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DMSO(细胞冻存)
简介:
随着实验室细胞培养的发展,除了原代培养之外,人工开发出来的细胞系的保存越来
越重要。冷冻保存细胞系的优点如下:1、减少基因漂移;2、减缓细胞系的衰老;3、稳定表型;4、减少微生物污染及交叉污染机会等。细胞冷冻的原理在于尽可能降低细胞内的晶体形成,减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤,从提高细胞复苏时的存活率。细胞冻存的数量应保证复苏时低温保护剂获得稀释,稀释后的细胞浓度扔高于正常传代的细胞浓度为宜,这是因为当低温保护剂稀释以后,该浓度一般不会对细胞造成毒性损伤。
Leagene DMSO(细胞冻存)是经典的细胞冻存液的成分之一,用于各种哺乳动物原代细胞、传代细胞系、杂交瘤细胞等的冻存,该溶液经无菌处理。
组成:
编号 名称 CC0118 Storage DMSO(细胞冻存) 使用说明书 50ml 1份 -20℃ 自备材料:
1、 细胞计数器 2、 细胞冻存管 3、 超低温冰箱或液氮 4、 超净工作台
操作步骤(仅供参考):
1、 培养细胞至对数生长晚期,显微镜观察其外观、形态、有无污染等,取状态良好的细胞
进行冻存操作。如为贴壁生长细胞,用胰蛋白酶消化并用完全培养基终止消化,进行细胞计数;如为悬浮生长细胞,进行细胞计数。 2、 离心,弃上清。
3、 一般按培养基:DMSO(细胞冻存)或者血清:培养基:DMSO(细胞冻存)等比例配制细
胞冻存液。重悬细胞,使细胞浓度达到/ml,置于冻存管中,密闭、不要拧的太紧,避免弯曲变形。
4、 一般进行冷冻。亦可采用-20℃ 30min,-70℃ 过夜,最后置于液氮罐中长期存储。
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注意事项:
1、 注意在超净工作台内无菌操作,尽量避免污染。
2、 初次使用融化后可在4℃保存1个月,但应减少反复冻融的次数,以免失效。 3、 杂交瘤细胞冻存时应定期复苏,检查细胞的活性和分泌抗体的稳定性。 4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 24个月有效。
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