生物制药工艺学习题离心技术

第十章 离心技术 一、填空:

1、制备型离心机的转子有转子、 转子、 转子。 2、密度梯度的制备方法有 、 、 、 3 、 。 二、选择题:

在离心分离过程中,若离心机的转速为4000转/分种,离心半径为10厘米,则相对离心力为 ( )

A. 1789(g) B. 4000(g) C. 8000(g) D. 2000(g) 三、名词解释: 1、相对离心力: 2、离心力: 3、沉降速度: 4、沉降系数: 四、问答题

1、试述等密度离心法及其特点。 2、试述差分离心法:

3、试述速度区带离心法及其特点。

4、密度梯度介质应具备哪些基本条件? 5 、影响沉降速度的因素有哪些? 6、简述螺旋卸料离心机的特点

7 、密度梯度离心常用的介质有哪几类 第十章 离心技术 (答案) 一、填空:

1、角度、 水平 、 垂直 、 区带。

2 、手工制备法 、 梯度混合仪制备法、 离心形成法 反复冻融法 3、 取代法、穿刺法、切割法、虹吸法。 二、选择题:

( A )

三、 名词解释:

1、答:由于各种离心机转子的半径或者离心管至旋转轴中心的距离不同,离心力而受变化,RCF就是实际离心场转化为重力加速度的倍数。

2、答:在一定角度速度下作圆周运动的任何物体都受到的向外的力。离心力(Fc)的大小等于离心加速度ω2r与颗粒质量m的乘积,即:F=mω2r

3、答:即在离心力作用下,物质粒子于单位时间内沿离心力方向移动的距离。 4、答:在单位离心力场中,颗粒的沉降速度谓之“沉降系数” 四、 问答题

1 、答:当不同颗粒存在密度差时,在离心力场下,颗粒或向下沉降,或向上浮起,一直沿梯度移动到与其密度恰好相等的位置上(即等密度点)形成区带,这种离心分离方法称为等密度离心法。

等密度离心法是根据颗粒的密度差异进行的离心分离的一种方法。 特点:

(1) 加样位置自由.

(2) 离心平衡后,区带的位置、形状、不受离心时间的影响。

(3) 梯度的密度范围包括样品所有组分颗粒的密度。 (4) 分离依据是密度,与颗粒大小形状无关。

(5) 离心力大小,组分颗粒的大小和形状,介质密度梯度的斜率和形状、黏度等影响离心时间和分辨率。

2、答:差分离心法亦称为“差速离心法”,是依据不同大小和密度的颗粒在离心力场中沉降速度的不同进行离心分离的一项技术。

过程是将样品溶液在一定离心力场中离心一定时间使颗粒大组分沉降于管底,上层液再用加大的离心力场离心一定时间,又可获得中等大小的组分。如此依次提高离心力,逐级分离出所需组分,故称其为差分离心法。

3 、答:概念:

在离心前于离心管内先装入连续或不连续的密度梯度介质(如蔗糖、甘油、KBr、CsCl等),待分离的样品铺在梯度液的顶部同梯度液一起离心,控制离心时间,使具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内形成一系列区带,达到各组份彼此分离的目的。 特点: (1) 样品在介质顶部。

(2) 最大介质密度必须小于样品中粒子的最小密度,即ρ>ρ0。样品溶液的密度<梯度密度最小值。

(3) 离心时间要严格控制,既要有足够的时间使各种粒子在介质梯度中形成区带,又要控制在所有粒子一起沉淀。如果离心时间过长,所有的样品可全部到达离心管底部;离心时间不足,样品还没有分离。 (4)分离依据是个组分之沉降系数。

(5) 分辨率受组分沉降系数,离心时间,颗粒扩散系数,介质黏度及梯度范围和形状的影响。 4 、答: (1) 梯度介质应自身密度大,且溶解度足够大,以便制作出密度范围大的密度梯度。

(2) 理化性质稳定,生物惰性;离子强度低,渗透压小,粘度小。

(3) 具某种可测性(如折射率)以测其浓度(密度),但不干扰分离组分的测定。

(4) 便于除去或回收。此外还有纯度,价格等因素。 5 、答:沉降速度的计算公式为

式中ω为角速度,x为离心半径,d为粒子的直径,η为离心介质的粘度,ρ0介质密度ρ粒子密度,υ为沉降速度。

从公式可知:粒子的沉降速度与ω2 ,x (ρ-ρ0) d2 成正比,而与η成反比。 6、答: 螺旋卸料离心机的重要特点是:

①料液浓度变化不影响分离效率,适应范围广,从1%的稀悬浮液到50%的浓悬浮液的分离都适用;②对固体颗粒大小适应范围广;③占地面积小,处理量大;④一般耐受压力为1.01×105Pa左右,特殊型号可耐受压力为1.05×106Pa,并可用于易燃、易爆及密闭的含有毒

物的操作场合;⑤对难于沉降的固体颗粒,可通过调节转鼓与螺旋的转速差来提高分离 效率;⑥可加入凝聚剂,令其与物料接触,以加快固体沉降作用。 7、答: (1)盐梯度介质;(2)小分子有机物如蔗糖;(3)三碘化苯衍生物;(4)有机高聚物;(5)胶态二氧化硅

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