有 机 化 学 实 验 教案 实验名称：氨基酸和蛋白质的性质
11化学班 yingshou
【实验原理】
蛋白质是存在于细胞中的一种含氮的生物高分子化合物，在酸、碱存在下，或受酶的作用，水解成相对分子质量较小的月示、胨、多肽和二羧胡椒嗪，而水解的最终产物为各种氨基酸，其中以α-氨基酸为主。 关于氨基酸和蛋白质的性质我们只做蛋白质的沉淀、蛋白质的颜色反应和蛋白质的分解等性质实验,这些性质有助于认识或鉴定氨基酸和蛋白质。 一、蛋白质的沉淀反应原理： 蛋白质是亲水胶体，当其稳定因素被破坏或与某些试剂结合成不溶性盐类后，即自溶液中沉淀析出
二、颜色反应原理：
蛋白质的呈色反应是指蛋白质所含的某些氨基酸及其特殊结构，在一定条件下可与某些试剂发生了生成有色的物质的反应。 不同蛋白质分子所含的氨基酸残基也是不完全相同，因此所发生的成色反应也不完全一样。另外呈色反应并不是蛋白质的专一反应，某些非蛋白质类物质（含有-CS-NH、-CH2-NH2、-CRH-NH2、-CHOH-CH2NH2等基团的物质）也能发生类似的颜色反应。因此，不能仅仅根据呈色反应的结果为阳性就来判断被测物质一定是蛋白质。 三、用碱分解蛋白质原理
蛋白质因受某些物理或化学因素的影响，分子的空间构象被破坏，从而导致其理化性质发生改变并失去原有的生物学活性的现象称为蛋白质的变性作用。
【仪器和药品】
仪器：试管、量筒、滴管、
药品： 清蛋白溶液、硫酸铜、碱性醋酸铅、氯化汞、饱和硫酸铵、5%醋酸、饱和苦味酸、饱和鞣酸、1%甘氨酸、络氨酸、色氨酸、茚三酮试剂、浓硝酸、20%氢氧化钠、硝酸汞、30&碱液、10%硝酸铅
【实验过程和步骤】
1.蛋白质的沉淀
（1）用重金属盐沉淀蛋白质 取3支试管，标明号码，各盛1mL清蛋白溶液，分别加入饱和硫酸铜、碱性醋酸铅、氯化汞2-3滴（小心有毒），观察有无蛋白质沉淀析出？
（2）蛋白质的可逆沉淀 取2mL清蛋白溶液，放在试管里，加入同体积的饱和硫酸铵溶液，将混合物稍加振荡，析出蛋白质沉淀使溶液变浑或呈絮状沉淀。将1mL浑浊的液体倾入；另一支试管中，加入1-3mL水，振荡时，蛋白质沉淀是否溶解？
（3）蛋白质与生物碱试剂反应 取2支试管，各加0.5mL蛋白质溶液，并滴加5%的醋酸使之呈酸性。然后分别滴加饱和的苦味酸溶液和饱和的鞣酸溶液，直到沉淀发生为止。 2.蛋白质的颜色反应
（1）与茚三酮反应 在4支试管里，分别加入1%的甘氨酸、酪氨酸、色氨酸和鸡蛋白溶液各1mL，再分别滴加茚三酮试剂2-3滴，在沸水浴中加热10-15min观察有什么现象？
（2）黄蛋白反应 于试管中加入1-2mL清蛋白溶液和1mL农硝酸，此时呈现白色沉淀或浑浊。在灯焰上加热煮沸，此时溶液和沉淀是否都呈黄色？有时由于煮沸使析出的沉淀水解，而使沉淀全部或部分溶解，溶液的黄色是否变化？
（3）蛋白质的二缩脲反应 取1-2mL 20%氢氧化钠溶液放在试管中，再加几滴硫酸铜溶液共热，现象如何？是否由于蛋白质与硫酸铜生成了络合物而呈紫色？ 取1%甘氨酸溶液作对比试验，此时仅有氢氧化铜沉淀析出。
（4）蛋白质与硝酸汞试剂作用 取2mL清蛋白溶液放入试管中，加硝酸汞试剂2-3滴，现象如何？小心加热，此时原先析出的白色絮状是否聚集成块状？并显砖红色，有时溶液也呈红色。用酪氨酸重复上述过程，现象如何？ 3.用碱分蛋白质
取1-2mL清蛋白溶液放在试管里，加两倍体积的30%碱液，把混合物煮沸2-3min，此时析出沉淀，继续沸腾时，此沉淀又溶解，放出氨气。
上面的热溶液中加入1mL 10%硝酸铅溶液，再将混合物煮沸，起初生成的白色氢氧化铅沉淀溶解在过量的碱液中。如果蛋白质与碱作用有硫脱下，则生成硫化铅，结果清亮的液体逐渐变成棕色。若脱下的硫较多时，则析出暗棕色或黑色的硫化铅沉淀。
【注意事项】
1．在使用某些重金属盐(如硫酸铜或醋酸铅)沉淀蛋白质时，不可过量，否则将引起沉淀再
溶解。
2．本次实验为定性实验，试剂的量取用滴管完成。
【现象记录与数据处理】 实 验 步 骤
实 验 现 象 原理 【问题设计】
(1)蛋白质的盐析和蛋白质的沉淀有何差别？ 答：变性，蛋白质已经失去活性，（就好像是死亡了）是不可逆的。
而盐析，只是由于蛋白质的溶解度减小，所以析出了。只要把析出的蛋白质，再加入水中，蛋白质又会溶于水。盐析是物理变化，是可逆的，相当于蛋白质没有变化。 (2)怎样区别氨基酸与蛋白质?
