实验项目名称:
菠菜中色素的提取实验预习报告
一、 实验目的
1 `通过绿色植物色素的提取和分离,了解天然物质分离提纯方法,加强有机物分离提纯技术的训练。 2` 了解和掌握薄层色谱的基本原理,掌握薄层色谱的基本操作 3 `了解薄层色谱在有机物分离中的应用。 二、实验基本原理(或主、副反应式)
菠菜的叶片中含有叶绿素(包括叶绿素a和叶绿素b)、叶黄素及胡萝卜素等天然色素。 叶绿素是绿色植物的主要色素,分子由脱镁叶绿素母环、叶绿酸、叶绿醇、甲醇、二价镁离子等部分构成。高等植物中有两种叶绿素即叶绿素a和叶绿素b共存,叶绿素a为一蓝黑色固体粉末,在乙醇溶液中为蓝绿色,并有深红色荧光。而叶绿素b为暗绿色固体粉末,其乙醇溶液为黄绿色,并有红色荧光。叶绿素不溶于水,易溶于有机溶剂,常可用极性有机溶剂,例如丙酮、乙醇、乙酸乙酯等。从植物匀浆中提取它。叶绿素存在于植物细胞的叶绿体中,与类胡萝卜素、类脂物质及脂蛋白复合在一起,分布在叶绿体内的蝶形体的片层膜上。胡萝卜素是一种橙色的天然色素,属于四萜类,为一长链共轭多烯。有α、β、γ三种异构体,其中β异构体最多。叶黄素是一种黄色色素,与叶绿素同存在与植物体内,是胡萝卜素的羟基衍生物,较易溶于乙醇,在石油醚中溶解度较小。根
据它们的化学特性,可将它们从植物叶片中提取出来,并通过萃取、沉淀和色谱方法将它们分离出来。 色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能的不同,或和其它亲和作用性能的差异,使混合物的溶液流经该种物质,进行反复的吸附或分配等作用,从而将各组份分开。 薄层层析是一种微量、快速和简便的色谱方法。由于各种化合物的极性不同,吸附能力不相同,在展开剂上移动,进行不同程度的解析,根据原点至斑点中心及展开剂前沿的距离,计算比移值。 化合物的吸附能力与它们的极性成正比,具有较大极性的化合物吸附较强。在给定的条件下(吸附剂、展开剂、板层厚度等),化合物移动的距离和展开剂移动的距离之比是一定的,即Rf值是化合物的物理常数,其大小只与化合物本身的结构有关,因此可以根据Rf值鉴别化合物。
三、实验主要试剂及主、副产物的物理常数(列举实验所涉及的主要物质与试剂需要的物理常数就可以)
物质名称 分子量 性状 相对密度 相对密度(水=1):0.64~0.66相对蒸气密度(空气=1):2.50 熔沸点 溶解度 使用注意事项 备注 石油醚 无色透明液体,有煤油气味。 熔点(℃):<-73 不溶于水,溶于沸点(℃):40~无水乙80 醇、苯、氯仿、油类等多数有机溶剂 密闭操作,全面通风远离火种、热源,工作场所严禁吸烟。使用防爆型的通风系统和设备。防止蒸气泄漏到工作场所空气中。避免与氧化剂接触。 其蒸气或雾对眼睛、粘膜和呼吸道有刺激性对环境有危害,对水体、土壤和大气可造成污染该品极度易燃,具强刺激性 乙醇 46.07 无色透明液体(纯酒精),有特殊香味的气,密度比水小味,易挥发有酒的气味和刺激性辛辣味 相对密度能与水、C (水=1): 点:-114.3 °氯仿、乙0.79 醚、甲醇、沸点:78.4 °C 丙酮和其相对蒸气他多数有密度(空机溶剂混气=1): 溶. 1.59 熔1、应使用火柴点燃,否则容易使酒精灯内的酒精燃烧。2、使用完毕后,应用灯帽将火盖灭。3、如不慎将酒精洒出并引燃,则应用湿抹布将其盖灭。 易燃,其蒸气与空气可形成爆炸性混合物。遇明火、高热能引起燃烧爆炸。与氧化剂接触发生化学反应或引起燃烧。在火场中,受热的容器有爆炸的危险。其蒸气比空气重,能在较低处扩散到相当远的地方,遇明火会引着回燃。 