溶血现象）：渗入红细胞的溶质能提高红细胞的渗透压，使水进入细胞，引起细胞吸水胀破；即红细胞膜破裂，血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为溶血现象。
3.isotonic solution（等渗溶液）：渗透压与血浆渗透压相等的溶液称为等渗 溶液。
4.Hypertonic solution（高渗溶液）：渗透压高于血浆渗透压的溶液称为高渗溶液。
5.Hypotonic solution（低渗溶液）：渗透压低于血浆渗透压的溶液称为低渗溶液。
6.semipermeable（半透性）：膜或膜状结构只允许溶剂(通常是水)或部分溶质(一般为小分子物质)透过，而不允许其他溶质(一般为大分子物质)透过的特性。
7.osmosis（渗透作用）：膜两侧溶液浓度存在差异，造成化学势能差，在势能差的驱动下，溶剂穿过对溶质不透膜的过程。 三、 实验材料及作用：
150 mmol/L NaCl , 蒸馏水，5 mmol/L NaCl，65 mmol/L NaCl，0.8 mol/L甲醇，0.8 mol/L乙醇，0.8 mol/L丙醇，0.8 mol/L乙二醇，0.8 mol/L丙三醇，2%Triton X-100，氯仿(三氯甲烷)。
1.NaCl的作用：将正常红细胞悬浮于不同浓度的NaCI溶液中：等渗溶液中的红细胞保持正常大小和双凹圆碟形；渗透压递减的一系列溶液中，红细胞逐步胀大并双侧凸起，当体积增加30%时成为球形；体积增加45%～60%则细胞膜损伤而发生溶血，这时血红蛋白逸出细胞外，仅留下一个双凹圆碟形细胞膜空壳，
称为血影细胞（ghost cell）。正常人的红细胞一般在0.42%NaCI溶液中时开始出 现溶血,在0.35%NaCI溶液中时完全溶血.
2.甲醇：小分子、亲脂性的非极性分子甲醇为低渗溶液，容易溶解于脂双层，并迅速透过，提高红细胞的渗透压，促使水分进入细胞，引起溶血。
3.乙醇：乙醇是脂溶性小分子，可以自由扩散进出细胞。红细胞外有相对高浓度的乙醇，大量乙醇分子顺浓度差进入红细胞，使红细胞内渗透压高于红细胞外渗透压，水通道开放，大量水分子进入红细胞，发生溶血。
4.丙醇，丙二醇，丙三醇的作用与甲醇，乙醇的作用相似，都是脂溶性分子，随着分子量的增加，分子的增大，溶血时间增加。
5.去垢剂是一些具有亲水的极性基团和疏水的非极性基团的长链分子。非离子型去垢剂如TritonX-100((聚乙二醇辛基苯基醚))可与脂双层形成混合微团，它们主要与蛋白质疏水部位相互作用，一般不会引起蛋白质变性。而离子型去垢剂与蛋白结合后可改变蛋白质结构，使之变性，尤其是加热后可使蛋白质解离为单体，如十二烷基磺酸钠（SDS）等。多种去污剂可以溶解细胞膜上的磷脂化合物，从而使细胞膜破裂，释放出细胞内物质。
6.氯仿：氯仿是很好的脂类萃取剂，不能够发生溶血现象。 四、
实验过程：
1.取新鲜羊血，加入适量抗凝剂备用 2.观察加入不同溶液之后的溶血现象。 3.渗透性计时比较 五、 试剂 变化 实验结果分析：
150 mmol/L NaCl 蒸馏水 1.蒸馏水和150 mmol/L NaCl： 不溶血，静置半小时后分溶血，溶液通体一色，红层，上层无色透明，下层色透明 红色不透明。 溶血时间 显微观察 —— 完整的红细胞 1s以内 无完整的红细胞，有絮状物质 结论：Na+和Cl-不能以自由扩散方式通过细胞膜，0.15mol/L NaCl不能导致溶血；而H2O可以很快地进入细胞内，使细胞膨胀溶血。 2.不同浓度的NaCl 试剂 变化
5 mmol/L NaCl 迅速溶血 65 mmol/L NaCl 溶血 150 mmol/L NaCl 不溶血，静置半小
时后分层，上层无色透明，下层红色不透明。 溶血时间 显微观察 5s 10s —— 无完整红细胞，絮无完整红细胞，有完整的红细胞 状物质，能看见少血影细胞 量血影细胞 结论：150 mmol/L NaCl溶液与羊血细胞是等渗溶液，所以不能溶血，5 mmol/L NaCl与65 mmol/L NaCl溶液为低渗溶液，能够是红细胞吸水涨裂。浓度越低，与细胞的渗透压相差越大，渗透作用越强，越容易发生溶血。
3.相同浓度的甲醇，乙醇，丙醇 试剂 变化 溶血时间 显微观察 0.8 mol/L甲醇 溶血 7s 0.8 mol/L乙醇 溶血 10s 0.8 mol/L丙醇 溶血 12s 无完整红细胞，有无完整红细胞，有 絮状沉淀，血影细絮状沉淀，血影细胞 胞 结论：血细胞在相同浓度的甲醇，乙醇，丙醇中都能溶血，但是时间不同，随着分子量的增加，分子增大，溶血时间增长，这说明溶血时间的长短不但与分子的极性有关，还与分子的大小有关。
4.相同浓度的丙醇，丙二醇，丙三醇 试剂 变化 溶血时间 显微观察 0.8 mol/L丙醇 溶血 12s 观察到血影细胞 0.8 mol/L丙二醇 溶血 20s 0.8 mol/L丙三醇 长时间放置后溶血 30min 无完整红细胞，可无完整红细胞，絮未溶血前，可观察状物质，可观察到到完整的红细胞，血影细胞 变小，30分钟后溶血，无完整红细胞 结论：丙醇，丙二醇，丙三醇都是极性分子，都能使红细胞溶血，但是丙三醇的分子较大，所以溶血时间较长。 5.2%Triton X-100，氯仿 试剂 变化 溶血时间
2%Triton X-100 快速溶血 6s 氯仿 不溶 ——