答：用双缩脲试剂（蛋白质能使双缩脲试剂变色是因为有肽键）
【板书设计】
一、实验目的:
1.掌握氨基酸和蛋白质的化学性质 2.掌握鉴别氨基酸和蛋白质的方法
二、实验原理:
蛋白质是存在于细胞中的一种含氮的生物高分子化合物，在酸、碱存在下，或受酶的作用，水解成相对分子质量较小的月示、胨、多肽和二羧胡椒嗪，而水解的最终产物为各种氨基酸，
其中以α-氨基酸为主。 关于氨基酸和蛋白质的性质我们只做蛋白质的沉淀、蛋白质的颜色反应和蛋白质的分解等性质实验
三、药品与仪器:
仪器：试管、量筒、滴管、
药品： 清蛋白溶液、硫酸铜、碱性醋酸铅、氯化汞、饱和硫酸铵、5%醋酸、饱和苦味酸、饱和鞣酸、1%甘氨酸、络氨酸、色氨酸、茚三酮试剂、浓硝酸、20%氢氧化钠、硝酸汞、30&碱液、10%硝酸铅
四、实验步骤: 1.蛋白质的沉淀
（1）用重金属盐沉淀蛋白质 取3支试管，标明号码，各盛1mL清蛋白溶液，分别加入饱和硫酸铜、碱性醋酸铅、氯化汞2-3滴（小心有毒），观察有无蛋白质沉淀析出？
（2）蛋白质的可逆沉淀 取2mL清蛋白溶液，放在试管里，加入同体积的饱和硫酸铵溶液，将混合物稍加振荡，析出蛋白质沉淀使溶液变浑或呈絮状沉淀。将1mL浑浊的液体倾入；另一支试管中，加入1-3mL水，振荡时，蛋白质沉淀是否溶解？
（3）蛋白质与生物碱试剂反应 取2支试管，各加0.5mL蛋白质溶液，并滴加5%的醋酸使之呈酸性。然后分别滴加饱和的苦味酸溶液和饱和的鞣酸溶液，直到沉淀发生为止。 2.蛋白质的颜色反应
（1）与茚三酮反应 在4支试管里，分别加入1%的甘氨酸、酪氨酸、色氨酸和鸡蛋白溶液各1mL，再分别滴加茚三酮试剂2-3滴，在沸水浴中加热10-15min观察有什么现象？
（2）黄蛋白反应 于试管中加入1-2mL清蛋白溶液和1mL农硝酸，此时呈现白色沉淀或浑浊。在灯焰上加热煮沸，此时溶液和沉淀是否都呈黄色？有时由于煮沸使析出的沉淀水解，而使沉淀全部或部分溶解，溶液的黄色是否变化？
（3）蛋白质的二缩脲反应 取1-2mL 20%氢氧化钠溶液放在试管中，再加几滴硫酸铜溶液共热，现象如何？是否由于蛋白质与硫酸铜生成了络合物而呈紫色？ 取1%甘氨酸溶液作对比试验，此时仅有氢氧化铜沉淀析出。
（4）蛋白质与硝酸汞试剂作用 取2mL清蛋白溶液放入试管中，加硝酸汞试剂2-3滴，现象如何？小心加热，此时原先析出的白色絮状是否聚集成块状？并显砖红色，有时溶液也呈红色。用酪氨酸重复上述过程，现象如何？ 3.用碱分蛋白质
取1-2mL清蛋白溶液放在试管里，加两倍体积的30%碱液，把混合物煮沸2-3min，此时析出沉淀，继续沸腾时，此沉淀又溶解，放出氨气。
上面的热溶液中加入1mL 10%硝酸铅溶液，再将混合物煮沸，起初生成的白色氢氧化铅沉淀溶解在过量的碱液中。如果蛋白质与碱作用有硫脱下，则生成硫化铅，结果清亮的液体逐渐变成棕色。若脱下的硫较多时，则析出暗棕色或黑色的硫化铅沉淀。
五、注意事项:
1.在使用某些重金属盐(如硫酸铜或醋酸铅)沉淀蛋白质时，不可过量，否则将引起沉淀再溶解。
2.本次实验为定性实验，试剂的量取用滴管完成。