羧甲基纤 维素(CMC) 外观为白色 或微黄色絮状纤维粉末或白色粉末,无嗅无味,无毒 易溶于冷 水或热水不溶于乙醇、乙醚、异丙醇、丙酮等有机溶剂 羧甲基纤维素可形成高粘度的胶体、溶液、有粘着、增稠、流动、乳化分散、赋形、保水、保护胶体、薄膜成型、耐酸、耐盐、悬浊等特性,且生理无害,因此在食品、医药、日化、石油、造纸、纺织、建筑等领域生产中得到广泛应用。 丙酮 58.08 无色液体,具有令人愉快的气味(辛辣甜味)。易挥发。 相对密度(水=1):0.80 相对蒸气密度(空气=1):2.00 熔点:-94.7℃。 沸点:56.5℃ 与水混溶,可混溶于乙醇、乙醚、氯仿、油类、烃类等多数有机溶剂。[ NaCl 58.44 无色透明的立方晶体,粉末为白色,味咸 相对密度m^3 :2.130g/c熔点:801℃ [沸点:1413℃ 密闭操作,全面通风。操作人员必须经过专门培训,远离火种、热源,工作场所严禁吸烟。使用防爆型的通风系统和设备。防止蒸气泄漏到工作场所空气中。避免与氧化剂、还原剂、碱类接触。 储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。库温不宜超过26℃。保持容器密封。应与氧化剂、还原剂、碱类分开存放,切忌混储。采用防爆型照明、通风设施。禁止使用易产生火花的机械设备和工具。储区应备有泄漏应急处理设备和合适的收容材料 常温(25℃)下每100g可溶解约36.2g 应储存于阴凉、常温避光、通风干燥处,可以垛放,防止雨淋、不得与酸碱混存、垛底要铺放木板,用以防潮,垛放高度不超过两米。[ 无机物和有机物工业用作制造氯气、氢气、盐酸、纯碱、烧碱、氯酸盐、次氯酸盐、漂白粉、金属钠的原料、冷冻系统的致冷剂,钢铁工业用作热处理剂。高度精制的氯化钠用作生理盐水。日常生活中,用于调味等。此外、还用于医学,玻璃、染料、冶金等工业 主要用于有机溶剂的干燥除水,有除水效果快、残留少等特点。 还可用作印花丝织物精炼时的底色保护剂等。造纸工业用作制造硫酸盐纸浆时的蒸煮剂。医药工业用作钡盐中毒时的解毒 无水硫酸钠 142.04 白色均匀细 颗粒或粉末。无嗅,味咸而带苦。 熔点884℃ 沸点:1700℃ 易溶于水溶于甘油,不溶于乙醇 剂.此外,还用于玻璃、建筑工业等方面。 五、实验简单操作步骤
1、制板 将硅胶加0.8%CMC溶液,调成浆状,将其余涂在载玻片上,并使其平坦,放在干净平坦的台面上,晾干之后放入105 ℃
烘箱活化1h,取出放入干燥器内待用。
2、 叶绿素的提取 在研钵中放入几片菠菜叶。加入10mL2:1石油醚和乙醇混合液,适当研磨。将提取液用滴管移至分液漏斗中,加入 10mL 饱和 NaCl溶液 除去水溶性物质,分去水层 ,再用蒸馏水洗涤两次 。将有机层干燥的小锥形瓶中,加入 无水硫酸钠 干燥。干燥后的液体倾至另一锥形瓶中。
3、点样 用一根内径1mm的毛细管,吸取适量提取液,轻轻地点在距薄板一端1cm处,平行点两点,两点相距1cm 左右。可多点几次,但点样斑点直径不得超过2mm.
4、展开 先在展开槽中放入展开剂,加盖使缸内蒸气饱和10min,再将薄层板斜靠于展开槽内壁。点样端家畜展开剂但样点不能浸没于展开剂中,密闭展开槽。待展开剂上升到距薄层板另一端约1cm时,取出平放,用铅笔或小针划前沿线位置,晾干薄层板。
5、分离 如需提取色素,可分别将不同组分的薄层板硅胶小心挂下,收集同组分的硅胶于小锥形瓶中,用有机溶剂浸泡后,将硅胶过滤掉。有机溶剂蒸干即可得到不同组分的色素。
六 、实验注意事项
1.过滤时不能用滤纸,而是用脱脂棉。原因是滤纸能吸收色素,降低滤液中色素的含量,使实验效果不明显。 2.加入丙酮后要迅速、充分研磨,以防止丙酮挥发,使更多的色素溶解在丙酮中。
3.萃取过程中注意操作,防止溶液喷出。制备薄层板过程中注意基板的质量,防止玻璃边缘伤及手指。 4.牢记有机化学实验常规安全防范和急救措施。
姓名:胡嘉伟 班级: 给排水121 班 时间:2013年3月19日