·药品鉴定·
2011年9月第8卷第27期
高效液相色谱法测定维生素C注射液含量
刘国如，刘永锁，陈振玲，王伟，丰廷宗，周毓瑾
中国民用航空局民用航空医学中心（民航总医院），北京
100023
[摘要]目的：建立高效液相色谱法测定维生素C注射液中维生素C含量的方法。方法：采用Phenomenexluna-NH2分析色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），流动相为磷酸二氢钾缓冲液-乙腈（1∶1，磷酸调至pH3.0）；流速：1.0ml/min；检测波长：245nm。结果：维生素C的线性回归方程为Y=29560X-21310（r=0.9995），线性范围为5～30μg/ml，平均回收率为98.30%（n=9，RSD为2.1%）。结论：该方法操作简便，结果准确，可用于测定维生素C注射液中维生素C的含 量。
[关键词]高效液相色谱法；维生素C注射液；维生素C；含量测定[中图分类号]R917[文献标识码]A[文章编号]1673-7210（2011）09（c）-050-02
DeterminationofVitaminCInjectionbyHPLC
LIUGuoru,LIUYongsuo,CHENZhenling,WANGWei,FENGTingzong,ZHOUYujin CivilAviationMedicineCentre(CivilAviationGeneralHospital),CAAC,Beijing100023,China
[Abstract]Objective:TodevelopaquantitativemethodforthedeterminationofVitaminCinVitaminCInjection.Methods:Phenomenexluna-NH2column(4.6mm×250mm,5μm)wasusedaschromatographiccolumn,amixtureofacetonitrileanddibasicpotassiumphosphatebuffersolution(1∶1,v/v)wasusedasmobilephase,whichwasadjustedtopH3.0byphosphoricacid,andthedetectionwavelengthwasat245nmwithaflowrateof1.0ml/min.Results:TheregressionequationwasY=29560X-21310(r=0.9995),whichwaslinearoverarangefrom5μg/mlto30μg/ml.Theaveragerecoverywas98.30%(n=9,RSD=2.1%).Conclusion:Thismethodissensitive,rapidandaccurate,whichiscanbeusedfordeterminationofVitaminCinVitaminCInjection.[Keywords]HPLC;VitaminCInjection;VitaminC;Determination
维生素C在临床上不仅用于心血管系统、消化系统疾病的辅助治疗，而且在眼科、口腔科和外科系统疾病的药物治疗中也十分常用[1]。维生素C注射液的pH偏酸性，且具有较强的还原性，在某些条件下氧化型结构和还原型结构可以互变，但是它们均有生物活性，氧化剂、光及金属离子等，均可加速其失效[2]。因此，加入抗氧化剂、温度为25℃、pH为5.6～6.0时，维生素C注射液在此条件下最为稳定[3]。维生素C注射剂含量的测定方法有很多，例如，滴定分析法
[4]、分光光度法[5]、荧光法[6]、电极法[7]等，常见的滴定法存在滴定终点难以准确判断，分光光度法操作耗时。因此，本研究以维生素C注射液为研究对象，建立维生素C含量测定的高效液相色谱法。 1仪器与试剂
度≥99.5%）；去离子水（由超纯水仪Millipore纯水系统制备）。其余试剂均为色谱纯。
2方法与结果2.1色谱条件
色谱柱为Phenomenexluna氨基柱（4.6mm×250mm，5μm）；流动相为磷酸二氢钾液和乙腈的混合液（体积比1∶1），浓度为0.02mol/L，pH由磷酸调至3.0；柱温为25℃；系统流速为1.0ml/min；检测波长为245nm。2.2标准曲线的制备 精密称取0.10g维生素C对照品，用流动相溶液溶解并定容至100ml，得1mg/ml的储备液，避光保存。稀释储备液得浓度分别为5、10、15、20、25、30μg/ml的溶液，用0.45μm滤膜过滤，进行HPLC色谱分析。以维生素C对照品峰面积（Y）对相应的浓度（X）进行线性回归，从而得到维生素C的标准曲线方程为：Y=29560X-21310（r=0.9995，n=6）。2.3精密度试验
取维生素C标准曲线项下低（10μg/ml）、中（20μg/ml）、高（30μg/ml）三种浓度，日内精密度分别连续进样5次；日间精密度分别于第1、3、5天测定，各进样5次。结果维生素C三种浓度的日内RSD分别为0.17%、0.53%和0.21%，日间
1.1仪器
美国Waters公司的高效液相色谱仪（附2998光电二极管矩阵检测器）；瑞士梅特勒-托利多酸度计（上海斯坦福生物科技发展有限公司）；德国赛多利斯BT25S十万分之一天平（上海台衡仪器仪器表有限公司）。1.2试剂
CDEZ-VIT-004N维生素C对照品（美国；批号：18976；规格：1g/瓶）；维生素C注射液（北京双鹤药业股份有限公司；批号：1009301；规格：每支1.0g/5ml）；磷酸二氢钾（北京北化精细化学品有限责任公司；批号：20090810；分析纯，纯
MEDICALRSD分别为2.98%、2.06%和2.78%。2.4回收率试验 精密量称取已知含量的供试品溶液0.5ml，共9份，分 2011年9月第8卷第27期 ·药品鉴定·