【金版学案】人教版高中生物选修1习题 专题2 微生物的培养与应用 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

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课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

一、筛选菌株 1.原理

人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。

2.途径

用选择培养基筛选。

在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称为选择培养基。用其培养的目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。

二、统计菌落数目的方法和注意事项 1.常用方法:稀释涂布平板法 (1)统计依据:

①当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。

②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。 (2)计算公式:每克样品中的菌株数=(C÷V)×M。

C:代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数。 V:代表涂布平板时所用的稀释液的体积。 M:代表稀释倍数。

(3)注意事项:

①一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。 ②统计菌落数往往比活菌的实际数目低。 ③统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。

④设置对照:目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信

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度。

2.计数方法

利用显微镜直接计数。 三、实验设计 1.土壤取样

从富含有机质、酸碱度接近中性的潮湿土壤中取样。取样时,一般要铲去表层土,在距地表的3~8 cm的土壤层取样。

2.样品的稀释

样品的稀释度直接影响平板上生长的菌落数目,选用一定稀释范围的样品液进行培养,保证菌落数在30~300之间,便于计数。

3.细菌的培养与观察

将培养基平板倒置于30~37 ℃温室中培养1~2 d,每隔24_h统计一次菌落数目,最后选取数目稳定时的记录作为结果。

4.细菌的计数

当菌落数目稳定时,选取菌落数在30~300的平板进行计数。在同一稀释度下,至少对3个平板进行重复计数,然后求出平均值,并根据平板所对应的稀释度计算出样品中的细菌数目。

一、选择题

1.下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是(A)

A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水 B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水 C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水

D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水

解析:能选择出分解尿素的细菌的培养基必须是以尿素为唯一氮源,B、D不符合。C没

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有有机碳源,分解尿素的微生物不能正常生长。

2.从土壤中分离能分解尿素的细菌,可以利用选择培养基,其成分中一定有(A) ①尿素 ②有机氮化物 ③无机盐 ④有机碳化物 ⑤水 ⑥无机碳化物 A.①③④⑤ B.②③④⑤ C.①③⑤⑥ D.②③⑤⑥

解析:分离能分解尿素的细菌,故培养基中一定有尿素,一定没有有机氮化物;另外,水、无机盐和碳源、能源也是细菌生长所必不可少的。有机碳在这里既是碳源又是能源,因为分解尿素的细菌是异养微生物,不能利用无机碳化物。

3.关于土壤取样的叙述错误的是(C) A.土壤取样,应选取肥沃、湿润的土壤 B.先铲去表层土3 cm左右,再取样 C.取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌 D.应在火焰旁称取土壤

4.取少量酵母菌液放入血球计数板直接记数,测得的数目是(D) A.活细胞数 B.死细胞数 C.菌落数 D.细胞总数

解析:显微镜直接计数法的缺点就是不能区分活菌和死菌。

5.在做分离分解尿素的细菌实验时,A同学从对应10培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只筛选出大约50个菌落。A同学的结果产生原因可能有(A)

①由于土样不同 ②由于培养基被污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照 A.①②③ B.②③④ C.①③④ D.①②④ 6.下列关于统计菌落数目的方法的叙述,不正确的是(C) A.采用平板计数法获得的菌落数往往少于实际的活菌数 B.当样品的稀释度足够高时,一个活菌会形成一个菌落 C.为了保证结果准确,一般采用密度较大的平板进行计数

D.在某一浓度下涂布三个平板,若三个平板统计的菌落数差别不大,则应以它们的平均值作为统计结果

解析:当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。一般选择菌落数在30~300的平板进行计数,密度过大会使计数结果偏小,影响结果的准确性。涂布三个平板,作为重复组,取其平均值作为统计结果能

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