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湖南师范大学硕士研究生入学考试自命题考试大纲
考试科目代码：014-858 考试科目：基因工程
一、 考试形式与试卷结构
1） 考试成绩及考试时间
本试卷满分为150分，考试时间为180分钟。
2） 答题方式
答题方式为闭卷、笔试。
3） 试卷内容结构
基因工程 130分
心脏发育的基因调控 20分
4） 题型结构
名词解释 10个 40分 填空题 20个 20分 简答题 5个， 50分 分析题 2个， 40分
二、 考试内容与考试要求 （一） 基因工程部分
第一章 基因工程概述
基因工程的基本概念，基因工程的基本流程，基因工程诞生的标志，基因工程有哪些主要应用？
第二章 基因工程的工具酶和载体
1.基因工程的工具酶
基因工程的工具酶有哪些？限制性内切核酸酶的特点与使用注意事项，DNA聚合酶和Klenow大片段的作用，DNA连接酶的作用， 碱
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性磷酸酶的作用及用途，末端脱氧核苷酸转移酶的用途和作用等。 2. 基因工程的载体
基因工程载体必须满足的基本条件，质粒载体的主要特征与基本结构，噬菌体载体有哪些类型，克隆载体有哪些类型？携带能力有多大？人工微小染色体的概念，标记基因的种类。什么是α互补？表达载体的概念与基本结构，T7噬菌体启动子系统的组成、融合蛋白表达系统的概念与载体结构，真核表达系统的载体组成，真核表达载体高效表达的实现条件，各种载体的结构特征与各结构的作用等。
第三章 目的基因的制备与鉴定
1.基因文库
基因组文库的概念，基因组文库的构建方法， cDNA文库的概念和构建流程，构建cDNA文库需要用到哪些工具酶，合成cDNA第二条链有哪些方法等。 2.PCR技术
PCR技术的基本原理，PCR反应体系的主要成分，PCR反应主要程序，提高PCR反应特异性的措施。逆转录PCR、巢式PCR、反向PCR、多重PCR及荧光定量PCR的概念和应用。 3.蛋白质工程
基因组数据库的概念，蛋白质工程的概念，PCR介导定点突变的原理。
4. 目的基因重组子的鉴定
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核酸分子杂交的概念，探针的类型与标记方法。Southern杂交、Northern杂交、Western杂交及菌落（嗜菌斑）原位杂交的基本原理以
及
它
们
之
间
的
相
同
点
与
不
同
点
。
末端终止法DNA测序的基本原理，化学降解法测序的基本原理，DNA自动测序的基本原理等等。
第四章 基因工程在基因功能研究中的应用
1.基因表达谱的研究
胚胎原位杂交的概念，胚胎抗体染色的概念，基因芯片的概念与类型，基因芯片的流程与应用。 2. 基因突变与基因敲除
转座子诱变的原理与优点，基因敲除的概念与流程，条件基因敲除的原理与优点，RNA干扰的概念与分子机制，RNA干扰的优点与应用。基因过表达系统的组成，UAS-GAL4系统的组成与优点。 3.基因的相互作用研究
凝胶迁移阻滞实验的原理与应用，酵母双杂交系统的原理与组成、酵母双杂交系统的应用，免疫共沉淀的原理等。
第五章 转基因植物
1.转基因植物的制备
植物转基因的受体系统的类型，外源基因导入植物的方法， Ti质粒的结构特点， Ti质粒介导植物基因转移的过程。植物转基因载
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