消化道平滑肌生理特性及药物影响
一、实验目的:
1、学习哺乳动物离体器官的灌流实验法。
2、观察消化道平滑肌自律性运动及药物温度的影响。 二、实验对象: 三、实验方法: 1、实验装置的准备:
(1)麦氏浴槽灌流:该浴槽坐浴于盛水的烧杯中,酒精灯加热,温度计测量,控
温于37度左右(因水浴升降温速度较慢),故可用此法来维持温度。 (2) 恒温浴槽的换液方法:其排水管道上夹有弹簧夹,打开用50毫升注射器抽取,
可使灌浴槽中的液体流出,主管则可加入新鲜台氏液
(3)描记装置:通过张力换能器将信号输入实验系统的通道4,打开计算机,D95
主界面
生理
消化道平滑肌生理特性。
2、制备离体小肠标本:用铁棒猛击兔头枕部,使其昏迷,立即剖开腹腔,找出胃幽门与十二指肠交界处,由此取20~30cm长的肠管。先将与该肠管相连的肠系膜沿肠缘剪去,再将拟取肠管两端分别用线结扎,于结扎两端内侧剪断,取出肠段,置于台氏液中轻轻漂洗,当肠内容物基本洗净之后,将肠管分成6段,每段长2~3cm,两端各系一条线,保存于室温台氏液中。
3标本安装:当实验装置准备完毕,将肠段一端牢固地系在通气管钩上,放入准备好的麦氏浴槽中(室温台氏液),另一端系在张力换能器的悬梁臂上,调节氧气袋出气管上的滚轴,控制通气量(使空气气泡从通气管前端呈单个而不是成串逸出,以免振动悬线影响记录),酒精灯开始加热台氏液到37度,实验开始 3、观察项目
观察离体小肠平滑肌收缩的节律、波形和幅度。 (注意:收缩曲线的基线代 表小肠平滑肌的紧张性,因此实验过程中不要随意移动该基线。) 四、实验结果:
实验项目 收缩幅度 收缩节律 室温台氏液→37度 1/10万Ach2滴 ↑↓ 1/万 Adr2滴 ↑↓ 1/万 Atr2滴 ↑↓ 2min后加Ach2滴↑↓
换25度台氏液 继之→42度 42度→ 五、实验讨论:
1、正常曲线:幅度高低取决于钙离子内流量,取决于动作电位,钙离子内流可加
强平滑肌收缩,因此,动作电位频率越高,平滑肌收缩强度越大,频率即收缩节律,最终受基本电节律控制。
2、加乙酰胆碱,兴奋消化道平滑肌上M受体,平滑肌收缩加强,幅度节律都增加。 3、加肾上腺素,兴奋消化道平滑肌上α受体,β受体,引起平滑肌舒张,幅度下
降,节律下降。
4、加阿托品,抑制消化道平滑肌上M受体,平滑肌收缩受抑制,幅度频率都下降。 5、换25度台氏液,低温,平滑肌痉挛性收缩后,稳定于此环境中,与37度相比,
幅度节律均下降。 6、25度持续加热过程:
(1)25度到42度,随着温度升高,组织代谢升高,酶活性增加,消化道平滑肌收缩
幅度节律都增加。
(2)大于42度,随着温度升高,组织受损,酶活性下降,消化道平滑肌收缩幅度节
律都下降。 六、实验结论:
1、乙酰胆碱使平滑肌收缩加强,幅度节律都增加
2、肾上腺素,阿托品低温使平滑肌收缩减弱,幅度节律都下降
3、在一定温度范围内,随着温度升高,平滑肌收缩加强,幅度节律都增加 【注意事项】
1、标本连线必须垂直,并不得与浴槽管壁、通气管和温度计接触,以免磨擦影响
记录。
2、实验过程中,必须保证标本的供氧及浴槽内台氏液温度恒定(37℃)。 3、灌流浴槽内的液面高度应保持相对恒定。 4、麦氏浴槽放入标本后,由室温开始加热。
5、 每次加药前必须先准备好更换用的37~38℃台式液,效应一旦出现,立即换液
2~3次,换液应沿内壁流入, 避免对肠段的直接冲击,扰记录曲线。待肠段恢复正常活动后再进行下一项步骤。