探究影响酶活性的因素
一、探究温度对酶活性的影响
（一）实验原理（注：市售a-淀粉酶的最适温度约600C）： 1．淀粉遇碘后，形成紫蓝色的复合物。
2．淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖，麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。 （二）方法步骤：
1、取3支试管，编上号（A、B、C），然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液； 2、另取3支试管，编上号（a、b、c），然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液；
3、将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组，A和a试管放入热水（约600C）、B和b放 入沸水，C和c放入冰块中，维持各自的温度5min； 思考题1、不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液，这是为什么？
4、分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中，摇匀后，维持各自的温度5min； 5、在3支试管中各滴入1-2滴碘液，摇匀后观察这3支试管中溶液颜色变化并记录； 思考题2、在试管A、B、C中分别能观察到什么现象？ 思考题3、通过上述实验，你能得出什么结论？
思考题4、在上述实验中，自变量是什么？无关变量是什么？
思考题5、探究温度对酶活性的影响实验中是否可以用斐林试剂来检验实验结果？ 为什么？
二、探究PH值对酶活性的影响
（一）实验原理：思考题6、请依据下面所列实验操作步骤，写出该实验的实验原理。
步骤顺序 肝脏研磨液 调节PH H2O2 实际现象 结论 思考题7、请在上表中填入你所观察到的实验现象。 思考题8、通过上述实验，你能得出什么结论？
思考题9、在上述实验中，自变量是什么？无关变量是什么？ 思考题10、在设计“影响酶活性的条件”实验中最关键的一步是什么？ 附加实验：思考题11、能否用淀粉酶探究PH对酶活性的影响？ 第一组 第二组 实验操作内容 步 骤 试管1 2滴 1ml蒸馏水 2ml 试管2 2滴 1ml HCl溶液 2ml 试管3 2滴 1ml NaOH溶液 2ml （二）操作步骤：用表格显示实验步骤：（注意操作顺序不能错）
第三组 试管3 2mL 试管3′ 1mL 试管1 注入等量的新 鲜淀粉酶溶液 注入等量的可 溶性淀粉溶液 2mL 试管1′ 1mL 试管2 2mL 试管2′ 1mL 1
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2 3 4 5 6 注入等量的不 同PH的溶液 60℃热水 中相等时间 试管混合 试管稍冷却后 加碘液 水浴50℃～65℃， 观察实验现象 5分钟 1mL 蒸馏水 5分钟 5分钟 1mL NaOH 5分钟 5分钟 1mL HCl 5分钟 1′倒入1 2滴 2′倒入2 2滴 3′倒入3 2滴 课堂练习：
1.（多选）在证明酶的催化作用受温度影响的实验时，有学生取两支试管分别将淀粉溶液与唾
液混合后，分别将试管放在冰水、沸水中5min后，待试管冷却后分别加入3滴碘液，结果 两支试管都变蓝，证明酶的催化作用需要适宜的温度。此实验的不足之处是 A．酶与淀粉不能在设置各自温度之前接触 B．缺少温度为37℃的对照实验 C．这两支试管都不应变蓝 D．不能用碘液检验是否存在淀粉 2.（多选）下图表示的是在最适温度下，反应物浓度对唾液淀粉酶所催化的化学反应速率的影 响。下列有关说法正确的是
A．若在A点时温度升高10℃，则反应速率加快 B．若在A点时温度升高10℃，则反应速率降低
C．若在B点时往混合物内加入少量唾液淀粉酶，则反应速率会加快 D．若在B点时往混合物内加入少量唾液淀粉酶，则反应速率不改变
