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生物工程下游技术期末闭卷考试题库
一、选择题 （每题1分，共20分）
1、在发酵液中常加入 B ，以除去发酵液中的钙离子。
A. 硫酸 B. 草酸 C. 盐酸 D. 硝酸 2、在发酵液中加入草酸，其作用是 ABCD 。
A. 去除钙离子 B. 去除部分镁离子 C. 改善发酵液的过滤性能 D. 有助于目标产物转入液相。
3、在发酵液中加入三聚磷酸钠，它和 B 形成可溶性络合物，可消除对离子交换的影响。
2+2+2+3+
A. Ca B. Mg C.Zn D. Fe
4、环丝氨酸的发酵液中，加入磷酸盐的主要目的是去除 AD 。
2+3+2+2+
A. Ca B. Fe C. Zn D. Mg
5、在发酵液中加入黄血盐，可去除 C ，使其形成普鲁士蓝沉淀。
2+2+3+2+
A. Ca B. Zn C. Fe D. Mg 6、发酵液中，细胞絮凝机理是 A 。
A. 胶体理论 B. 高聚物架桥理论 C. 双电层理论 D. 盐析理论
7、在生物产品分离中， C 技术可代替或改善离心和过滤方法，富集或除去发酵液中的细胞或细胞碎片。
A. 凝聚 B. 双水相萃取 C. 絮凝 D. 色谱 8、高压匀浆法提高细胞破碎率的方法有 ABC 。
A. 适当地增加压力 B. 增加通过匀浆器的次数 C. 适当地增加温度 D. 提高搅拌器的转速 9、下列 AB 可采用高压匀浆法进行细胞破碎。
A. 大多数细菌 B. 酵母 C. 放线菌和霉菌 D.包涵体 10、珠磨法提高细胞破碎率的方法有 BCD 。
A. 适当的增加压力 B. 增加装珠量 C. 延长破碎时间 D. 提高转速 11、下列 ABCD 可采用珠磨法进行细胞破碎。
A. 大多数细菌 B. 酵母菌 C. 放线菌和霉菌 D. 含有亚细胞器（如包涵体）的微生物细胞
12、下列 AC 可采用渗透压冲击法进行破碎。
A. 动物细胞 B. 酵母菌 C. 革兰氏阴性细菌 D. 革兰阳性细菌 13、下列 AC 可采用冷冻－融化法进行破碎。
A. 动物细胞 B. 酵母菌 C. 革兰氏阴性细菌 D. 革兰阳性细菌 14、下列 C 可采用EDTA法进行破壁。
A. 动物细胞 B. 酵母菌 C. 革兰氏阴性细菌 D. 革兰阳性细菌 15、关于用化学渗透法破壁的优点，下列说法正确的是 ABC 。
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A. 对产物释放具有一定的选择性 B. 细胞外形保持完整、碎片少，有利于后分离
C. 核酸释出量少，浆液粘度低，可简化后处理步骤 D. 化学试剂不影响产物活性 16、化学萃取中，通常用煤油、已烷、四氯化碳和苯等有机溶剂溶解萃取剂，改善萃取相的物理性质，此时的有机溶剂称为 B 。
A. 改良剂 B. 稀释剂 C. 助溶剂 D. 带溶剂
17、根据萃取目标产物的 A ，寻找极性相接近的溶剂作为萃取溶剂，是溶剂选择的重要方法之一。
A. 介电常数 B. 表面特性系数 C. 波尔兹曼常数 D. 活度系数 18、在溶剂萃取中，在水相中加入无机盐，其目的是 ABC 。
A. 由于盐析作用，使产物在水中的溶解度下降，而有利于转入有机相 B. 增加两相间密度差，减少有机溶剂和水之间的互溶度 C. 减轻乳化现象，使其容易分离 D. 沉淀杂质
19、在溶剂萃取中，乳化现象产生的原因是 C 。
A. 料液pH B. 料液中的无机盐 C. 料液中的蛋白质和固体颗粒 D. 有机溶剂过量
20、关于pH对双水相萃取的影响，下列正确的是 ABC 。
A. 影响蛋白质解离度，改变蛋白质的表面电荷数
B. 影响缓冲物质磷酸盐的解离程度，从而影响相间的电位差 C. 改变蛋白质的结构和性质，影响蛋白质分配系数
D. 实际上对于许多蛋白质而言，相间电位为零时，分配系数不受pH影响 二、填空题（每空1分，共20分）
1、电泳分离胶通常分为_______________胶和___________________胶两种。
答案：均一、梯度
