实验一 淀粉糊化及酶法制备淀粉糖浆及其葡萄糖值的测定
一、实验原理及目的：
淀粉可用酶法、酸法和酸酶法使淀粉水解成糊精、低聚糖和葡萄糖。淀粉糖浆或称液体葡萄糖（DE38-42），主要成分是葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖和糊精，是一种粘稠液体，甜味温和，极易为人体直接吸收，在饼干，糖果生产上广为应用。
双酶法水解淀粉制淀粉糖浆，是先以α-淀粉酶使淀粉中的α-1，4甙键水解生成小分子糊精、低聚糖和少量葡萄糖，然后再用糖化酶将糊精、低聚糖中的α-1，6甙键和α-1，4甙键切断，最后生成葡萄糖。
淀粉糖浆的分析方法是根据国家标准GB12099-89，采用菲林滴定法测定淀粉水解产品的葡萄糖值（DE），例如DE值为42，表示淀粉糖浆中含42%的葡萄糖。
本实验的目的：
（1）通过实验，了解淀粉糊化及酶法制备淀粉糖浆的基本原理。 （2）掌握淀粉双酶法制备淀粉糖浆的实验方法，以及酶的使用。 （3）熟悉淀粉水解产品的葡萄糖值测定方法。
二、实验材料、试剂与仪器
材料：马铃薯淀粉。
试剂：液化型α-淀粉酶（酶活力6000单位/g），糖化酶（酶活力为4-5万单位/g），
菲林溶液A、B，亚甲基兰指示剂，D-葡萄糖标准溶液。
（1）碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜(CuS04·5H2O)及0.05g亚甲基蓝，溶于水中
并稀释至1000ml。
（2）碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g
亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。 （5）葡萄糖标准溶液：精密称取l.000g经过98~100℃干燥至恒量的纯葡萄糖，加水
溶解后加入5ml盐酸，并以水稀释至1000ml。此溶液每毫升相当于1mg葡萄糖。 仪器：150ml锥形瓶，容量瓶（100ml），移液管（1ml, 5ml, 20ml）， 25ml酸滴定管，
100ml量筒，搅拌棒，恒温水浴锅。
三、实验步骤
（一）淀粉糖浆的制备
10g淀粉置于150ml锥形瓶中，加水50ml，搅拌均匀，配成淀粉浆，于80℃水浴上加热，并不断搅拌，淀粉浆由开始糊化直到完全成糊，呈透明状，加入液化型α-淀粉酶8mg(先溶于15ml蒸馏水中，再倒入糊化的淀粉中),不断搅拌使其液化。并使温度保持在80℃（水浴）温度，搅拌20分钟，。然后将锥形瓶移至电炉（隔石棉网）加热到至沸，翻腾灭活2分钟。4000rpm离心10min，滤液冷却至55℃，加入糖化酶25mg， 于65℃恒温水浴中糖化40min，加热至沸，翻腾灭酶2min，即为淀粉糖浆。再取2ml,定容到100ml（即稀释50倍），作为样品液待用.
（二）DE值的测定
（1）标定碱性酒石酸铜溶液：吸取5.0ml碱性酒石酸铜甲液及5.0ml乙液，置于150ml
锥形瓶中，加水l0ml,从滴定管滴加约9ml葡萄糖标准溶液，放置在电炉上，控制在2min内加热至沸，在电炉上趁沸以每两秒l滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积，同时平行操作三份，取其平均值，计算每10ml(甲、乙液各5m1)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量(mg)。
（2）样品溶液预测：吸取5.0ml碱性酒石酸铜甲液及5.0ml乙液，置于150ml锥形瓶
中，加水10ml，在电炉上控制在2min内加热至沸，在电炉上趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以每两秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积。 （3）样品溶液测定：吸取5.0ml碱性酒石酸铜甲液及5.0ml乙液，置于150ml锥形瓶
中，加水10ml，从滴定管滴加比预测体积少1ml的样品溶液，使在两分钟内加热至沸，趁沸继续以每两秒一滴的速度滴定，直至蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积，同法平行操作三份，得出平均消耗体积。 DE?V葡m2??V样?100065100?100
式中：DE—样品中葡萄糖的含量，％；
V葡—标定碱性酒石酸铜溶液平均消耗葡萄糖标准液的体积，ml； V样—测定时平均消耗样品液的体积，m1； 65—稀释样品的体积，m1； 2—取2ml样品液定容；
m—样品质量，g 四、思考题
（1）为什么在测定DE值的整个滴定过程中，要保持沸腾，蒸汽始终充满烧瓶？
实验二、脂肪氧化及过氧化值、酸价的测定(滴定法)
一、实验原理及目的
实验原理：脂肪氧化的初级产物是氢过氧化物ROOH，因此通过测定脂肪中氢过氧化物的量，可以评价脂肪的氧化程度。同时脂肪氧化的初级产物ROOH可进—步分解，产生小分子的醛、酮、酸等，因此酸价也是评价脂肪变质程度的一个重要指标。本实验通过油脂在不同条件下贮藏，并定期测定其过氧化值和酸价，了解影响油脂氧化的主要因素。
实验中过氧化值的测定采用碘量法，即在酸性条件下，脂肪中的过氧化值与过量的KI反应生成I2，用Na2S2O3滴定生成的I2，求出每千克油中所含过氧化物的毫摩尔数，称为脂肪的过氧化值(POV)；酸价的测定是利用酸碱中和反应，测出脂肪中游离酸的含量。油脂的酸价以中和1g脂肪中游离酸所需消耗的氢氧化钾或氢氧化钠的毫克数表示。 实验目的：（1）测定油脂的过氧化值
（2）测定油脂的酸价
二、实验材料与试剂 (一)材料：油脂 (二)实验试剂
1. 0.0lmoL／L Na2S2O3: 称取2.6gNa2S2O3和0.02g碳酸钠，加适量新煮沸过的冷水溶解，
并稀释至1000 mL，放置一个月后过滤备用。
2. 氯仿-冰乙酸混合液：取氯仿40mL加冰乙酸60mL，混匀。
3. 饱和碘化钾溶液：取碘化钾14g，加水10mL，稍加热溶解，贮于棕色瓶中，如发现
溶液变黄，应重新配制。
4. 1％淀粉指示剂：0.5g淀粉加少量冷水调匀，再加一定量热水煮沸，冷却(最后体积
约为50mL)。现用现配。