骨 淋 培 肿 秋 摘 低 固 铺 染 镜 核 巴 养 瘤 组 组 髓 结 织 织 水 仙 素 处 理 出 组 织 渗 处 理 定 细 胞 片 色 检 照 相 型 分 析 实验三 染色体相对长度和臂比的测定
一、目的:掌握染色体组型分析的方法。
染色体相对长度和臂比的测定是研究染色体形态、结构和计算的必要方法,是研究染色体组型(核型)的最基本方法。
二、器具:显微镜、测微尺、量角规(分规)、毫米尺、计数器、绘图铅笔。 三、材料:放大配对的染色体组型。 四、公式:
某染色体的相对长度(%)=X–某对染色体的绝对长度 A–全相染色体的总长度
染色体的相对长度是用每条染色体的长度分别占全组染色体总长度的百分比来表示。
臂比=
五、方法与步骤
1、选择:选取一个中期染色体分散良好的细胞,进行显微镜摄影,将底片放大成照片。 2、测量:在显微镜下,把放大照片上的每条染色体用测微尺依次测量其长度,以微米为单位记下绝对长度。记录每条染色体的绝对长度,长臂和短臂的长度以及染色体的类型。在显微镜下用测微尺量染色体的实际长度时,每个细胞中只选取一条染色体加以测量,依次与放大照片换算,即可求得每条染色体的实际长度。
X A长臂长度
短臂长度4
3、计算
(1)、求出染色体总长度。
(2)、求出每条染色体的相对长度。 (3)、计算每条染色体的臂比。
4、填表格:把测定和计算结果填在表格内。
相对长度用%表示:是×5、描述:
对每条染色体的类型、大小与前一对长度的比例、着丝点的位置等特点进行文字描述,观察有无染色体数目、形态的变化。
?s ? 染色体号 类型 绝对长度 长臂长 短臂长 臂比
实验四 果蝇雌雄鉴别和变种观察
一、目的:掌握雌雄鉴别方法和认识某些突变种特性,为以后的实验打好基础。 二、材料及用具:野生型及突变种果蝇、解剖镜(或放大镜)、麻醉瓶、解剖针、毛笔、白瓷板、体瓶、乙醇。
三、内容及步骤: 1、雌雄鉴别
(1)、麻醉瓶的棉花塞用乙醚浸湿。
(2)、将培养瓶中的果蝇拍落在麻醉瓶中,盖好瓶塞。全部果蝇呈昏迷状态后,倒在白瓷板上,进行观察(本次实验可以深麻以至杀死,但应注意染交实验切勿深麻)。
雌雄鉴别可参考下表进行:
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肉眼观察:
雌 1、一般体积大 2、腹部呈椭圆形,尾端小,腹面为白色 3、由背面看腹部,有五条排列均匀的黑色横纹 雄 1、一般体积小 2、腹部呈圆筒形,尾端圆,腹部为黑色 3、背面、腹部有两条黑细纹及一条宽黑纹而使尾端里一片黑色 解剖镜下观察:
雌 1、由腹面可见六个腹片 2、由腹部可看到生殖孔和肛板 3、无性梳 雄 1、由腹面可见4个腹片 2、由腹部可见抱器及阴茎 3、左第一对节足的第一节上有梳状黑毛一簇,称为性梳
2、突变种观察
(1)、仔细观察突变种果蝇的体色、眼色、眼的形状及翘形状,并和野生型比较。 (2)、熟悉主要变种的代号。
附录一 果蝇(Drosophjlameldn Dhaster)
果蝇具有生活史短、繁殖率高、饲养简便等特点。是研究遗传学的好材料。也是很经典的材料。尤其在基因分离、连锁、交换等方面。对果蝇的研究广泛而充分。
一、果蝇的生活史
果蝇属于昆虫纲,双翅目,与家蝇是不同的种。它的生活史和昆虫一样:卵→幼虫→蛹→成虫。
果蝇的生活周期长短与温度关系很密切。30℃以上温度能使果蝇不育和死亡。低温则使它的生活周期延长,同时生活力也降低。果蝇培养的最适温度为20~25℃。
从表2中可以看出25℃时,从卵到成虫约10天。在25℃时成虫约成活15天。果蝇一般培养在恒温箱内,盛夏时,要注意降温。
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果蝇生活周期长短与饲养温度关系
培养温度 发育阶段 卵—幼虫 幼虫—成虫 10℃ 15℃ 20℃ 25℃ 8天 5天 4天 57天 18天 6天
果蝇有雌雄之分,幼虫期区别较难,成虫区别容易。雌雄的腹部环纹5节,末端A而圆,颜色深。第一对脚的A节前表面有黑色A毛流苏,称性梳(Sexcomos)。
雌雄腹部环纹7节,末端尖,颜色浅,节前端无黑色A毛流苏。
果 蝇 品 种 表
序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 美国野生型 黄体 痕迹翅 粗糙眼 小翅 棱形眼 白眼卷刚毛短翅 刚毛粗短念珠状翘翅 wild ry GL nuy Ly Usnm Be Ⅹ Ⅱ Ⅲ Ⅱ Ⅹ Ⅹ Ⅱ Ⅲ Ⅹ Ⅹ Ⅲ Ⅲ Ⅱ 短刚毛第三染色体逆位 So/ln(sLRuoⅩio) 白眼 黄体白眼卷刚毛 刚毛多 黑檀体 黑檀、小翅 U Yusm f ba E enue
二、果蝇的繁育
果蝇在水果摊或果园里常见到,但它并不是以水果为生,而是食生在水果上的酵母菌。因此实验室内凡能发酵的基质均可做果蝇饲料。常用的饲料有:玉米饲料、米粉饲料、香A饲料等。下面举玉米饲料的配制方法。
(一)、果蝇饲料的制备:
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