3. 某学生为了验证唾液的功能，做了如下一组实验：取甲、乙两试管，分别加入等量的淀粉糊（2mL）， 甲试管又加入2mL唾液，两试管同时放入37℃的温水中保持10min后取出，各加入0.5mL碘液， 振荡，发现只有乙试管中呈现蓝色反应。此同学的实验程序中有一错误，请指出 A．乙试管应低温或室温 B．乙试管应加胃液
C．乙试管应加入与唾液等量的清水 D．应再加一支试管，内加些酸或碱 4.（多选）下图实验装置用于研究温度对凝乳酶催化乳汁凝固的 影响。先将酶和乳汁分别放入2个试管，然后将2试管放入同 一水浴（温度用T℃表示）中保温15min，再将酶和乳汁倒入同 一试管中混合，保温并记录凝乳所需要的时间。通过多次实验， 并记录在不同温度下凝乳所需要的时间，结果如下表。
装置 水浴温度T/℃ 凝乳时间/min A 10 不凝固 B 20 7.0 C 30 4.0 D 40 1.5 E 50 4.0 F 60 不凝固
关于该实验的下列叙述中，错误的是 ．．
A．该实验说明酶的活性受温度的影响，40℃左右是凝乳酶比较适宜的温度 B．将装置A内的混合物加温到40℃会发生乳汁凝固
C．可先将酶和乳汁倒入同一试管中混合，再保温并记录乳汁凝固所需要的时间 D．将F内混合物降温到40℃就会发生乳汁凝固
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探究影响酶活性的因素参考答案
思考题：
思考题1、防止混合时，由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发生变化，反应温度不是操作者所
要控制的温度，影响实验结果。
思考题2、试管A、B、C的现象分别是：不变蓝、变蓝、变蓝。 思考题3、温度会影响酶的活性。
思考题4、自变量是不同的温度；无关变量是可溶性淀粉溶液、新鲜淀粉酶溶液、碘液的量。 思考题5、不能；因为如用斐林试剂来检验实验结果，需加热煮沸，会使低温试管中也出现砖红色沉
淀，从而影响实验结果、结论。
思考题6、淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖，麦芽糖和葡萄糖是还原性糖，遇斐林试剂
煮沸的情况下会有砖红色沉淀。
思考题7、试管1、2、3的现象分别是：有砖红色沉淀，没有砖红色沉淀，没有砖红色沉淀 思考题8、溶液PH值会影响酶的活性。
思考题9、自变量是不同的PH值；无关变量是可溶性淀粉溶液、新鲜淀粉酶溶液、斐林试剂的量以
及用于调节PH的蒸馏水、氢氧化钠溶液、盐酸的量。
思考题10、在酶与反应底物接触前就应该用相应的自变量处理酶和反应底物。
思考题11、淀粉与碘的蓝色反应在pH=3~5的弱酸性环境下进行最灵敏，5
利用碘液来检测pH对淀粉酶活性的影响实验的实验现象：淀粉加入5% HCl后加入淀粉酶，经60℃保温反应，加入碘液后，呈现棕红色。在重复实验后发现甚至会呈现出红色、褐色，且与滴加淀粉酶的时间有关（即淀粉于HCl中存留时间有关）。这是由于淀粉及其水解产物都能与碘液发生反应，原理是碘分子嵌入淀粉螺旋体中，形成络合物。淀粉与碘生成的络合物的颜色与淀粉的聚合度或分子质量有关：一般来说①>60个葡萄糖单位时，显蓝色；②20个葡萄糖单位时，显红色；③<6个葡萄糖单位时，不能形成螺旋体，不显色。且淀粉在酸性条件下加热，也会发生自然水解，因此，上述实验中淀粉在HCl中存留的时间不同，显色也不一样。即使在强酸环境下，淀粉酶失活，淀粉也可能不与碘产生蓝色反应，而呈现出红色、褐色等，不能准确检测淀粉酶于该pH值下是否失活。
是否就能用斐林试剂作为检测试剂呢？答案也是否定的。斐林试剂的Cu（OH）2可与HCl产生中和作用，使斐林试剂失去鉴定作用。即使在酸性条件下淀粉酶具活性，使淀粉水解成还原糖，也检测不出来。
课堂练习： 1、AB
；2、BC；3、C 4、CD
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