2、机械破碎细胞主要有__________________法、___________________-法、___________________法和_______________________法等方法。
答案：珠磨, 高压匀浆, 超声波, 微波
3、珠磨法适用于绝大多数微生物破碎，特别适用于________________和一些有_________________的微生物细胞。
答案：丝状菌、亚细胞器
4、______________________法是各种细胞破碎方法中最温和的。
答案：渗透压冲击
5、__________________________法是将浓缩的菌体悬浮液冷却至－25℃形成冰晶体，利用500MPa以上的高压冲击，使冷冻细胞从高压阀小孔中挤出。使包埋在冰中的微生物变形而引起细胞破碎。
答案：X－press 6、在进行细胞破碎时，___________________法对于存在于细胞质并靠近细胞膜的胞内产物释放效果较好。
答案：冷冻－融化
7、碱处理法破碎细胞的同时，也有利于_____________________的释放。
答案：两性物质
8、_________________和_________________等变性剂，可使细胞破裂。
答案：盐酸胍, 脲
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9、___________________法是利用生物酶反应，分解破坏细胞壁上的特殊化学键而达到破壁的目的。
答案：酶溶
10、在溶剂萃取中，被提取的溶液被称为__________，其中欲提取的物质被称为_____________，用以进行萃取的溶剂被称为_______________；经接触分离后，大部分溶质转移到萃取液中，得到的溶液称为_____________，而被萃取出溶质的料液称为___________________。
答案：料液、溶质、萃取剂、萃取液、萃余液 三、名词解释（每空2分，共20分）
1、生物工程下游技术：指从动、植物细胞或组织培养液，或微生物发酵液中分离、纯化生物产品的过程中所采用的方法和手段的总称。 2、冷冻－融化法：是将细胞放在低温下突然冷冻而在室温下缓慢融化，使细胞破碎的方法。 3、X－press法：是将浓缩的菌体悬浮液冷却至－25℃形成冰晶体，利用500MPa以上的高压冲击，使冷冻细胞从高压阀小孔中挤出，由于冰晶体的磨损使包埋在冰中的微生物变形，导致细胞破碎。
4、化学渗透破壁法：某些有机溶剂、抗生素、表面活性剂、金属螯合剂、变性剂等化学药品都可以改变细胞壁或膜的通透性，从而使内含物有选择地渗透出来，这种处理方式称为化学渗透法。
5、分配系数：在恒温恒压条件下，溶质分配在两个互不相溶的溶剂中，达到平衡时溶质在两相中的活度之比为一常数K，这个常数称为分配系数。
6、结晶的二次成核：向介稳态过饱和溶液中加入晶种，会有新晶核产生，这种现象称为二次成核。 7、等电点沉淀：利用两性物质在pH等于其等电点的溶液中溶解度最小的原理进行沉淀分级的方法称为等电点沉淀。
8、反相色谱：是利用表面非极性的反相介质为固定相，极性有机溶剂的水溶液为流动相，是根据溶质极性（疏水性）的差别进行分离纯化的液相色谱技术。
9、凝胶极化：在膜过滤过程中，当膜表面浓度超过溶质的溶解度时，溶质会析出形成凝胶层，这种现象称为凝胶极化。
10、膜污染：是由于固体粒子或料液中某些溶质在膜面或膜孔内吸附、沉积，造成膜孔径变小或堵塞，使膜通量大幅度降低，分离性能变差，目标产物的回收率下降的现象。
四、简答题（每题8分，共40分）
1、生物工程下游技术按生产过程划分几个阶段？各阶段的任务是什么？
答：①发酵液预处理、固液分离、细胞破碎：除去发酵液中的不溶性固形物杂质和分离菌体细胞；分离胞内产物，收集细胞后进行细胞的破碎和细胞碎片分离。②提取：除去与产物性质差异较大的杂质。③浓缩：主要去除水分，提高产物浓度。④纯化：去除与产物的物理化学性质比较接近的杂质。⑤成品化：根据质量标准和产品剂型制作产品。
2、超临界CO2破碎细胞技术的原理。
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