XXX化妆品有限公司 文件编号 版 次 页 码 RY-SOP-PG-91 A/0 第 1 页 共 3 页 沉降菌检测作业规程 ? 1、目的
规范洁净区和洁净室沉降菌测试条件和测试方法。 ? 2、适用范围
适用于公司洁净区、洁净室或局部空气净化区域（如：洁净工作台）的沉降菌的测试和环境验证。 ? 3、引用文件
? 化妆品卫生规范-2007
? GB/T 16294-2010 医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法 ? 4、定义
? 4.1 沉降菌：用本测试规定的方法收集空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的生长条件
下繁殖的可见菌落数。
? 4.2 沉降菌菌落数：规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以（个/皿）表示 ? 5、仪器和设备
? 5.1 灭菌培养皿 90mm *15mm ? 5.2 培养基。 ? 5.3 恒温培养箱。 ? 5.4 高压灭菌器。 ? 5.5 放大镜 ? 6、培养基和试剂
? 6.1 生理盐水：
成份﹕氯化钠 8.5g 蒸馏水加至 1000ml
制法﹕溶解后﹐分装到加玻璃珠的三角瓶内﹐每瓶90ml﹐121℃（15 1b）2 0 min，高压灭菌。
? 6.2 卵磷脂、吐温 80—营养琼脂培养基
6.2.1 成分： 蛋白胨
20g
牛肉膏 3g
作成 日期 审核 日期 批准 日期 File Name: 沉降菌检测操作规程
氯化钠 琼脂 卵磷脂 吐温
5g 15g 1g 80 7g
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蒸馏水 1000mL
6.2.2制法：先将卵磷脂加到少量蒸馏水中，加热溶解，加入吐温 80，将其他成分（除琼脂外） 加到
其余的蒸馏水中， 溶解。 加入已溶解的卵磷脂、 ? 吐温 80， 混匀， 调 pH 值为 7.1～7.4，加入琼脂，103.43kPa（121℃ 15 lb）20min 高压灭菌，储存于冷暗处备用。
? 7、操作步骤
? 7.1 取样：
7.1.1 取样点的设置：
A) 最少取样点数：灌装间、制造间3个，其他洁净区2 个；
B) 取样点的位置：取样点应均匀分布在待测试区域内，一般离地高度为0.8m左右，关键设备处可增加取样点；
C）每个取样点一般取样一次，每次一般为2个取样皿； D) 布置采样点时，应避免回风口；
7.1.2 取样时间：可采用动态取样和静态取样：
A) 动态取样：正常生产，且空气净化系统正常运转30分钟后开始取样；
B）静态取样：员工己撤离生产区域，且空气净化系统正常运转至少20分钟后；静态取样时人员
不得多于2人；
7.1.3 取样
A）将制备好的培养皿逐个放置到采样点，然后从里到外逐个打开培养皿盖，使培养皿暴露在空气
中；
B）静态测试时，培养皿的暴露时间为30分钟以上；动态测试时，培养皿的暴露时间不得大于4
个小时
? 7.2 置于37±1℃恒温培养箱内培养至少48小时，记录每个平皿的菌落数； ? 8、菌落计数方法：
? 8.1先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放大 5 倍～10 倍的放大镜检查，以防遗漏； ? 每个测点的沉降菌总数为该测点所有培养皿菌落数的平均数； ? 9、结果评定：
? 9.1 每个测点的菌落数必需低于该洁净区的标准时判定符合要求；
? 9.2 静态测试时，如某测点的的菌落平均数超过标准，应再重新取样两次，两次都低于标准时才能判
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定符合；。
? 10、日常监控
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当出现以下情况时，应额外增加检测频次：
? 长时间停工区域，预期开始使用时； ? 净化区域内发现有污染存在时；
? 在生产期间，空气净化系统进行任何重大的维修时； ? 当洁净室（区）结构或区域分布有重大变动时； ? 当生产设备有重大维修或增加设备时； ? 日常操作记录反映出倾向性数据时。 ? 附表